李凌凌
- 作品数：5 被引量：43H指数：4
- 供职机构：安徽大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金安徽省高等学校优秀青年人才基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 糖多孢红霉菌λC3-SRR突变体的构建及其产物鉴定被引量：7
- 2004年
- 目的 :构建糖多孢红霉菌KR6酶域基因失活突变体 ,探讨SRR氨基酸相应 9核苷酸去除突变体与合成酮内酯类化合物 3 脱氧 3 羰基 红霉内酯B的关系。方法 :以糖多孢红霉菌基因组DNA为模板 ,用重叠PCR技术扩增出缺少SRR氨基酸相应 9核苷酸的KR6酶域DNA片段 ,并克隆到载体pWHM3上 ,构建了同源重组质粒pWHM3 SRR。将pWHM3 SRR质粒转化糖多孢红霉菌λC3菌株 ,筛选出质粒整合到染色体上红霉素合成基因位点的整合体λC3 A、B和C。λC3 A在无硫链丝菌肽 (Thio)的R3M斜面上生长两代后 ,制备的原生质体涂R3M平皿 ,挑选出不能在含Thio的R3M斜面上生长、发酵液也无抑制枯草芽孢杆菌活性的突变菌株λC3 SRR。结果 :部分基因组DNA序列分析表明 ,糖多孢红霉菌λC3 SRR染色体上SRR氨基酸相应 9核苷酸已经敲除 ,ZabspecFab质谱分析证实λC3 SRR菌株合成了 3 脱氧 3 羰基 红霉内酯B。结论 :糖多孢红霉菌KR6酶域SRR氨基酸相应 9核苷酸敲除的λC3 SRR突变菌株可以合成 3 脱氧 3 羰基 红霉内酯B ,SRR为KR6酶域上NADPH 2′ 磷酸结合位点。
- 李凌凌张部昌张华任洌刘传暄马清钧
- 关键词：糖多孢红霉菌聚酮合成酶同源重组
- 糖多孢红霉菌表达载体pZMW的构建被引量：14
- 2003年
- 目的 :构建能够在糖多孢红霉菌中稳定存在的表达性载体。方法 :用PCR方法从糖多孢红霉菌染色体上扩增红霉素抗性基因启动子PermE作为表达载体的启动子 ,并利用pSET1 5 2质粒上链霉菌染色体整合位点 (attP)和安普霉素抗性基因 ,构建了染色体整合型糖多孢红霉菌表达载体pZMW。结果 :pZMW表达载体能够整合到链霉菌和糖多孢红霉菌染色体上 ,并能够在链霉菌和糖多孢红霉菌体内表达硫链丝菌素抗性基因tsr。结论
- 张部昌李凌凌于秀琴刘传暄王以光贺秉坤马清钧
- 关键词：糖多孢红霉菌红霉素基因表达
- 大肠杆菌表达系统在红霉素基因工程中应用的研究进展被引量：4
- 2003年
- 大肠杆菌表达系统在红霉素基因工程中的应用面临着许多难题 :聚酮合成酶中ACP的后修饰、6_dEB生物合成前体供应、大环内酯糖基化修饰等。通过向大肠杆菌中转入枯草杆菌磷酸泛酰巯基转移酶基因sfp ,使大肠杆菌中合成的ACP得以后修饰 ;6_dEB生物合成前体丙酰CoA和丙二酰CoA可通过Pfeifer途径和Dayem途径提供 ;目前 ,在大肠杆菌体内已可以合成 6_dEB。利用大肠杆菌系统合成新的大环内酯化合物、对大环内酯糖基化修饰和提高大肠杆菌系统合成大环内酯类抗生素产量将是今后研究的重点。
- 张部昌张部昌李凌凌马清钧
- 关键词：大肠杆菌表达系统红霉素基因工程
- 糖多孢红霉菌λC3-SRR突变体构建及其产物鉴定
- 本文利用染色体同源重组方法，将糖多孢红霉菌染色体上KR6酶域DNA序列中编码VSRRG中的SRR三个氨基酸的九个核苷酸敲除，获得了可合成酮内酯类3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B的糖多孢红霉菌突变体λC3-SRR，为下一步筛...
- 李凌凌
- 关键词：糖多孢红霉菌酮内酯类抗生素
- 文献传递
- 红霉素抗菌作用及细菌产生红霉素抗性的机制被引量：20
- 2004年
- 红霉素是一类广谱的大环内酯类抗生素 ,随着红霉素在临床上的大量使用 ,红霉素也和其他抗生素一样出现了病原菌耐药性问题。从分子水平上将红霉素的抗菌机制与细菌产生耐药性机制联系起来对研制新一代的红霉素抗生素起指导性作用。红霉素通过从空间上阻滞新生肽链的延伸和促进pt -tRNA的脱落而起抗菌作用 ,而细菌则通过影响红霉素在胞内的积累、破坏红霉素的结构。
- 李凌凌张部昌马清钧
- 关键词：红霉素抗菌作用耐药机制核糖体
