王淑华
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：济宁医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
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- 慢病毒介导可溶性肿瘤坏死因子受体1在小鼠骨髓未成熟树突状细胞中的表达(英文)被引量：8
- 2010年
- 背景:肿瘤坏死因子α是介导树突状细胞成熟的重要细胞因子之一,可溶性肿瘤坏死因子受体1与其结合可阻断肿瘤坏死因子α的作用,维持树突状细胞于不成熟状态,诱导免疫耐受。目的:构建含有人sTNFR1的慢病毒表达载体,观察其在未成熟树突状细胞中的表达。方法:以人外周血单个核细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增出sTNFR1基因片段,亚克隆至慢病毒转移质粒pXZ208,通过IRES连接eGFP报告基因,建立双顺反子慢病毒转移质粒,命名为pXZ9-sTNFR1,DNA测序鉴定。采用脂质体转染293FT细胞,根据报告基因eGFP测定病毒滴度。采用小剂量粒-巨噬细胞集落刺激因子+白细胞介素4体外培养扩增C57BL/6小鼠骨髓来源树突状细胞。培养第5天,以pXZ9-sTNFR1重组慢病毒上清感染未成熟树突状细胞,RT-PCR检测感染后sTNFR1转录,Western blot法检测sTNFR1蛋白表达,观察sTNFR1基因修饰及脂多糖刺激后树突状细胞的表型特征。结果与结论:成功构建重组质粒pXZ9-sTNFR1,转染293FT细胞24h后观察到eGFP表达,病毒滴度在106U/L以上。RT-PCR显示pXZ9-sTNFR1感染的未成熟树突状细胞sTNFR1呈阳性表达,Western blot检测到sTNFR1蛋白存在于感染后未成熟树突状细胞和培养上清中。培养第5天的树突状细胞低表达CD40、CD86、CD80和MHCⅡ类分子,脂多糖刺激后,高表达MHCⅡ类分子和CD40、CD80、CD86分子,显示出成熟型树突状细胞表型特征,sTNFR修饰的树突状细胞MHCⅡ类分子和CD40、CD80、CD86分子表达水平无变化。提示:①成功构建了负载sTNFR1基因片段及含eGFP报告基因的慢病毒载体,获得了高滴度的重组慢病毒颗粒。②经慢病毒高效转导的未成熟树突状细胞sTNFR1 mRNA及蛋白稳定地表达,可以保护未成熟树突状细胞不被外源性脂多糖刺激活化,维持树突状细胞于非成熟状态。
- 黄一虹晁亚丽汤仁仙王淑华曾令宇陈翀潘秀英徐开林
- 关键词：可溶性肿瘤坏死因子受体基因修饰慢病毒载体未成熟树突状细胞
- 慢性中性粒细胞白血病一例报告并文献复习
- 目的：探讨慢性中性粒细胞白血病的临床特征并提高诊疗水平。方法：报告1例以脾大和中性粒细胞升高为主要表现的慢性中性粒细胞白血病的临床资料并结合文献复习,为其诊断和鉴别诊断及治疗提供新思路。结果：患者,女,57岁,临床表现为...
- 张颢张晶晶王淑华杨春燕贾路王海燕黄倩黄玉程玉芝宋东晓
- 关键词：慢性中性粒细胞白血病细胞学检查
- 文献传递
- H142.趋化因子受体-7基因绿色荧光慢病毒载体的构建及其在未成熟树突细胞中的表达
- 黄一虹宋立孝陈翀张璞王淑华李德鹏
- 文献传递
- 亚砷酸、维甲酸联合化疗三诱导治疗8例初治急性早幼粒细胞白血病的疗效观察
- 目的：观察亚砷酸、维甲酸联合化疗三诱导治疗初治急性早幼粒细胞白血病(APL)疗效和不良反应。方法：全部病例为我院2012年2月至6月初治住院APL患者，男性2例，女性6例，中位年龄为46(29～74)岁，低危1例，高危7...
- 张颢王海燕黄倩杨春燕贾路王淑华张晶晶黄玉程玉芝宋东晓
- 关键词：亚砷酸维甲酸疗效观察急性早幼粒细胞白血病
- 文献传递
- 调节性树突细胞对异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病和移植物抗白血病作用的研究
- 目的：探讨调节性树突细胞(regulatory DCs,DCregs)的特殊亚型CD11clow CD45 RBhigh DCregs对白血病小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)和移植物抗白血病(GVL)效应的...
- 黄一虹刘苍春王淑华谷红红李德鹏曾令宇徐开林潘秀英
- 关键词：白血病异基因骨髓移植移植物抗白血病效应
- sTNFR I基因修饰的未成熟树突细胞对白血病小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病和移植物抗白血病效应的影响
- 目的：探讨可溶性肿瘤坏死因子受体I (sTNFR I)基因修饰的未成熟树突细胞(DC)对白血病小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)和移植物抗白血病(GVL)效应的影响及其机制。方法：BALB/c(H-2d)小鼠...
- 黄一虹李德鹏王淑华张璞陈翀曾令宇
- 关键词：可溶性肿瘤坏死因子受体基因修饰白血病移植物抗宿主病
- F85.Rosai-Dorfman病长期误诊成人Still病一例报告并文献复习
- 张颢宋东晓王海燕黄倩杨春燕贾路王淑华张晶晶黄玉程玉芝
- 文献传递
- sTNFRI基因修饰的未成熟树突细胞对异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病和移植物抗白血病作用的研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨可溶性肿瘤坏死因子受体I（sTNFRI）基因修饰的未成熟树突细胞（DC）对白血病小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）后移植物抗宿主病（GVHD）和移植物抗白血病（GVL）效应的影响及其机制。方法以BALB／c（H-2^d）小鼠为供鼠，C57BL／6（H-2^b）小鼠为受鼠，建立小鼠T细胞白血病BMT模型。受鼠全身照射（TBI）后4h内，将供鼠骨髓细胞和脾细胞按1：1混合，经尾静脉输注于受鼠体内，同时输注T细胞白血病／淋巴瘤细胞株EIA细胞。实验分组：①A组：单纯照射组；②B组：白血病发病组；③C组：allo-BMT组（移植物未做任何处理）；④D组：pXZ9-DC组（未经修饰的未成熟DC组）；⑤E组：sTNFRI-DC组（sTNFRI修饰的未成熟DC组）。观察移植小鼠GVHD典型症状、病理分级、白血病细胞浸润情况、存活时间、生存率等，采用ELISA法测定IFN-y和IL4浓度，采用流式细胞术（FCM）检测异基因嵌合率。结果①A组小鼠均于10d内死于骨髓衰竭。B组小鼠均死于淋巴瘤／白血病。C组小鼠出现明显急性GVHD表现，而D组和E组小鼠只有部分出现GVHD表现，且GVHD评分及病理表现均较C组明显减低或减轻（P值均〈0．05），其中E组小鼠GVHD评分较c和D组均降低（P值均〈0．05），病理学改变最轻。C、D和E组小鼠存活时间分别为（11．50±3．50）、（21．70±5．80）和（25．80±5．20）d，D、E组小鼠存活时间均较C组明显延长（P值均〈0．05），其中E组小鼠平均存活时间最长。B组小鼠18d内均死于白血病，C、D和E组小鼠白血病的发病率分别为10％、20％、10％，各组发病率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。②移植后C、D和E组小鼠血清IFN-1浓度在＋12d时达高峰，后逐渐下降，＋18d时IFN一1的浓度E组较C和D组降低（P〈0．05），D组较C组低（P〈0．05）。C组小鼠血清IL-4降低，而D和E组浓度渐升高，＋12d达高峰�
- 王淑华李德鹏张艳君张璞曾令宇潘秀英徐开林黄一虹
- 关键词：树突细胞肿瘤坏死因子受体移植物抗白血病效应移植物抗宿主病
