李红运
- 作品数：14 被引量：39H指数：4
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：重庆市科委院士基金重庆市科技攻关计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 心肌营养素-1基因转移对大鼠脊髓损伤后红核神经元的保护作用被引量：1
- 2004年
- 目的:观察腺病毒介导心肌营养素-1基因转移对大鼠脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)后红核神经元的保护作用。方法:制备大鼠颈3脊髓外侧索横切(C3Hx)模型,损伤区植入明胶海绵饱和的不同成分治疗及对照溶液。分为AdCMV-CT1组、空白对照组、AdCMV-eGFP对照组及正常对照组。荧光金(FG)于C2注射,1,4,8周脑切片,荧光显微镜下红核神经元记数观察红核神经元的存活。结果:在损伤后1～4周,标记红核神经元数几乎无变化。损伤后8周,损伤组、Adv-eGFP组、Adv-CT1组标记神经元分别减少31%,32%,19%。Adv-CT1组与损伤组相比,差异有显著性意义(P<0.05)。表明脊髓损伤后,红核神经元存在迟发性损伤。Adv-CT1在脊髓中长期表达,明显支持红核神经元的存活。结论:腺病毒介导心肌营养素-1基因转移长时间支持红核神经元的存活。
- 张正丰廖维宏杨青峰李红运伍亚民
- 关键词：心肌营养素-1基因转移脊髓损伤红核神经元
- 大鼠脊髓损伤后巢蛋白在脊髓组织中的表达被引量：9
- 2007年
- 目的探讨大鼠脊髓损伤后巢蛋白(nestin)的表达规律及其意义。方法30只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组(A组)、损伤组(B组)。采用Allen打击模型(25g·cm),在T10段造成急性脊髓损伤,于损伤后1d、3d、1周、4周、8周进行取材,对距离损伤中心5mm处脊髓进行nestin免疫组化检测。应用图像分析软件进行nestin阳性区域面积侧算。结果A组脊髓室管膜细胞只可见极少数细胞胞浆内nestin表达,白质中几乎无表达。B组中nestin于损伤后24h表达于室管膜以及软膜,灰质和白质亦有少量表达,1周达到高峰(P<0.05),4周明显下降,8周时很少或几乎无表达。结论脊髓组织的许多部位可能存在具有分化和更新潜能的祖细胞,脊髓损伤后这些细胞被激活,在功能恢复中可能发挥着重要的作用。
- 南国新廖维宏伍亚民李红运王莉龙在云
- 关键词：脊髓损伤室管膜神经再生
- 腺病毒介导的心肌营养素-1基因转染对神经干细胞作用的实验研究被引量：7
- 2005年
- 目的:观察腺病毒介导的心肌营养素-1(Adv-CT-1)基因转染对大鼠神经干细胞(NSCs)的作用。方法:分离、培养胚胎大鼠NSCs,以Adv-CT-1基因转染NSCs,应用细胞集落与细胞突起计数、流式细胞仪凋亡检测等技术,检测NSCs的生长与凋亡情况。结果:Adv-CT-1基因转染培养大鼠NSCs可增加NSCs集落数量和诱导分化细胞突起的数量(P<0.05)。在H2O2诱导的NSCs凋亡模型中,转染Adv-CT-1基因的NSCs凋亡细胞数量较对照组减少(P<0.05),存活细胞数增加(P<0.01)。结论:CT-1基因转染可促进NSCs分裂增殖以及细胞突起的生长,减少超氧化损伤诱导的NSCs凋亡发生,促进损伤NSCs的存活。
- 杨云华廖维宏伍亚民张正丰李红运刘媛龙在云
- 关键词：神经干细胞心肌营养素-1基因治疗
- 以NgR为靶点治疗脊髓损伤的研究进展被引量：4
- 2005年
- 王永堂鲁秀敏李红运
- 关键词：脊髓损伤轴突再生
- 腺病毒介导的心肌营养素1基因修饰大鼠神经干细胞被引量：4
- 2005年
- 目的:以心肌营养素1基因修饰大鼠神经干细胞,为心肌营养素1基因修饰的神经干细胞移植治疗中枢神经系统损伤提供物质基础。方法:实验于2002-06/2003-06在第三军医大学野战外科研究所全军重点开放实验室进行。从W istar大鼠胚胎海马和室管膜区组织分离、培养大鼠胚胎神经干细胞,以构建纯化好的重组腺病毒-心肌营养素1和重组腺病毒-增强绿色荧光蛋白载体转染神经干细胞。相差显微镜下直接观察细胞生长存活情况,应用免疫细胞化学和免疫荧光技术检测神经干细胞及其诱导后分化细胞的特异性蛋白巢蛋白、神经微丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白,外源性Brdu和增强绿色荧光蛋白的掺入情况,并观察心肌营养素1基因在神经干细胞中的表达。结果:①从胚胎大鼠分离的神经干细胞可在体外多次传代,经细胞增殖标记物Brdu掺入实验证明神经干细胞具有分裂增殖能力。②检测神经干细胞标志物巢蛋白、神经元标志物神经微丝蛋白和胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白,证实神经干细胞具有多向分化潜能。③重组腺病毒-心肌营养素1及重组腺病毒-增强绿色荧光蛋白转染神经干细胞后应用免疫组化和荧光示踪技术,检测到神经干细胞中心肌营养素1和报告基因增强绿色荧光蛋白表达明显持续增加。结论:①实验成功地分离和培养出大鼠神经干细胞,并在体外可多次传代增殖并可诱导分化为神经元和胶质细胞。②重组腺病毒-心肌营养素1和重组腺病毒-增强绿色荧光蛋白转染神经干细胞后,外源性心肌营养素1基因和增强绿色荧光蛋白在细胞中可持续稳定表达。
- 杨云华廖维宏张正丰李栋平李红运
- 关键词：干细胞移植神经系统疾病细胞培养
- p75NTR基因修饰O2A祖细胞对成年大鼠损伤脊髓的修复作用
- 本研究采用修饰的贴壁差异法进行O2A祖细胞的纯化,用免疫细胞化学和诱导分化对其鉴定,利用基因工程技术,以Cre/loxP介导的细胞内同源重组方法构建了含不同启动子的p75NTR和EGFP腺病毒载体,完成对O2A祖细胞修饰...
- 李红运伍亚民廖维宏
- 关键词：P75神经营养因子受体腺病毒载体皮质脊髓束
- 文献传递
- 心肌营养素-1基因转染对大鼠脑损伤的保护作用
- 2008年
- 目的在体观察腺病毒介导的心肌营养素-1基因（Adv—CTl）脑内转染对创伤大脑组织细胞的生物效应，探讨CT-1对创伤性脑损伤（TBI）治疗的作用和机制。方法以Allen方法建立大鼠TBI模型，利用Adv—CT1脑内转染技术，以Nissl染色、原位细胞凋亡检测、流式细胞凋亡检测等技术，观察CT-1基因治疗TBI后创伤大脑细胞凋亡及存活的变化及规律。结果TBI后12h-7d创伤对照组大脑皮层和海马等损伤脑区细胞凋亡明显增加，存活细胞减少；利用Adv—CT1脑内转染治疗TBI，伤后12h-14d损伤脑区凋亡细胞较创伤对照组减少，存活细胞增加。结论CT-1可减少TBI后脑细胞凋亡发生，增加脑细胞的存活数量，对损伤脑区细胞的生存有保护作用。
- 杨云华廖维宏李红运伍亚民张正丰
- 关键词：脑损伤心肌营养素-1基因治疗凋亡
- Nogo与轴突再生被引量：2
- 2005年
- 目的：Nogo-A作为多种抑制神经突再生的成员之一，主要存在于少突胶质细胞(oligodendrocytes)和中枢神经(central nervous system，CNS)髓磷脂中Nogo在成年CNS损伤后，在抑制轴突再生和代偿性纤维生长中发挥重要作用。最近研究发现在损伤大鼠和小鼠脊髓中体内应用Nogo中和抗体、Nogo受体(Nogo-66receptor，NgR)或阻断信号通路后受体Rho-A和ROCK均可导致轴突再生，并伴有功能的改善和恢复。
- 王永堂鲁秀敏李红运
- 关键词：NOGO受体轴突再生CNS损伤少突胶质细胞中和抗体
- 丙戊酸对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨丙戊酸(valproicacid,VPA)对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响。方法:45只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组(A组,n=5)、单纯损伤组(B组,n=20)、损伤后VPA治疗组(C组,n=20)。B组和C组采用Allen′s打击模型(25gcm),在T10段造成急性脊髓损伤,C组损伤后半小时给予VPA治疗,每日300mg/kg,经腹腔分两次注射,直至取材;B组以相同方法给予等量生理盐水。于损伤后1d、3d、1周、4周、8周进行取材,对距离损伤中心5mm处脊髓进行巢蛋白Nestin免疫组化检测,应用图像分析软件进行Nestin阳性区域面积测算。结果:A组脊髓室管膜细胞中极少数细胞胞浆内有Nestin表达,白质中几乎无表达。B组损伤后24hNestin表达于室管膜以及软膜,1周达到高峰(P<0.05),并相向延伸至脊髓白质和灰质;损伤后4周Nestin表达明显下降,8周时很少或几乎无表达。C组Nestin表达在伤后24h与B组无显著性差异,1周时在中央管周围Nestin阳性细胞明显较B组多(P<0.05),持续至4周时仍高表达,8周时仍有表达。结论:VPA在大鼠脊髓损伤后能够激活内源性神经干细胞。
- 南国新廖维宏李红运伍亚民王旭王莉龙在云
- 关键词：脊髓损伤内源性神经干细胞丙戊酸
- 人心肌营养素-1重组腺病毒载体的构建、纯化及表达被引量：10
- 2003年
- 目的 构建人心肌营养素 1重组腺病毒载体 ,以期用于神经系统退行性疾病及损伤的在体研究。方法 构建穿梭质粒pDC3 16 huCT1和pDC3 16 eGFP ,CsCl梯度离心制备高纯度的病毒基因组质粒pBHloxdeltaE1,3Cre、pHG14 0。培养2 93细胞 ,CaCl2 法质粒共转染 2 93细胞构建并筛选腺病毒AdCMV huCT1和AdCMV eGFP。病毒原液转染 2 93细胞及NIH3T3细胞 ,PCR、RT PCR及免疫组化鉴定。CsCl梯度离心纯化病毒 ,空斑试验检测病毒滴度。纯化病毒注入大鼠颈脊髓 ,RT PCR及免疫组化检验AdCMA huCT的在体表达。结果 采用双质粒共转染 2 93细胞Cre loxP位点同源重组方法构建了E1和E3缺失的含MCMV启动子、外源基因和SV40PloyA的AdCMV huCT1和AdCMV eGFP载体。经过PCR、RT PCR和免疫组化证实腺病毒载体构建成功。病毒经过CsCl梯度离心纯化后 ,AdCMV huCT1滴度达到 3 .0× 10 1 0 pfu。RT PCR及免疫组化显示AdCMV huCT1在大鼠脊髓中特异性表达。结论 构建并纯化了体外及体内高效表达的AdCMV huCT1。
- 张正丰廖维宏杨青峰李红运
- 关键词：重组腺病毒基因治疗
