陈安
- 作品数:49 被引量:352H指数:8
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 苦参碱诱导人肝癌细胞系HepG_2凋亡的研究被引量:90
- 2001年
- 目的 观察苦参碱是否能诱导人肝癌细胞系HepG2 凋亡及凋亡相关基因的变化。方法 0~ 3 .0g/L苦参碱处理HepG2 细胞 ,光镜和电镜下观察细胞形态 ;TUNEL法原位检测DNA断裂 ;流式细胞仪检测凋亡峰 ;AnnexinV FITC/PI双标记检测早期凋亡 ;免疫组化和原位杂交法检测wp5 3 ,bcl 2 ,bax ,c myc ,Fas等凋亡相关基因的表达 ,采用真彩色图像分析仪定量检测。结果 1.5~ 3 .0g/L苦参碱可诱导HepG2 凋亡 ,并且使凋亡相关基因wp5 3 ,bax ,Fas表达上调 ,而抗凋亡基因bcl 2 ,c myc表达下调。结论 一定浓度的苦参碱可诱导人肝癌细胞HepG2 凋亡 ,并且该凋亡与凋亡相关基因表达增强和抗凋亡相关基因表达减弱有关。
- 司维柯陈安李鹏刘斌高利宏姚婕
- 关键词:苦参碱肝细胞癌凋亡HEPG2
- 应用DNA shuffling及T7噬菌体展示技术定向进化并筛选鉴定sCD74突变体被引量:2
- 2008年
- 目的利用DNA shuffling技术,结合T7噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74,以获得高亲和力突变体基因。方法定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以DNaseⅠ消化,回收25—50bp片段进行DNA shuffling;将500bp shuffling产物经限制性酶切后与T7噬菌体DNA连接,与T7 package extracts组建噬菌体文库;采用竞争淘洗方法进行5轮筛选,富集得到高亲和力结合MIF的噬菌体;挑取20株噬菌体单克隆进行基因克隆并测序,对测序结果进行生物信息学分析,同时以竞争ELISA初步鉴定进化效果。结果20株噬菌体单克隆具有相同的sCD74突变基因,为相同克隆,将此克隆命名为sHCD74m,其基因命名为sHCD74mD;竞争性ELISA分析显示其MIF结合力提高。结论得到了与MIF高亲和力结合的sCD74突变体基因sHCD74mD。
- 臧家涛李淑慧李鹏陈安胡川闽
- 关键词:SHUFFLING巨噬细胞移动抑制因子CD74噬菌体展示技术MHC
- 临床医学教育模式的现代发展趋势浅析被引量:4
- 2010年
- 李鹏陈安李淑慧胡川闽
- 关键词:教育模式
- 抗人降钙素原特异性单克隆抗体的制备鉴定及初步应用被引量:9
- 2013年
- 目的获得抗人降钙素原(procalcitonin,PCT)单克隆抗体,并鉴定其基本特性。方法从NCBI数据库中获得PCT编码序列,以原核表达系统表达PCT重组蛋白,经镍亲和层析柱纯化,获得筛选单克隆抗体的筛选原;综合应用多种生物信息学分析软件预测PCT中潜在的B细胞表位肽,用合成肽对BALB/c小鼠进行免疫,纯化单克隆抗体,通过间接ELISA、Western blot和免疫组化鉴定获得的单克隆抗体。将获得的单克隆抗体作为捕获抗体,经过配对建立检测重组PCT的ELISA体系,并初步对临床血清进行了检测。结果成功获得3株PCT特异性单克隆抗体,分别为2-D7、2-H12和4-H12,亚类分别为IgG1和IgG2a,最高效价为1∶1 024 000,亲和力最高可达到1.3×109L/mol;选取2-D7经Western blot鉴定能够检测重组PCT蛋白,经免疫组化证实能特异性识别甲状腺组织中PCT蛋白,经过配对成功建立了检测重组PCT的ELISA体系,运用建立体系检测临床血清PCT含量时发现正常组与细菌培养阳性组之间具有显著差异。结论成功表达了人PCT重组蛋白,获得了3株高特异性和高亲和力的PCT单克隆抗体,成功建立了检测重组PCT的ELISA体系,并初步用于临床样本检测。
- 郑怡麟何莹陈安易维京胡川闽
- 关键词:降钙素原原核表达单克隆抗体
- 多媒体网络技术在诊断学教学中的应用被引量:5
- 2004年
- 张静波周音频陈安万瑛
- 关键词:多媒体网络诊断学教学
- 慢性乙型肝炎患者表位特异性CTL定量检测的评价被引量:4
- 2004年
- 目的:评价慢性乙肝患者体内不同表位特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的功能状态. 方法:采用MHC/肽四聚体复合物技术,即tetramer技术, 定量外周血HLA-A2限制性表位即核心抗原core18-27、被膜抗原env 183-191、335-343、聚合酶抗原pol 575-583 4种表位特异性CTL,通过多元回归分析进行综合评价. 结果:慢性乙肝患者体内存在多克隆CTL反应,core 18- 27为优势性表位.4种表位特异陛CTL的频率与病毒载量无相关性(P>0.05);表位特异性CTL与血清转氨酶水平均无显著相关性(P>0.05). 结论:体内存在的CTL数量并不能代表机体的保护性免疫状态.
- 张静波陈思源杨志清李廷荣陈安吴玉章
- 关键词:慢性乙型肝炎血清转氨酶
- 抗preS1分子高效单克隆抗体的制备及其在血清LHBs检测中的应用被引量:2
- 2011年
- 目的制备可用于血清LHBs检测的针对preS1高效单克隆抗体并进行初步临床应用研究。方法对乙肝preS1区段基因(B基因型,adr血清亚型)全长序列(1~119 aa)进行密码子偏嗜性改造后,克隆入质粒pET32a构建原核表达重组质粒并转化入大肠杆菌BL21(DE3),采用离子交换、HIS亲和层析柱以及肠激酶(EK酶)酶切等方法建立preS1重组蛋白的纯化工艺,制备筛选单克隆抗体的筛选原;综合应用多种生物信息学分析软件预测LHBs preS1区段B细胞表位肽preS1(36~58 aa),合成该肽段后与BSA交联,通过新型免疫程序制备单克隆抗体;建立以抗preS1高效单克隆抗体为基础的ELISA方法,并对临床血清LHBs进行检测分析。结果获得了高纯度的重组preS1蛋白,HPLC分析其纯度为98%,通过新型免疫程序制备的抗preS1单克隆抗体1-E6(IgG1)特异性好,对preS1(LHBs)的检出率(83.3%)高于其他同类抗体(P〈0.01)。结论获得高效特异的抗preS1单克隆抗体1-E6以及高纯度重组preS1蛋白免疫检测标准品。
- 李新军张竹君易维京陈安李淑慧赵忠颢刘明栋范毓东胡川闽
- 关键词:PRES1单克隆抗体ELISA
- 重组人干扰素调节因子4结合蛋白表达体系及制备方法与应用
- 本发明涉及一种重组人干扰素调节因子4结合蛋白表达体系,该表达体系包含表达载体和干扰素调节因子4结合蛋白基因片段,其中所述的干扰素调节因子4结合蛋白基因片段具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列;本发明还涉及上述的重组...
- 张竹君胡川闽李鹏陈安李淑慧
- 文献传递
- 本科生创新科研实践活动促进学科建设发展的实践与思考被引量:6
- 2009年
- 不断提高本科生培养质量和高水平地建设特色学科是提高大学整体办学能力的两项核心工作,前者重点是教学,后者强调科学研究,如何将两者有机地结合起来是目前一个热点课题。近年来我们在抓学科发展的同时开展本科生创新科研实践活动,收获了一些经验,为进一步提高本科生教学质量和搞好学科建设奠定了基础。
- 胡川闽易维京陈莎李淑慧陈安黄松生
- 关键词:本科生教学学科建设
- 调节自噬对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性影响的实验研究被引量:6
- 2013年
- 目的观察调节自噬对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性的影响。方法选取两株乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-468细胞,分为不同浓度的紫杉醇(PTX)组、联合自噬激动剂雷帕霉素(PTX+Rapa)组和联合自噬抑制剂3-MA(PTX+3-MA)组(对照组给予相应溶剂),分别作用24 h、48 h及72 h后,应用MTT比色法检测各组细胞的存活率及抑制率。结果 PTX+Rapa组对两株乳腺癌细胞的抑制作用均显著优于单独给药的PTX组及PTX+3-MA给药组(P<0.01),而PTX+3-MA组对两株乳腺癌细胞的抑制作用则明显弱于单独给药的PTX组(MDA-MB-231,P<0.05;MDA-MB-468,P<0.01),提示自噬激动剂雷帕霉素(10 nm)可降低乳腺癌细胞对紫杉醇耐药性,增强紫杉醇对乳腺癌细胞的抑制作用,而自噬抑制剂3-MA(10 mm)在一定程度上增强乳腺癌细胞紫杉醇耐药性,拮抗紫杉醇对乳腺癌细胞的抑制作用。结论调节自噬能明显影响乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药性,这为自噬与乳腺癌细胞紫杉醇耐药性关系的研究提供了新的思路。
- 陈莎韩起王旭辉杨明珍张竹君陈安胡川闽李淑慧
- 关键词:自噬乳腺癌紫杉醇耐药