蔡蓓蕾
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
- 供职机构：浙江大学医学院药理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠GPR17基因真核表达载体的构建及其功能鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:构建大鼠GPR17(rGPR17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,并对其功能进行初步研究。方法:从大鼠脑组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增rGPR17 cDNA,与载体pcDNA3.1(+)连接,并转化到大肠杆菌DH5α以获得重组载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,以PCR、双酶切和测序鉴定;将重组载体pcDNA3.1(+)-rGPR17通过脂质体转染方法,转染HEK293细胞,RT-PCR、免疫荧光法检测rGPR17的表达,Fluo-4测定激动剂LTD4处理后细胞内钙变化。结果:RT-PCR、双酶切和测序证明,重组的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17构建成功,并在HEK293细胞获得表达,加入外源性激动剂LTD4可诱导细胞内钙的增加。结论:成功构建了rGPR17的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,并在HEK293细胞功能性表达,为GPR17受体及其拮抗剂的研究提供了基础。
- 林卡娜方三华蔡蓓蕾王欣欣卢韵碧张纬萍魏尔清
- 关键词：真核表达载体HEK293细胞细胞内钙
- 半胱氨酰白三烯受体2拮抗剂筛选方法的建立及化合物初筛被引量：4
- 2009年
- 目的:建立半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2受体)拮抗剂筛选的细胞模型及方法,初筛系列合成化合物。方法:选用高表达CysLT2受体的大鼠C6胶质瘤细胞,激动剂LTD4攻击后检测细胞内钙浓度变化,作为CysLT2受体拮抗剂的筛选方法,初步筛选有拮抗剂活性的化合物。采用CysLT1/CysLT2受体非选择性拮抗剂Bay u9773和CysLT2受体选择性拮抗剂AP-100984作为参照。结果:RT-PCR鉴定表明C6细胞高表达CysLT2受体。LTD41μmol/L能显著升高C6细胞内钙,其作用约为阳性对照ATP的37.5%。CysLT2受体拮抗剂抑制LTD4诱导的C6细胞内钙升高,CysLT1受体选择性拮抗剂无抑制作用。化合物中DXW-1、2、13、23、29、30能抑制LTD4诱导的细胞内钙升高。结论:LTD4诱导的C6细胞的钙信号变化可作为CysLT2受体拮抗剂的筛选方法;化合物DXW-1、2、13、23、29、30具有CysLT2受体拮抗活性。
- 蔡蓓蕾黄雪琴董晓武方三华卢韵碧张纬萍胡永洲魏尔清
- 关键词：半胱氨酰白三烯受体拮抗剂C6细胞
- 白三烯D4激活小鼠BV2小胶质细胞的作用
- 目的 观察白三烯D4(LTD4)激活小鼠小胶质细胞株BV2细胞的作用,并初步探讨其激活机制。方法 以RT-PCR、Western blotting检测BV-2细胞半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1)和CysLT2的表达；...
- 骆江云蔡蓓蕾赵春贞赵冰王欣欣方三华卢韵碧张纬萍魏尔清
- 半胱氨酰白三烯受体2对大鼠胶质瘤C6细胞分化的调节及其siRNA和拮抗剂筛选
- 目的:在大胶质瘤鼠C6细胞,半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2受体)是其主要表达的CysLT受体亚型,但是其效应特点尚不清楚。为探索该受体亚型的效应特点,本研究探讨以下问题:(1)CysLT2受体是否对C6细胞的分化有调...
- 蔡蓓蕾
- 关键词：小干扰RNA
- hCysLT2受体激活对IL8的影响
- 目的 研究hCysLT2受体激活后的信号通路.方法 采用脂质体转染的方法,将PcDNA3.1-hCysLT1、PcDNA3.1-hCysLT2、PcDNA3.1-rGPR17转到HEK293细胞中,并用G418600 m...
- 林卡娜王欣欣蔡蓓蕾余舒莹方三华卢韵碧张纬萍魏尔清
- 稳定转染hCysLT_2受体的HEK293细胞株的构建及其受体拮抗剂的初筛被引量：1
- 2011年
- 目的:构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并初筛具有CysLT2受体拮抗活性化合物。方法:采用Lipofectamine 2000将质粒pcDNA3.1(+)-hCysLT2转染至HEK293细胞中,用96孔板有限稀释法挑选阳性单克隆细胞株,以RT-PCR和免疫荧光法检测hCysLT2基因的表达。稳定表达hCysLT2受体的HEK293细胞株,以激动剂LTD4诱导细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)增高为指标,初步筛选有拮抗作用的化合物。结果:转染后的HEK293细胞中挑选12个单克隆细胞株,11株高表达hCysLT2受体。阳性刺激物ATP为50μmol/L及LTD4 100 nmol/L能升高[Ca2+]i。AP-2100984抑制LTD4诱导的hCysLT2-HEK293细胞[Ca2+]i升高,CysLT1受体选择性拮抗剂无抑制作用。新合成化合物DXW2、DXW3、DXW4、DXW5、DXW9、DXW25、DXW26、DXW29、DXW35在1μmol/L能显著抑制LTD4引起的[Ca2+]i升高,其中DXW4和DXW5的IC50分别为0.25μmol/L和7.5μmol/L。结论:成功构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并可用于有拮抗活性化合物的筛选。
- 林卡娜王欣欣黄雪琴蔡蓓蕾方三华卢韵碧张纬萍魏尔清
- 关键词：半胱氨酰白三烯白三烯拮抗剂HEK293细胞细胞内钙
- 半胱氨酰白三烯受体激动剂和拮抗剂对大鼠胶质瘤C6细胞分化的作用被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨半胱氨酰白三烯受体在大鼠胶质瘤C6细胞的分化中的作用。方法:以激动剂LTD4、CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特以及分化诱导剂forskolin处理C6细胞,观察细胞形态及GFAP蛋白表达变化。结果:Forskolin(10μmol/L)可诱导C6细胞形态变化及GFAP蛋白表达(细胞分化),而LTD4(0.1～100 nmol/L)不能诱导这些变化;单用孟鲁斯特(1μmol/L)无明显作用,但与LTD4(100 nmol/L)合用可诱导C6细胞分化。结论:CysLT2受体可能参与调节大鼠胶质瘤C6细胞的分化。
- 蔡蓓蕾王欣欣余舒莹黄雪琴张霞燕方三华卢韵碧张纬萍魏尔清
- 关键词：白三烯拮抗剂细胞分化半胱氨酰白三烯受体拮抗剂
