申竑
- 作品数：9 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠骨形成蛋白4基因重组腺病毒的构建被引量：1
- 2006年
- 目的利用Cre-loxP特异性位点基因重组技术构建大鼠骨形成蛋白BMP4的重组腺病毒。方法高保真PCR得到大鼠BMP4cDNA,克隆到质粒pCR-BluntII-TOPO中,然后将目的基因片段连接到中间载体质粒pDNR-CMV,测序后在Cre重组酶作用下,将BMP4cDNA转移到腺病毒载体pLP-Ade-no-X-CMV。在HEK293细胞中扩增重组腺病毒,并检测BMP4基因重组腺病毒在细胞中的表达和功能。结果PCR法和限制性内切酶XholI消化法均证实BMP4重组腺病毒的成功构建,RT-PCR和WesternBlot检测证实该重组腺病毒显著性增强了CFSC-2G细胞中BMP4的mRNA和蛋白表达水平。结论Cre-loxP特异性位点基因重组技术是一种快速、高效构建基因重组腺病毒的方法,大鼠BMP4基因重组腺病毒的成功构建为进一步研究BMP4的细胞调控功能和BMP4基因治疗提供了良好的工具。
- 万小平李小荣谭辉何峰裴海平申竑李小刚
- 关键词：BMP4基因重组腺病毒骨形成蛋白4
- 骨形态发生蛋白-13生物学功能及其在肝病研究中的进展(英文)被引量：2
- 2012年
- 骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)是属于TGF-β超家族成员的一组重要细胞因子,参与细胞分化、增殖和胚胎发育等生理过程。不同的BMPs在脊椎动物中具有不同的功能。在信号通路上,BMPs的功能主要由Smad家族蛋白介导,后者包括8个成员,其中Smad1,Smad5和Smad8介导BMPs的信号转导,而Smad2和Smad3介导TGF-β的信号转导。虽然一些BMPs如BMP4和BMP9存在于肝脏,但肝脏中是否存在BMP13尚未有报道。BMP13,又名生长分化因子-6(growth differentiation factor 6,GDF6)或软骨来源的形态生成蛋白-2(cartilage-derivedmorphogenetic protein 2,CDMP2)。研究表明:BMP13参与骨和肌腱的修复,可刺激腱样细胞的增殖。笔者最新的研究结果揭示肝脏组织中有BMP13的表达并在肝脏代谢异常时具有差异表达。本文主要介绍BMP13生物功能研究的最新进展,尤其是BMP13在肝脏中的作用。
- 申竑Frank J.Burczynski巩跃文LI Yining
- 关键词：骨形态发生蛋白SMAD肌腱
- 细胞外信号调节激酶磷酸化对十字孢碱诱导肝星形细胞凋亡的调控(英文)
- 2012年
- 目的:肝星形细胞(hepatic stellate cells,HSCs)是参与肝纤维化和肝硬化发展过程的主要细胞。在肝纤维化过程中,肝星形细胞增殖并发生表型转化,从静止状态向肌纤维母细胞样转化。后者的归宿可为凋亡,也可重归静止状态。目前转化肌纤维母细胞样细胞的凋亡机制尚未明确。本文研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERKs)磷酸化状态对十字孢碱诱导HSCs凋亡的影响。方法:采用Western印迹和流式细胞术检测4种肝星形细胞株(CFSC-8B,-2G,-3H和-5H)的ERKs表达水平和细胞凋亡状态。结果:4种肝星形细胞株各具有形态特异性,并与其内α-SMA表达水平相符,其中CFSC-8B细胞株α-SMA表达水平为最高。虽然ERK1/2总蛋白表达水平在4种细胞株相似,但磷酸化ERK1/2在CFSC-8B和CFSC-2G两个细胞株中表达明显高于CFSC-3H和CFSC-5H细胞株。进一步采用CFSC-8B细胞(ERK1/2高磷酸化水平)和CFSC-5H细胞(ERK1/2低磷酸化水平),通过十字孢碱诱导细胞凋亡。结果显示CFSC-8B细胞对十字孢碱诱导的细胞凋亡敏感性明显增加。同时,十字孢碱还可进一步增加这2株细胞内ERK1/2的磷酸化程度。结论:HSCs中ERK1/2的磷酸化程度决定细胞对十字孢碱所致细胞凋亡的敏感性。
- 范江虹申竑Frank J.BurzynskiGerald Y.Minuk巩跃文
- 关键词：细胞外信号调节激酶肝星形细胞凋亡流式细胞术
- 胃癌Lauren分型与其临床病理特点及预后的关系被引量：9
- 2014年
- 目的探讨胃癌Lauren分型与其临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析197例胃癌手术患者的临床病理资料。结果在不同Lauren分型胃癌患者中其年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期,贫血、组织分化程度有差异(P<0.001);5年生存率弥漫型为40.1%,肠型为53.6%(P<0.001)。肿瘤部位、肿瘤直径、Lauren分型、T分期、N分期与患者预后相关(P<0.05)。结论胃癌Lauren分型对患者的疗效及预后评价有一定指导意义。
- 邓程伟申竑
- 关键词：胃癌预后
- CD147、FOXM1在宫颈癌中的表达及其意义被引量：3
- 2019年
- 【目的】探讨宫颈癌组织细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、叉头框转录因子M1(FOXM1)蛋白的表达及意义。【方法】应用免疫组织化学染色SP法检测31例宫颈癌及35例对照组CD147和FOXM1的表达情况。【结果】宫颈癌中CD147、FOXM1的阳性表达率均明显高于对照组;且CD147、FOXM1的阳性表达与FIGO2018宫颈癌分期呈正相关(P<0.01)。【结论】CD147和FOXM1在宫颈癌的浸润和转移方面起重要作用,联合检测CD147和FOXM1有望成为判断宫颈癌预后的新指标。
- 吴湘吴菲阳丽曾伟奇申竑罗军
- 肝素联合肝干细胞经脾移植治疗SD大鼠急性肝损伤被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨肝素联合肝干细胞(WB-F344细胞)经脾移植对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体,体外培养、扩增WB-F344细胞,携带GFP基因的慢病毒转染WB-F344细胞。通过腹腔注射四氯化碳(CC l4)建立大鼠急性肝损伤模型,造模后24 h分别将1 mL含2×107个肝干细胞和8μL肝素的悬液经脾注入大鼠体内。移植术后1 d获取肝脏和脾脏标本进行荧光检测,分别于术后3,7,14和28 d尾静脉抽血送肝功能检测,获取肝脏组织行病理学检测。结果:经慢病毒转染3 d后,WB-F344细胞表达GFP;GFP阳性细胞经脾移植1 d后到达肝脏;实验组大鼠的肝功能和肝脏损伤修复明显优于对照组(P<0.05)。结论:经脾联合肝素和WB-F344细胞移植对CC l4所导致的大鼠急性肝损伤有明显的治疗作用。
- 黄增辉曾珊欧阳淼董娟娟申竑
- 关键词：肝素肝干细胞急性肝损伤
- 甲基莲心碱逆转人结肠癌细胞奥沙利铂耐药的体外研究被引量：7
- 2017年
- 目的:探讨甲基莲心碱(Nef)对人结肠癌细胞奥沙利铂(OXA)耐药的逆转作用及机制。方法:采用OXA浓度逐步递增法(2、4、8、12、24、48μmol/L)孵育人结肠癌HCT116细胞诱导构建OXA耐药株HCT116/OXA;检测Nef对HCT116/OXA细胞的细胞毒性,确定Nef的最适作用浓度和时间;分析并比较OXA(IC_(50)浓度)单独处理、Nef(最适作用浓度)单独处理、OXA(IC_(50)浓度)联合Nef(最适作用浓度)处理后,HCT116/OXA细胞的增殖,凋亡情况及凋亡相关蛋白(Bcl-2,Bax,PARP,p-PARP)的表达情况。结果:与亲本HCT116细胞比较,HCT116/OXA细胞较对OXA的耐药性明显增高(IC_(50):21.00μmol/Lvs.112.00μmol/L,P<0.05),耐药指数为5.33。Nef能明显抑制HCT116/OXA的增殖有作用(P<0.05),并呈浓度依赖性,其最适作用浓度、时间分别为5μmol/L、24h(细胞存活率为90%)。与OXA单独处理比较,HCT116/OXA细胞对OXA联合Nef处理的耐受性明显降低(IC_(50):112.00μmol/Lvs.45.47μmol/L,P<0.05),逆转倍数为2.46;Nef单独作用对HCT116/OXA细胞的凋亡影响不明显(P>0.05),但其与OXA联合作用对HCT116/OXA细胞凋亡诱导作用明显强于OXA单独作用(P<0.05);与OXA或Nef单独作用比较,OXA联合Nef作用后,HCT116/OXA细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降,Bax、p-PARP等凋亡蛋白表达明显上升(均P<0.05)。结论:Nef可逆转HCT116/OXA对OXA的耐药,机制可能与其调节Bcl-2/Bax表达水平,从而与OXA产生协同作用有关。
- 屈雁玲马俊丽邓甘露尹玲郭操李易易韩莹蔡长景申竑曾珊
- 关键词：结肠肿瘤肿瘤睡莲科
- 骨形态发生蛋白-4对肝干细胞增殖与分化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨骨形态发生蛋白-4(BMP-4)对大鼠肝干细胞系WB-F344的增殖及分化的影响。方法:采用50 ng/mL的基因重组BMP-4作用于WB-F344细胞,以BMP-4拮抗剂Noggin(200 ng/mL)阻断BMP-4的作用为对照。在实验不同时间点,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测BMP-4对WB-F344增殖的影响,透射电镜下观察细胞的超微结构特征,RT-PCR检测各试验组中WB-F344细胞可能分化表型特异性分子标志物的mRNA表达。结果:细胞增殖实验显示:在不同作用时间点,BMP-4干预组的细胞吸光值均高于Noggin处理组和空白对照组。透射电镜下可观察到BMP-4干预后的WB-F344细胞具有分化良好的上皮细胞的超微结构特征。RT-PCR显示BMP-4诱导WB-F344分化后,肝干细胞的肝细胞特异性分子标志物的mRNA显著表达。结论:BMP-4可促进肝干细胞WB-F344的增殖,并诱导其向肝细胞定向分化。
- 董娟娟曾珊欧阳淼黄增辉Yuewen Gong申竑
- 关键词：骨形态发生蛋白-4肝干细胞增殖分化
- RASAL2在肝细胞癌中的表达及临床意义
- 2015年
- 目的:检测肝细胞癌患者癌组织与癌旁组织中RA SAL2蛋白的表达,探讨RA SAL2与临床病理特征及预后的关系。方法:用免疫组织化学SP法检测164对癌组织与癌旁组织中RASAL2的表达,分析RASAL2的表达与临床病理特征及预后的关系。结果:RASAL2在肝细胞癌旁组织中的表达比癌组织高(P<0.001);RASAL2的表达同肿瘤的分化程度、TNM分期及有无血管侵犯有关(均P<0.001),与AFP水平、肿块大小及结节数目等无关(P>0.05);RA SAL2低表达患者的5年无复发生存期(recurrence-free survival,RFS)(P<0.001)和总生存期(overall survival,OS)(P<0.001)明显低于RA SAL2高表达的患者。Cox回归分析显示RASAL2低表达是肝癌患者术后复发和死亡的独立因素(P<0.001)。结论:RASAL2的低表达与肝细胞癌的不良预后显著相关,是其不良预后的独立因素。
- 申竑吴晓玲张燕邓甘露马俊丽屈雁玲曾珊
- 关键词：肝细胞癌RA病理特征预后
