胡川闽
- 作品数:121 被引量:314H指数:9
- 供职机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 一种改良的质粒DNA的快速提取方法被引量:9
- 1999年
- 目的:建立一种确实有效的更实用的小量质粒DNA的提取方法。方法:将一含有目的质粒的大肠杆菌扩增后采用改良后的方法提取质粒DNA,然后采用紫外分光光度计测定含量,并且进行酶切。结果:每毫升原细菌培养物质粒DNA的产量明显增高,且酶切效果极好。结论:改良后的质粒DNA提取法具有速度快、收获量多、纯度高、经济又方便等优点,适合于应用与推广。
- 刘贤华白晓军胡川闽王军平粟永萍
- 关键词:质粒DNA分子生物学
- CD26多克隆抗体的制备与鉴定
- 2009年
- 目的针对CD26酶催化结构域制备多克隆抗体。方法应用RT-PCR技术以人白细胞mRNA为模板,扩增获取编码CD26催化结构域的基因序列,克隆入原核表达载体PET32a后,转化BL21感受态细菌,经IPTG诱导表达得到his-CD26融合蛋白;亲和层析柱纯化并经Western-blot鉴定后,用此重组蛋白免疫2只新西兰纯种大白兔,获取免疫血清共180 ml,经蛋白A柱纯化及抗原抗体亲和纯化后,采用间接ELISA法检测抗体效价,Western-blot及免疫细胞化学染色进行抗体效价及特异性鉴定。结果构建出PET32a/CD26原核表达质粒,并在大肠杆菌BL21中获得高效表达,经his亲合层析纯化后蛋白量达2.3 mg/ml;制备的多抗血清纯化后效价达256 000,经Western-blot证明能特异性的识别CD26重组蛋白,免疫细胞化学染色显示能特异的结合于H9细胞。结论成功制备了能特异性识别CD26的多克隆抗体。
- 宋敏范娅涵胡川闽赵树铭
- 关键词:原核表达多克隆抗体
- 脂多糖结合蛋白的B细胞抗原表位预测及其效应初步分析被引量:6
- 2008年
- 目的预测人脂多糖结合蛋白(LBP)的B细胞抗原表位。方法采用生物信息软件和互联网服务器,预测LBP的二级结构和分析LBP表面特性(亲水性、可塑性、可及性和抗原性),再计算平均抗原指数(AI),预测LBP的B细胞抗原表位。结果LBP存在多个潜在的抗原表位,247~260序列(FKGEIFHRNHRSPV)的AI(0.0407)明显高于其他片段,370~379序列(LPSSSKEPVF)和303~325序列(ITDDMIPPDSNIRLTTKSFRPFV)的AI分别是0.0336和0.0295。247~260序列是LBP潜在的B细胞优势抗原表位。结论应用多参数预测到LBP的B细胞抗原表位。
- 冯起甲徐智吴国明胡川闽徐顺贵陈维中郭芮伶
- 关键词:表位B细胞生物信息学
- 本科生创新科研实践活动促进学科建设发展的实践与思考被引量:6
- 2009年
- 不断提高本科生培养质量和高水平地建设特色学科是提高大学整体办学能力的两项核心工作,前者重点是教学,后者强调科学研究,如何将两者有机地结合起来是目前一个热点课题。近年来我们在抓学科发展的同时开展本科生创新科研实践活动,收获了一些经验,为进一步提高本科生教学质量和搞好学科建设奠定了基础。
- 胡川闽易维京陈莎李淑慧陈安黄松生
- 关键词:本科生教学学科建设
- 兔抗人APE1多克隆抗体的制备及鉴定被引量:5
- 2009年
- 目的:制备兔抗人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶多克隆抗体并进行鉴定。方法:以纯化的全长APE1蛋白为抗原,采用改良的快速免疫法制备兔抗人APE1多克隆抗体并进行特异性亲和纯化,ELISA、Western blot和免疫组化检测制备抗体的效价和特异性。结果:ELISA检测显示该抗体的效价达到1∶128000,相对亲和力常数为8.96×10-6mol/L。Western blot显示该抗体能与APE1蛋白特异性结合,免疫组化检测显示阳性反应产物主要定位于细胞核。此外,该抗体还可用于小鼠和大鼠组织APE1蛋白的检测。结论:制备的多克隆抗体特异性和效价良好,不仅为今后深入研究人APE1蛋白的性质与功能提供了有用的实验工具,还可用于检测小鼠和大鼠组织中APE1蛋白的表达。
- 曹晓静戴楠易维京李增鹏杨宇馨王东胡川闽
- 关键词:多克隆抗体
- 磁场强度可控的电化学免疫传感器
- 本发明涉及一种磁场强度可控的电化学免疫传感器,由电极装置和操纵装置组成,通过操作装置调整电极装置中电极磁场的产生和消失,产生磁场时,用于目的生物分子的定量检测。本发明具有可重复使用、结构简单、便于制备等优点,能够有效地对...
- 胡川闽梁文斌周恩财赵明
- 放射损伤和放烧复合伤影响小鼠脾脏T细胞IFN-γ和IL-4基因表达的实验研究被引量:1
- 2002年
- 目的 阐明机体免疫功能的放烧复合效应 ,为放烧复合伤免疫功能障碍的调控提供依据。方法 于不同时相点测定放烧复合伤小鼠 (5Gyγ射线照射合并 12 %Ⅱ度烧伤 )的脾体比 ,脾脏组织学观察 ,分离脾脏T细胞 ,RT PCR检测其IFN γ和IL 4的基因表达水平。结果 ①伤后放烧组的脾脏指数和组织结构的恢复明显快于单放组 ;②放射损伤后T细胞IFN γ和IL 4的基因表达均受到抑制 ,但与IL 4比较 ,IFN γ表达量的降幅小、恢复快 ;③放射损伤后脾脏指数和T细胞IL 4的基因表达呈双向变化 ;④放烧组IFN γ表达量明显高于单放组 ,而两伤组IL 4表达量无区别。结论 ①放射损伤是放烧复合伤的主导损伤因素 ;②IL 4的辐射敏感性高于IFN γ ;③烧伤因素能促进放烧复合伤后脾脏淋巴细胞的增殖及IFN γ的表达 ,不能促进IL 4的表达 ;④受照机体内仍然存在着促进IL
- 王延江粟永萍艾国平冉新泽刘晓宏练燕郭朝华胡川闽程天民
- 关键词:放烧复合伤小鼠T细胞IFN-ΓIL-4基因表达
- 小鼠巨噬细胞数量与形态及其IL-12基因表达放烧复合效应的实验研究被引量:1
- 2002年
- 目的 探讨放烧复合伤小鼠腹腔巨噬细胞数量、形态及其IL 12基因表达变化的复合效应。方法 于单纯放射损伤 (5Gy)或放烧复合伤 (5Gy合并 12 %II度烧伤 )后不同时相点分离、计数小鼠腹腔巨噬细胞 ,观察其形态学变化 ,RT PCR方法检测其IL 12、p35和p40的基因表达水平。结果 ①同放射损伤组相比 ,放烧复合伤组早期巨噬细胞数量减少速度更快 ,减少程度更大 ,但后期恢复速度明显加快 ;②同放射损伤组相比 ,放烧复合伤组伤后早期溶解坏死的巨噬细胞较多 ,但在形态上更接近正常 ;③两伤组p35和p40伤后表达的变化趋势一致 ,但放烧复合伤组伤后各时相点两基因的表达量明显高于放射损伤组。结论 放烧复合伤在免疫细胞数量、形态和功能上具有“早期加重 ,后期减轻”的复合效应特点 ,提示“早期救治”在放烧复合伤救治中的重要性。
- 王延江粟永萍艾国平冉新泽刘晓宏练燕郭朝华胡川闽程天民
- 关键词:放烧复合伤巨噬细胞IL-12基因表达烧伤
- 抗人肿瘤相关核仁抗原单克隆抗体的建立被引量:2
- 1992年
- 本研究以A549细胞系和人肺腺癌组织细胞核仁为抗原,建立了7株McAbs,并用ELISA技术对其反应性进行了初步分析。结果表明:各株McAb均能与人癌细胞核仁起反应,但各自的抗原却不尽相同。MA1、MA2、MA3和MA6株的抗原可能是HMNA类物质;MA4、MAS和ML1株的抗原可能是属于核仁的正常成份,但优势表达于癌细胞中。本组抗体的建立,对于研究肿瘤细胞核仁的分子组成和生物学功能,并进而利用HMNA为临床肿瘤病理服务可能有重要意义。
- 严森荣胡川闽胡福泉晏良遂
- 关键词:肿瘤单克隆抗体
- 高亲和力IgE受体α链cDNA的克隆及序列测定被引量:5
- 2000年
- 目的 :为获得编码高亲和力IgE受体(FcεR1)α链的cDNA序列。方法 :从正常人外周血中富集嗜碱性粒细胞 ,提总RNA进行RT PCR ,分子克隆 ,用自动测序及放射自显影测序。结果 :分离并鉴定了该cDNA重组子 ,在159密码子及185密码子分别发现了CAC→CGC与TAT→CAT置换。结论 :建立了一个编码FcεR1膜外区α链的cDNA重组子克隆 ,它不含引导肽序列 ,可能是一个来自中国人的该基因的变异体。
- 孙仁山胡川闽刘荣卿王延江胡厚祥
- 关键词:高亲和力IGE受体分子克隆CDNA