崔银江
- 作品数：4 被引量：14H指数：1
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建和在神经干细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的研究腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建及其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法通过RT-PCR从大鼠海马中获得BDNF基因,通过基因克隆、HEK293包装,获得含增强绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒表达载体pAd-BDNF-EGFP,将其感染原代培养的神经干细胞,观察EGFP及BDNF2种基因的表达,镜下测定转染率,并检测RT-PCR产物,证实BDNF的存在。转染后的神经干细胞经G418筛选,抗性细胞传代扩增后获得成功转染BDNF基因的NSCs克隆。结果荧光显微镜下可见感染后的NSCs表达EGFP而发出绿色荧光;通过RT-PCR证明感染后的NSCs具有表达BDNF的能力;用ELISA鉴定细胞上清中分泌的BDNF,72h的含量达到最高值,为12.78ng/mL;证明通过构建病毒的感染可以使神经干细胞获得分泌BDNF的能力,且EGFP基因可作为神经干细胞移植研究中良好的示踪剂。结论腺病毒病毒介导EGFP基因及BDNF基因在大鼠胚胎神经干细胞中成功表达,为应用以神经干细胞直接作为基因靶细胞,介导基因治疗中枢神经系统疾病奠定了基础。
- 李少华文会龙顾昕汪洋吕立夏李艳娜那曼丽崔银江
- 关键词：神经干细胞脑源性神经营养因子腺病毒载体
- E-钙粘附素的研究进展被引量：13
- 2009年
- E-钙粘附素(E-Cadherin,E-cad)是粘附分子中钙离子依赖的细胞粘附素家族(Ca2+-dependent celladhesion molecule family)中的一员,对维持正常上皮细胞形态和结构完整性起着重要作用。本文就E-cad的结构、功能、调控等方面作一综述。
- 崔银江李少华
- 关键词：E-钙粘附素上皮钙粘附素甲基化
- E-钙粘附素/β-连环素复合体对孕鼠神经干细胞迁移和归巢的影响
- 干细胞的微环境是影响到干细跑行为的关键因素之一,微环境中的粘附分子E-钙粘附素是其重要组成部分,在微环境中扮演重要角色,它功能的发挥离不开β-连环素,常作为一种复合体来研究他们的功能。本课题采用实时定量PCR技术测量神经...
- 吴众崔银江刘杰王建广陈栋余磊张磊李少华
- 关键词：E-钙粘附素Β-连环素神经干细胞
- 文献传递
- E-钙粘附素/β-连环素复合体对孕鼠神经干细胞迁移和归巢的影响
- 2014年
- [目的]干细胞的微环境是影响干细跑行为的关键因素之一，微环境中的粘附分子E-钙粘附素是其重要组成部分，在微环境中扮演重要角色，它功能的发挥离不开β-连环素，常作为一种复合体研究他们的功能。本课题采用实时定量PCR技术测量神经干细胞在原代和传代4—6代后E-钙粘附素和β-连环素的表达量是否有所变化，同时在蛋白表达水平借助流式细胞技术测量β-连环素相应的表达变化，进而判断这两种粘附分子在神经干细胞的传代过程中有何影响，为神经干细胞的迁移、植入的研究打下基础。[方法]孕鼠神经干细胞若干，为了说明前后实验细胞均为神经干细胞，本实验在取得细胞之时，立刻取少量神经干细胞行特异性Nestin染色，证明其并未分化。取一部分进行实时定量PCR检测E-钙粘附素和β-连环素的含量，毕竟这是在RNA水平借助实时定量PCR来测量的，为了佐证本结论，在蛋白水平借助流式细胞计数测量β-连环素的含量变化，β-连环素是一种胞浆蛋白，在细胞核内也有少量的表达，且核内核外保持一种动态的平衡，口-连环素处于E-钙粘附素／β-连环素复合体的核心部位，它表达的变化也间接体现了E-钙粘附素／β-连环素复合体的变化。剩余的继续培养，保持传代不分化，传代4—6代，即2周左右，再一次重复前面的操作，统计前后的结果有无差别。[结果]原代及传代培养形成的克隆球进行神经干细胞特异性抗体巢蛋白（Nestin）免疫荧光染色时发绿色荧光，呈阳性反应。应用实时定量PCR技术发现神经干细胞传4—6代后，E-钙粘附素和β-连环素的含量明显增多，且差别具有统计学意义（P〈0．05）；相应的流式细胞技术测量β-eat的含量变化，发现β-连环素的含量也明显增多，且差别同样具有统计学意义（P〈0．01）。[结论]试验中神经干细�
- 吴众崔银江刘杰王建广陈栋余磊张磊李少华
- 关键词：E-钙粘附素Β-连环素神经干细胞
