常欣
- 作品数:4 被引量:6H指数:2
- 供职机构:安徽农业大学更多>>
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- 茶树CsCBF1基因表达载体的构建及其转基因烟草的抗寒性分析被引量:3
- 2012年
- 【目的】通过转基因烟草验证茶树CsCBF1基因抗寒性功能,为发掘、筛选茶树重要功能基因提供理论依据。【方法】利用根癌农杆菌介导法将构建的表达载体pBI121-CsCBF1导入烟草,通过PCR、RT-PCR和GUS活性染色鉴定外源CsCBF1基因是否导入并整合到烟草基因组上转录表达。然后将转pBI121-CsCBF1型、转pBI121型和野生型烟草分别置于25,4和0℃下处理48h后,检测其膜质通透性、丙二醛(MDA)含量和叶绿素荧光参数Fv/Fm,并将0℃处理3d的转pBI121-CsCBF1型和野生型烟草置于25℃下培养1周后观测恢复表型和统计死亡率。【结果】成功构建表达载体pBI121-CsCBF1,PCR、RT-PCR和GUS活性染色证明,CsCBF1已整合到烟草基因组中并转录表达。25℃处理下,转pBI121-CsCBF1型、转pBI121型和野生型烟草的膜质通透性、丙二醛含量和Fv/Fm均无显著差异,而在4和0℃处理下,转pBI121-CsCBF1型烟草的膜质通透性和丙二醛含量均显著低于转pBI121型和野生型烟草,但Fv/Fm显著高于转pBI121型和野生型烟草。生长恢复试验中,转pBI121-CsCBF1型的存活率为66.7%,而野生型仅为23.3%。【结论】茶树CsCBF1基因能够显著增强非低温驯化植物烟草的抗寒性,说明茶树CsCBF1基因存在于细胞抗寒的分子调控途径中,从而提高植物细胞的低温防御能力。
- 常欣庞磊李叶云魏艳丽江昌俊
- 关键词:茶树烟草抗寒性
- 低温胁迫下茶树CsCBF1调控途径及其体外功能鉴定的初步研究
- CBF(C-repeat binding transcription factor/dehydrate responsive element binding faclor,DREB)转录激活因子是受低温特异诱导的一类反式...
- 常欣
- 关键词:茶树抗寒性生理指标
- 文献传递
- 茶树脱水素基因dhn2原核表达条件优化被引量:2
- 2011年
- 为了提高可溶性脱水素dhn2重组蛋白在大肠杆菌的表达量,研究了不同诱导条件对其表达的影响,包括诱导时间,诱导温度,IPTG浓度和初始诱导浓度。结果表明:重组表达载体pEASY-E1-dhn2在大肠杆菌中最佳诱导时间为4h,最佳诱导温度为30℃,最佳IPTG诱导浓度为0.8mmol/L,最佳诱导初始浓度为OD600=0.2。
- 房超李叶云常欣丁菲江昌俊
- 关键词:茶树脱水素
- 低温胁迫下茶树CsCBF1调控途径及其功能鉴定的初步研究
- CBF(C-repeat binding transcription factor/dehydrate responsive element bindingfaclor,DREB)转录激活因子是受低温特异诱导的一类反式作...
- 常欣
- 关键词:茶树抗寒性低温胁迫
- 文献传递