刘晓明 作品数:5 被引量:5 H指数:1 供职机构: 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 更多>> 发文基金: 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 国家自然科学基金 病毒基因工程国家重点实验室开放课题基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
共表达丙性肝炎病毒结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc的慢病毒制备与鉴定 被引量:1 2015年 旨在制备共表达丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc慢病毒VSVppHCV。通过构建共表达HCV结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc的慢病毒表达载体pCSGluc2aCE1E2,与包膜质粒pVSVG,包装质粒pHR′CMVΔ8.2共转染HEK 293T的方式获取慢病毒,将慢病毒感染细胞后,对细胞上清中Gluc荧光素酶活性、细胞中HCV特异蛋白的表达等进行表达鉴定。结果表明:浓缩后获得的慢病毒浓度为1×108 TU/mL,电镜负染观察到直径约为100nm带包膜的浓缩慢病毒颗粒;慢病毒VSVpp-HCV感染细胞后,细胞内HCV特异蛋白及上清中Gluc荧光素酶的表达呈平行关系。因此通过检测Gluc荧光素酶的表达水平可反映HCV结构蛋白表达水平,这为建立基于慢病毒感染的带有报告基因的HCV转基因小鼠模型提供了基础。 张玲 刘晓明 宋敬东 新燕 邓瑶 谭文杰关键词:慢病毒 结构蛋白 丙型肝炎病毒(HCV)细胞进入抑制肽ZTE2序列及应用 本发明涉及丙型肝炎病毒(HCV)细胞进入抑制肽ZTE2序列及应用。所述多肽是根据HCV基因型2a参考株JFH-1的包膜蛋白E2的氨基酸序列合成(纯度>85%)的15肽。本发明中发现多肽E2-78和E2-79,如Seq I... 谭文杰 张玲 卢莎 邓瑶 陶格斯 刘晓明文献传递 HCV细胞培养适应性突变研究进展 2011年 HCV感染是一个重大的公共卫生问题,自2005年日本学者首次建立HCV感染性克隆与体外细胞培养技术以来,HCV细胞培养技术的改进与应用一直是HCV研究领域的热点,并取得许多重要进展.本文将着重阐述HCV细胞培养适应性突变对于HCV病毒感染性病毒颗粒滴度的影响. 刘晓明 新燕 谭文杰关键词:HCV 细胞培养 病毒滴度 四份中国HCV阳性血清中包膜蛋白E1/E2准种基因的序列分析及新型插入突变的发现 被引量:4 2012年 为分析四份中国丙型肝炎病毒(HCV)阳性血清中包膜蛋白E1/E2基因的准种特征。本研究对从4份中国HCV阳性血清(1b亚型:274、366和383;2a亚型:283)中提取的HCV核酸,采用逆转录-聚合酶反应扩增编码全长E1/E2蛋白(191~764aa)的基因片段,随机挑取多个克隆测序。根据E1/E2基因核苷酸的序列与其他相关序列(来自于GenBank)构建亲缘性关系进化树,进行核苷酸与氨基酸同源性分析并对重要的基因位点进行分析。共获得阳性克隆序列43个(274株10个,283株12个,366株13个,383株8个),发现高变区HVR1、HVR2的基因异质性高,而其他抗体中和表位及跨膜区I、II及N末端糖基化位点相对保守。并首次发现在HCV 2a亚型(283血清)中多个准种序列存在1 279nt(E1区,313aa)处单碱基插入优势基因突变,导致HCV包膜蛋白编码突变与中断(E2区,398aa)。本研究对中国HCV代表株包膜蛋白E1/E2编码基因的准种多样性及一种新型插入突变进行了描述,可为进一步研究HCV免疫逃避与慢性化机制提供重要信息。 李从力 张玲 鲁健 刘晓明 邓瑶 王岳 沈晓玲 谭文杰关键词:丙型肝炎病毒 包膜蛋白 准种 插入突变 丙型肝炎病毒(HCV)细胞进入抑制肽ZTE1序列及应用 本发明涉及一种能够抑制丙型肝炎病毒(HCV)进入细胞的多肽ZTE1的序列及应用。所述多肽是根据HCV基因型2A参考株JFH-1(GenBank no.D95A86)的包膜蛋白E2的氨基酸序列合成(多肽的纯度>85%),每... 谭文杰 张玲 卢莎 邓瑶 陶格斯 刘晓明文献传递