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姚敏: 作品数：31 被引量：30H指数：3; 供职机构：第四军医大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国肝炎防治基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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调控型表达丙型肝炎病毒NS3／4A蛋白酶转基因小鼠的建立被引量：1: 2011年; 目的建立调控因素存在下表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A丝氨酸蛋白酶的转基因小鼠。方法采用分子克隆技术构建可受Tet-On调控系统和Cre-LoxP基因敲除系统双重调控表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的真核表达质粒PBI-Ⅲ/LoxP-Luc-PolyA-LoxP-NS3/4A。该重组质粒线性化后,经显微注射制备转基因小鼠。首建鼠及经PCR检测阳性的子代鼠与C57BL/6小鼠交配传代。选择部分F2鼠与已经稳定建系的转基因小鼠Lap杂交,利用在体生物发光成像系统(BLI)检测肝脏稳定表达荧光素酶(Luc)报告基因的经盐酸强力霉素(Dox)诱导的双转基因子代鼠,并选择性针对稳定表达系传代扩群。结果酶切鉴定和测序分析显示重组载体构建成功。经PCR检测得到6只转基因首建鼠,其中3只可繁殖传代并持续检测到阳性子代鼠。BLI结果显示,由其中1只首建鼠传代而来的不同F2鼠与Lap鼠杂交得到的部分双转基因鼠肝脏部位发光信号强烈,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达。结论建立了转基因小鼠NS3/4A,并筛选到调控因素存在时转入外源基因特异稳定表达的转基因小鼠,为进一步建立严格调控型表达NS3/4A蛋白酶的小鼠模型奠定基础。; 孙梦宁兰海云马玉赵亚吕欣杨敬雷迎峰姚敏康健招明高汪爱勤尹文; 关键词：肝炎病毒属动物小鼠转基因

医学微生物学课程教学中人文素养的渗透被引量：3: 2016年; 医学兼具人文社会属性,对于医学生培养而言,人文素养培育的重要性不言而喻,现今医患矛盾的加剧更突显了对医学生人文素养培育的迫切性。医学微生物学作为基础医学与临床医学的桥梁学科,其在理论教学与实验教学中可以渗透入大量与人文素养相关的内容,通过多样性的教学方式、教学内容上有意识的引导,对于医学生人文素养的培育能起到很好的作用。; 吕欣姚敏柏银兰张芳琳; 关键词：医学微生物学医学生人文素养

丙型肝炎病毒NS3-5B转基因小鼠模型的构建: 2015年; 目的:构建表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3-5B蛋白的转基因小鼠模型。方法:显微注射线性化p IRES2-EGFP-NS3-5B载体到小鼠受精卵,制备并传代筛选HCV NS3-5B转基因小鼠;通过血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)检测和肝脏HE染色,对6周龄转基因小鼠进行肝功能评价。结果:PCR、RT-PCR和Western印迹结果表明HCV NS3-5B转基因小鼠构建成功;6周龄部分转基因小鼠血清ALT和AST值升高,但差别无统计学意义,肝组织形态无改变。结论:构建了HCV NS3-5B转基因小鼠模型,为进一步在体研究HCV复制复合体建立了平台。; 赵海卫韩佩君姚敏吕欣雷迎峰杨敬乔卿华翁代慧党品香尹文; 关键词：丙型肝炎病毒转基因小鼠模型

基因枪法和肌内注射法免疫HCV NS3/4A诱导小鼠免疫应答的比较: 2012年; 目的比较肌内注射法和基因枪法对免疫效果的影响。方法将携带HCV NS3/4A基因的质粒pcDNA3.1-NS3/4A,分别肌内注射和基因枪免疫BALB/c小鼠。基因枪免疫采用2μg/只和10μg/只两种剂量,肌内注射免疫的剂量为100μg/只,共免疫3次。分别于第3次免疫后10 d和20 d,收集小鼠血清、分离脾细胞;ELISA法检测小鼠血清中特异性抗体水平;ELIspot检测小鼠IFN-γI、L-2和IL-4;非放射性细胞毒性试验检测其对肿瘤细胞的杀伤作用,从而比较肌内注射和基因枪法激发小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答的影响。结果免疫后第10 d检测结果表明,2μg/只和10μg/只基因枪法免疫产生的抗体效价分别为1∶500和1∶1 000,100μg/只肌内注射免疫产生的抗体效价为1∶1 000。第20 d再次检测,基因枪法产生的抗体效价仍为1∶500和1∶1 000,肌内注射降低为1∶500。2μg/只和10μg/只基因枪免疫产生的IFN-γ和IL-2均高于100μg/只肌内注射免疫。但这两种免疫方法均未激发IL-4的水平。在不同的效靶比情况下,10μg/只和2μg/只基因枪免疫激发的CTL细胞杀伤活性均高于100μg/只肌内注射免疫。结论基因枪法免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答均显著高于肌内注射免疫。; 姚敏尹文雷迎峰杨敬黄小军康健吕欣; 关键词：基因枪肌内注射丙型肝炎病毒免疫应答

HCV NS3-5B转基因小鼠模型的构建: 目的构建表达HCV NS3-5B蛋白的转基因小鼠模型。方法显微注射线性化pIRES2-EGFP-NS3-5B载体到小鼠受精卵，制备并传代筛选HCV NS3-5B转基因小鼠；通过血清ALT、AST检测和肝脏HE染色对6...; 赵海卫吕欣雷迎峰姚敏乔卿华韩佩君张芳琳徐志凯尹文; 关键词：丙型肝炎病毒动物模型

Tet-on和Cre/loxP系统双重调控HCV NS5B真核表达载体的设计与构建: 2010年; 目的:构建可受Tet-on和Cre/loxP系统双调控的HCV NS5B真核表达载体,为建立可严格调控HCVNS5B蛋白表达的转基因小鼠奠定基础。方法:以真核表达载体pBI-3为载体构建骨架,在其启动子下游依次插入luc报告基因、BGHpA和NS5B基因片段,并分别在luc报告基因上游和BGHpA尾下游引入一个loxP位点。结果:成功构建了可受Tet-on和Cre/loxP系统双调控的HCV NS5B真核表达载体pBI-3/luc-BGHpA-NS5B。结论:pBI-3/luc-BGHpA-NS5B真核表达载体的成功构建为可严格调控HCV NS5B蛋白表达转基因小鼠的建立打下了良好的基础。; 马玉赵亚孙梦宁兰海云吕欣杨敬雷迎峰姚敏尹文汪爱勤; 关键词：HCV NS5B 转基因小鼠 TET-ON

HCVNS3-5B转基因小鼠模型的构建: 目的：构建表达HCV NS3-5B 蛋白的转基因小鼠模型。方法：显微注射线性化pIRES2-EGFP-NS3-5B 载体到小鼠受精卵，制备并传代筛选HCV NS3-5B 转基因小鼠;通过血清ALT、AST 检测和肝脏HE...; 赵海卫吕欣雷迎峰姚敏乔卿华韩佩君张芳琳徐志凯尹文; 关键词：丙型肝炎病毒动物模型

HCV感染过程中的相关免疫反应: 2016年; 丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)是慢性丙型病毒性肝炎的主要病因,也是引发肝硬化和肝癌的主要诱因。在HCV感染过程中,伴随着干扰素信号通路的激活和干扰素刺激基因(IFN-stimulated gene,ISG)的持续表达,且有HCV独特的免疫逃逸和免疫细胞的功能损伤。现就HCV感染过程中机体的固有免疫反应和适应性免疫反应的研究进展作一综述。; 姚敏吕欣; 关键词：丙型肝炎病毒

表达丙型肝炎病毒核心蛋白的人肝癌稳定转染细胞株的建立与鉴定被引量：2: 2014年; 目的建立能表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV core)的人肝癌细胞SMMC-7721的稳定转染细胞株。方法构建含目的基因HCV core的重组质粒,转染HEK293T细胞,包装获得含ZsGreen和HCV core基因的慢病毒后,感染SMMC-7721人肝癌细胞,采用实时荧光定量PCR检测HCV core mRNA表达,采用免疫荧光细胞化学染色和Western blot法检测HCV core蛋白表达,筛选稳定表达HCV core的细胞株。结果质粒酶切和序列测定证实重组载体构建正确;慢病毒包装48 h后可见清晰ZsGreen表达,感染SMMC-7721细胞后筛选获得稳定转染的细胞株,实时荧光定量PCR检测到HCV core mRNA,免疫荧光细胞化学染色和Western blot法均检测出HCV core蛋白表达。结论成功构建了表达HCV core蛋白的SMMC-7721人肝癌细胞的稳定转染细胞株。; 乔卿华吕欣雷迎峰杨敬姚敏韩佩君党品香赵海卫翁代慧尹文; 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白肝癌细胞株慢病毒

医学院校病原微生物学实验室的科学管理探讨被引量：4: 2013年; 病原微生物学作为生物医学领域中一门重要的前沿基础学科,与基础医学、临床医学广泛交叉、相互渗透,在医学院校课程设置中占有重要地位。在教学过程中实验课占有特殊的重要作用,在医学本科生和研究生的培养过程中,都不可避免的要涉及到实验室的使用和管理。因此,病原微生物学实验室的管理显得非常重要。从优化实验室布局、实施标准化管理、规范人员职责、规范人员培训、加强试剂采购和废弃物处理等几个方面,结合实际工作分析了加强病原微生物学实验室管理的几点看法,供同行参考。; 康健王丽梅王平柏银兰吴兴安姚敏徐志凯; 关键词：病原微生物学生物安全实验室管理

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