李龙虎
- 作品数：14 被引量：40H指数：3
- 供职机构：齐齐哈尔市第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 冠状动脉分叉病变的主动球囊保护技术:球囊支架对吻术被引量：18
- 2014年
- 冠状动脉分叉病变占总的经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的15％～20％，探索新的有效的冠状动脉分叉病变治疗技术仍然是一条很漫长的路。分叉病变的介入治疗是介入治疗领域的一个难点，其成功率低，主要不良心脏事件［包括围术期心肌梗死（MI）、靶病变血运重建（TLR）、支架内血栓］发生率高[3-5]。因此，分叉病变介入治疗技术的关键是同时保护主支和边支，降低围术期并发症的发生率及减少TLR。
- 李龙虎金哲王美兰张曙影张健宋爱琳胡彩贞吴法令
- 关键词：经皮冠状动脉介入治疗分叉病变
- 抑制磷酸二酯酶5的短发夹RNA重组腺病毒载体可改善小鼠心肌梗死后心力衰竭被引量：1
- 2014年
- 目的探讨抑制磷酸二酯酶5（PDE5）的短发夹RNA重组腺病毒载体（PDE5shRNA）对小鼠心肌梗死后心室重构和心力衰竭的影响。方法雄性10周龄C57BL／6J小鼠，随机分为假手术组（仅穿线不结扎左冠状动脉前降支，n=6）、PDE5shRNA组（结扎左冠状动脉前降支＋心肌注射PDE5shRNA，n=12）、普通腺病毒组（结扎左冠状动脉前降支＋心肌注射普通腺病毒，n=15）和DMEM组（结扎左冠状动脉前降支＋心肌注射DMEM，n=8）。4周后，统计各组小鼠存活情况，通过心脏超声检查和组织学染色的方法分别检测各组小鼠左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短率（LVFS）、左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）、心肌梗死面积和心肌纤维化面积，以评价PDE5shRNA对小鼠心功能及心室重构的影响。同时采用免疫组织化学、ELISA、Westernblot等方法，检测血管密度以及PDE5、环磷酸鸟苷（cGMP）和蛋白激酶G（PKG）等蛋白的表达情况。结果（1）小鼠存活情况：4周后，假手术组小鼠全部存活（100％），DMEM组死亡3只（37％），PDE5shRNA组小鼠死亡1只（8％）与普通腺病毒组死亡5只（33％）比较差异无统计学意义（P=0．11）。（2）心功能和心室重构指标的检测结果：PDE5shRNA组小鼠心肌梗死面积显著小于普通腺病毒组和DMEM组[（25．44-2．9）％比（42．0±3．2）％和（43．4±2．6）％，P均〈0．05]，LVFS显著高于普通腺病毒组和DMEM组[（21．1l±3．72）％比（14．22±2．91）％和（14．22±2．91）％，P均〈0．05]，低于假手术组（41．3±1．8）％（P〈0．05），LVEF显著高于普通腺病毒组和DMEM组[（48．23±7．06）％比（34．59±6．23）％和（38．1±2．8）％，P均〈0．05]，低于假手术组（77．7±3．1）％（P〈0．05），LVEDD显著小于普通腺病毒组和DMEM组[（4．88±0．36）mm比（5．72±0．62）mm和（
- 张健刚丽金哲李龙虎于勤王美兰宋爱琳洪炳哲
- 关键词：心肌梗死RNA磷酸二酯酶5
- 磷酸二酯酶5的短发夹RNA对肌细胞纤维化的作用抑制研究被引量：1
- 2021年
- 目的通过短发夹RNA(shRNA)延长对磷酸二酯酶5(PDE5)的抑制作用,探索shRNA-PDE5对细胞存活率的影响以及对心肌梗死后心功能及心室重构的作用及其机制。方法(1)细胞实验:分离SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),将Ad-shRNA-PDE5和Ad-Null分别感染体外培养的MSCs,嘌呤霉素筛选稳定表达它们的细胞株,分为shPDE5组和空白对照载体(Ad-Null)组,另设正常组。缺口末端标记法染色检测各组缺氧缺糖(OGD)诱导的稳转MSCs细胞凋亡情况。(2)动物实验:通过结扎左冠状动脉前降支方法建立雄性SD大鼠心肌梗死模型。按照体重将大鼠随机分成6组:假手术组、模型组、对照组、第1转染组、第2转染组和第3转染组,在结扎前降支后,立即在心肌梗死区及周边区4个点各注射经不同处理的MSCs细胞。用蛋白质印迹法检测大鼠心肌中转化生长因子-β(TGF-β)和成纤维细胞生长因子2(FGF2)的蛋白表达水平(光密度值);Masson染色检测心肌梗死区及周边区组织的纤维化情况。结果(1)shPDE5组、Ad-Null组和正常组的凋亡细胞数分别为(6.00±1.00),(14.33±1.52)和(5.33±1.52)个,shPDE5组与Ad-Null组比较,凋亡细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)假手术组、模型组、对照组、第1转染组、第2转染组和第3转染组的FGF2蛋白表达水平分别为0.11±0.02,0.22±0.05,0.27±0.08,0.28±0.04,0.33±0.05和0.50±0.03;这6组的TGF-β蛋白表达水平分别为0.18±0.02,0.91±0.03,0.72±0.01,0.72±0.03,0.48±0.02和0.27±0.09。第2转染组、第3转染组与假手术组、模型组、对照组和第1转染组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、第1转染组、第2转染组和第3转染组与模型组比较,大鼠梗死周边区心肌组织细胞纤维化程度依次减弱。结论shRNA-PDE5可通过减少细胞凋亡,调节相关因子的表达,抑制心肌细胞纤维化,从而改善心功能。
- 孙洋李龙虎胡爽陈宏魏冬梅马天翔
- 关键词：短发夹RNA磷酸二酯酶5骨髓间充质干细胞心肌细胞纤维化
- 靶向磷酸二酯酶5的短发夹RNA导入后的间充质干细胞对心肌梗死后心室重构的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨磷酸二酯酶5(PDE5)短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒载体[PDE5shRNA]导入后的间充质干细胞(MSCs)对心肌梗死(MI)后心室重构的影响。方法构建PDE5shRNA转染的MSCs,结扎大鼠冠状动脉左前降支(LAD)建立MI模型,随机分成假手术组(n=4,只穿线不结扎LAD);模型组(n=4,穿线并结扎LAD建立MI模型);MSCs-Ad-Null组(n=4,MI模型基础上注射经空白腺病毒载体转染的MSCs);MSCs-shRNA-PDE5组(n=4,MI模型基础上注射经PDE5shRNA转染的MSCs)。建模后,每组各取1只大鼠取心脏进行病理检验,用于判断造模成功,余大鼠入组观察相关指标。4周后心脏超声检测各组大鼠心功能指标[左室收缩末期内径(LVESd)、左室舒张末期内径(LVEDd)、左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(FS)]。HE染色观察心肌病理改变,Masson染色观察心肌纤维化情况,qRT-PCR方法检测大鼠心肌中PDE5、环磷酸鸟苷(cGMP)和蛋白激酶(PKG)mRNA的相对表达量。结果实验4周后,(1)心脏超声示:MI各组大鼠心室腔明显扩张,左心室心肌收缩功能明显降低。与假手术组相比,MI各组大鼠的LVESd、LVEDd增大,LVEF、FS降低(P均<0.05);与模型组相比,MSCs-Ad-Null组、MSCs-shRNA-PDE5组的LVESd、LVEDd降低,MSCs-shRNA-PDE5组的LVEF、FS升高(P均<0.05)。(2)心肌病理结果示:与模型组比较,MSCs-Ad-Null组、MSCs-shRNA-PDE5组的心肌病理改变逐渐减轻。(3)qRT-PCR法结果示:与假手术组相比,模型组、MSCs-Ad-Null组PDE5 mRNA表达升高、cGMP和PKG mRNA表达降低(P均<0.05);按模型组→MSCs-Ad-Null组→MSCs-shRNA-PDE5组之序,PDE5 mRNA表达递降,cGMP、PKG mRNA表达递升(P<0.05,P<0.01)。结论PDE5shRNA导入后的MSCs可改善MI后心功能,减轻心肌病理改变及心肌纤维化,同时通过调节PDE5、cGMP、PKG的表达,发挥抑制心室重构的作用。
- 胡爽李龙虎孙洋陈宏魏冬梅韩冬丽
- 关键词：磷酸二酯酶5间充质干细胞心肌梗死心室重构
- 靶向磷酸二酯酶5的短发夹RNA重组腺病毒载体对小鼠急性心梗后早期细胞凋亡的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨靶向持续抑制磷酸二酯酶5(PDE5)的短发夹RNA(shRNA)[PDE5 shRNA]重组腺病毒载体对小鼠急性心梗后早期细胞凋亡的影响。方法结扎小鼠左冠状动脉前降支建立小鼠心肌梗死模型,随机分为实验组10例,将携带有PDE5 shRNA重组腺病毒载体注射到心肌梗死区及周边区和对照组10例,将没有插入PDE5 shRNA的普通腺病毒载体注射到心肌梗死区及周边区。1周后,进行免疫组化和原位末端标记分析(TUNEL)检测梗死及梗死周边细胞凋亡情况,酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测环磷酸鸟苷(c GMP)和蛋白激酶G(PKG)的表达,蛋白印迹分析检测各组PDE5的表达情况。结果心梗1周后,和对照组相比较,实验组小鼠梗死区及梗死周围区域细胞凋亡明显减少(P<0.05),梗死周边心肌细胞凋亡明显减少(P<0.05),实验组小鼠心肌PDE5表达明显减少,c GMP和PKG表达明显上调(P<0.05)。结论 PDE5 shRNA的干预可以明显减少心肌梗死及梗死周边区细胞凋亡和非梗死区心肌细胞凋亡,可能与上调c GMP和PKG的表达密切相关。
- 陈宏肖锦雯李龙虎洪炳哲肖健齐魏冬梅
- 关键词：短发夹RNA干预治疗心肌梗死磷酸二酯酶5
- 抑制磷酸二酯酶5的短发夹RNA重组腺病毒载体对缺氧缺糖乳鼠心肌细胞的保护作用
- 2014年
- 目的观察磷酸二酯酶5(PDE5)shRNA对缺氧缺糖条件下乳鼠心肌细胞的保护作用。方法培养新生C57BL/6J小鼠心肌细胞,通过缺氧缺糖建立小鼠心肌细胞缺氧缺糖损伤模型。随机分2组:实验组(shPDE5)通过构建PDE5 shRNA,将PDE5 shRNA转染心肌细胞;对照组(Null):将普通腺病毒载体转染心肌细胞。用原位末端标记分析(TUNEL)检测2组细胞凋亡情况;免疫蛋白印迹检测PDE5蛋白的表达;用酶联免疫吸附法测定各组心肌细胞cGMP和PKG的水平。结果与对照组比较,实验组PDE5表达明显下降,cGMP和PKG的活性明显上调(P<0.05);实验组细胞凋亡数明显减少(P<0.05)。结论 PDE5 shRNA可明显拮抗缺氧缺糖诱导的心肌细胞凋亡,可能与PDE5 shRNA持续抑制心肌细胞PDE5基因表达、显著上调cGMP和PKG活性有关。
- 李龙虎张健智慧兰金哲刘天卿王美兰于勤
- 关键词：短发夹RNA干预治疗磷酸二酯酶5心肌细胞
- 川崎病中IgM-AECA通过JNK、p38及NF-κB诱导内皮细胞ICAM-1的表达被引量：8
- 2012年
- 目的川崎病(Kawasaki Disease,KD)大部分病人血清中存在抗内皮细胞受体抗体-IgM(IgM An-ti-endothelial cell antibodies,IgM-AECA)。该研究旨在探讨抗内皮细胞受体抗体(AECA)通过何种途径诱导内皮细胞细胞内吸附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达以激活血管内皮细胞。方法检测30名KD患儿血清IgM-AECA浓度,并从17名AECA阳性KD患儿血清中提纯IgM-AECA,用IgM-AECA直接刺激人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)后,通过R T-PCR及ELISA方法检测ICAM-1 mR NA及蛋白的表达,同时应用了PD98059,SB203580,dimethylaminopurine(DMAP)和parthenolide,4种蛋白激酶阻断剂观察IgM-AECA通过何种途径激活HCAEC。结果 KD病人血清中的IgM-AECA可使HCAEC的ICAM-1 mRNA及蛋白表达明显增加,SB203580(p38阻断剂)、DMAP(JNK阻断剂)及parthenolide(NF-κB阻断剂)明显抑制ICAM-1的表达(均P<0.01),而PD98059(ERK1/2阻断剂)不能抑制ICAM-1的表达(P>0.05)。结论 KD病人血清中的IgM-AECA通过增强ICAM-1的表达来激活内皮细胞,IgM-AECA通过p38、JNK MAPK及NF-κB通路诱导ICAM-1的表达,IgM-AECA可能在KD冠状动脉病变的发生中发挥重要作用。
- 梁顺姬吴媚张曙影金哲李龙虎荣季冬刘会丁海日
- 关键词：川崎病P38JNKNF-ΚB
- 促红细胞生成素缓释明胶水凝胶微球治疗小鼠下肢缺血的效果及机制被引量：3
- 2016年
- 目的探讨促红细胞生成素缓释明胶水凝胶微球（EPO—GHM）治疗小鼠下肢缺血的效果及其机制。方法将52只雄性10周龄C57BIM6J小鼠分为5组：假手术组（8只小鼠，仅穿线而不结扎右后肢股动脉）；盐水组（12只小鼠，结扎右后肢股动脉后，在右后肢一次性肌肉注射生理盐水4ml／kg）；EPO组（12只小鼠，结扎右后肢股动脉后，在右后肢一次性肌肉注射促红细胞生成素50001U／kg）；空GHM组[8只小鼠，结扎右后肢股动脉后，在有后肢一次性肌肉注射生理盐水浸泡过的明胶水凝胶微球（4ml／kg）]；EPO—GHM组（12只小鼠，结扎右后肢股动脉后，在右后肢一次性肌肉注射EPO—GHM5000IU／kg）。手术后应用激光多普勒血流成像仪对小鼠后肢的血流灌注进行连续监测。术后8周，采用免疫组织化学法检测各组小鼠右后肢的毛细血管密度（即CD31阳性毛细血管密度）、小动脉密度（即α平滑肌激动蛋白阳性小动脉密度）和肌肉面积[即肌动蛋白（HHF35）阳性肌肉面积]；采用双重免疫荧光标记法检测血管增殖指数，评价EPO—GHM对缺血肢体血管新生的影响；采用Western blot法检测右后肢肌肉中促红细胞生成素受体、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酸化eNOS（p-eNOS）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）的表达水平。结果（1）术后8周，EPO—GHM组缺血后肢与非缺血后肢的血流灌注比均高于盐水组、EPO组和空GHM组（0．810±0．080比0．563±0．051、0．570±0．056和0．561±0．052，P均〈0．05）。（2）EPO—GHM组CD31阳性毛细血管密度和α平滑肌肌动蛋白阳性小动脉密度均高于其他组（P〈0．01或0．05）。（3）盐水组、EPO组、空GHM组和EPO—GHM组的HHF35阳性肌肉面积均小于假手术组（P均〈0．05），盐水组、EPO组、空GHM组和EPO—GHM组之间的HHF35阳性肌肉面积差异均无统计学意�
- 肖锦雯李龙虎洪炳哲肖健齐魏冬梅金哲
- 关键词：缺血下肢红细胞生成素
- PDE5 shRNA对小鼠急性心梗后早期细胞凋亡的影响
- 2015年
- 目的:探讨磷酸二酯酶5(PDE5)shRNA对小鼠急性心梗后早期细胞凋亡的影响。方法:通过结扎小鼠左冠状动脉前降支建立小鼠心肌梗死模型,并将建立好的模型随机分为实验组(n=10):将携带有抑制PDE5的shRNA(PDE5 shRNA)重组腺病毒载体对小鼠心肌组织多部位注射;模型组(n=10):将没有插入PDE5 shRNA的普通腺病毒载体对小鼠心肌组织多部位注射。1周后,进行免疫组化和TUNEL分析检测梗死及梗死周边细胞凋亡情况,ELISA法检测环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,c GMP)和蛋白激酶G(protein kinase G,PKG)的表达,免疫蛋白印迹分析检测各组磷酸二酯酶5(phosphodiesterase5,PDE5)的表达情况。结果:心梗1周后,和模型组相比较,实验组小鼠梗死区及梗死周边区域细胞凋亡明显减少(P<0.05),实验组小鼠心肌PDE5表达明显减少,cGMP和PKG表达明显上调(P<0.05)。结论:PDE5 shRNA可以明显减少梗死区及梗死周边区细胞凋亡,可能与上调cGMP和PKG的表达密切相关。
- 智慧兰张健李龙虎金哲刘天卿王美兰于勤
- 关键词：短发夹RNA干预治疗磷酸二酯酶5抑制剂
- 他达拉非对阿霉素心肌病的保护作用及机制研究
- 2013年
- 目的观察他达拉非对阿霉素所致心肌病的保护作用及其作用机制。方法随机分为3组:模型组与实验组(均n=16):一次性腹腔内注射阿霉素15mg.kg-1制备小鼠心肌病模型。正常组(n=10):一次性腹腔注射相同容量的生理盐水。在此基础上,实验组灌胃他达拉非4 mg.kg-1,每日1次,共14天。给药2周后,进行心脏超声检查、光镜下观察及检测各组心肌组织中cGMP含量等。结果 2周后,实验组与模型组左室舒张与收缩末期内径分别为(3.07±0.10)vs(3.50±0.20)mm与(2.17±0.10)vs(2.82±0.17)mm;左室射血分数分别为(57.85±2.03)%,(46.07±2.96)%;左室短轴缩短率分别为(29.20±3.05)%,(19.41±2.59)%;心肌细胞直径分别为(14.24±0.39),(13.78±0.36)μm;心肌纤维化面积比率分别为(2.35±0.21)%,(5.16±0.36)%;cGMP含量分别为(0.15±0.01),(0.05±0.01)pg.mg-1,2组比较均有统计学意义(均P<0.05)。实验组的肌凝蛋白重链、肌钙蛋白I以及肌间蛋白的表达较模型组均明显升高。细胞凋亡各组间未见明显差异。结论他达拉非可能通过cGMP通路减轻阿霉素所致的心肌细胞萎缩和心肌纤维化,明显改善左心室功能障碍。
- 张健李龙虎金哲洪炳哲张曙影王美兰智慧兰宋爱琳
- 关键词：阿霉素心肌病他达拉非纤维化
