宋立孝
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：徐州市科技计划项目江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信更多>>
- 趋化因子受体7基因修饰的未成熟树突细胞对小鼠移植物抗宿主病的作用研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨趋化因子受体7（CCR7）基因修饰的未成熟树突细胞（imDC）对异基因骨髓移植（allo．BMT）小鼠急性移植物抗宿主病（6vno）的影响。方法构建CCR7重组慢病毒载体，包装后感染imDC；以C57BL／6小鼠为供鼠，BABL／c小鼠为受鼠，建立小鼠GVHD模型；实验分为4组，分别为单纯照射组、移植对照组、pXZ9．imDC组（空载体对照）和CCR7-imDC组；通过观察受鼠移植后生存期、GVHD临床评分、组织病理学改变、炎性细胞因子浓度等评价CCR7-imDC防治GVHD的作用。结果单纯照射组、移植对照组、pXZ9-imDC组和CCR7-imDC组小鼠存活时间分别为（8．20±1．48）、（12．20±2．78）、（20．70±6．01）和（27．50±7．55）d，CCR7-imDC组小鼠存活时间明显长于其他各组（P〈0．01）。移植对照组、pXZ9-imDC组和CCR7-imDC组小鼠GVHD评分分别为（6．90±1．66）、（5．60±0．97）和（4．10±1．79）分，CCR7-imDC组较其他两组GVHD评分降低（P〈0．05），组织病理学改变最轻。移植对照组小鼠血清IFN-丫浓度升高，在＋i0d时达高峰，而pXZ9-imDC组和CCR7-imDC组IFN-γ浓度降低，＋20d时降至最低，CCR7-imDC组降低最明湿（P〈0．01）。移植对照组小鼠血清IL-4降低，而pXZ9-imDC组和CCR7-imDC组IL-4浓度渐升高，＋10d达高峰，以CCR7-imDC组升高最明显（P〈0．01）。＋30d，CCR7-imDC组存活受鼠骨髓异基因嵌合率为95％～100％，证实为完全供者型植入。结论CCR7-imDC能够明显延长受鼠的存活时间，减轻急性GVHD的发生。
- 李德鹏武家庆黄一虹宋立孝谷红红高彩玲李振宇潘秀英徐开林
- 关键词：树突细胞基因CCR7小鼠移植物抗宿主病
- H142.趋化因子受体-7基因绿色荧光慢病毒载体的构建及其在未成熟树突细胞中的表达
- 黄一虹宋立孝陈翀张璞王淑华李德鹏
- 文献传递
- 趋化因子受体7基因修饰的未成熟树突状细胞对异基因骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病的作用
- 目的:探讨趋化因子受体7基因(CCR7)修饰的未成熟树突状细胞(imDCs)对异基因骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法:以C57BL/6小鼠(H-2b)为供鼠,BABL/c小鼠(H-2d)为受鼠,建立...
- 李德鹏武家庆黄一虹高彩玲宋立孝谷红红李振宇潘秀英徐开林
- 关键词：未成熟树突状细胞重组慢病毒异基因骨髓移植移植物抗宿主病
- 趋化因子受体7基因绿色荧光慢病毒载体构建及在未成熟树突状细胞中的表达被引量：4
- 2012年
- 背景:趋化因子受体7(chemokine receptor-7,CCR7)是树突状细胞从外周迁移至淋巴系统发挥作用的最重要的启动和调节者,但未成熟树突状细胞表面不表达CCR7,因此利用携带CCR7基因的未成熟树突状细胞可以更好地诱导免疫耐受。目的:构建携带小鼠CCR7基因的绿色荧光蛋白重组慢病毒载体,观察其在未成熟树突状细胞中的表达。方法:采用RT-PCR扩增小鼠CCR7基因并克隆至pCR-Blunt载体。将CCR7DNA片段及IRES-GFP连入慢病毒转移质粒LV-Lac,生成重组慢病毒质粒LV-CCR7。采用脂质体转染法将慢病毒系统3质粒(重组慢病毒质粒LV-CCR7、包装质粒ΔNRF及包膜质粒pVSVG)共转染包装慢病毒,重组慢病毒感染未成熟树突状细胞,光学显微镜观察细胞状态,流式细胞术鉴定CCR7蛋白的表达。结果与结论:实验成功扩增出小鼠CCR7DNA片段并克隆至pCR-Blunt载体,亚克隆构建慢病毒表达载体LV-CCR7,经3质粒包装系统感染293FT细胞后,24h于荧光显微镜下均观察到绿色荧光蛋白阳性表达,病毒滴度为108U/L以上,获得携带CCR7基因的重组慢病毒。慢病毒颗粒可有效感染未成熟树突状细胞,荧光显微镜可见大量GFP蛋白表达,阳性细胞达50%,流式细胞术检测到CCR7蛋白表达,LV-CCR7基因修饰的未成熟树突状细胞仍保持在未成熟状态。结果证实,实验成功构建携带小鼠CCR7基因绿色荧光慢病毒载体LV-CCR7,并可在未成熟树突状细胞细胞中表达。
- 宋立孝张璞李德鹏曾令宇陈翀潘秀英徐开林黄一虹
- 关键词：趋化因子受体7未成熟树突状细胞慢病毒载体真核表达
