袁洪波
- 作品数：14 被引量：26H指数：2
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆转化烟草获得抗病突变体
- 2012年
- 为了获得烟草抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)突变体材料,以含有番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆PTYj01的农杆菌EHA105侵染转化烟草叶片,用50 mg/L卡那霉素对愈伤组织进行筛选,愈伤组织继代培养120 d左右后进行植株再生。挑取表型正常、无TYLCV病症的再生烟草45株,经PCR鉴定均整合有TYLCV DNA序列。将表型正常的再生植株移栽,温室接种烟粉虱传毒鉴定再生烟草在整个生育期对TYLCV的抗性,共获得8株表型正常、无TYLCV病症的烟草。对这8个抗性植株T2代烟草进行农杆菌注射法和接种烟粉虱鉴定,发现T2-2、T2-7的T2代分离群体中有约75%的植株没有发病症状;对这2个株系的抗性植株进一步进行卡那霉素抗性鉴定,发现其卡那霉素的抗性也符合3︰1的分离比例,说明株系T2-2、T2-7可能发生了抗TYLCV突变。可见,通过对侵染性克隆转化的烟草进行体细胞离体筛选,获得抗TYLCV突变体的方法是可行的。
- 袁洪波郭佳茹何冰陈天子杨郁文吴丹张保龙刘蔼民
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆烟草体细胞无性系再生植株
- 赋予植物耐寒性的一个棉花P型ATP酶基因Gbpatp的应用
- 本发明涉及一个赋予植物耐寒性的P型ATP酶基因<I>Gbpatp</I>的应用，属于生物技术领域。<I>Gbpatp</I>基因是从海岛棉品种H7124（Gossypiumbarbadense）中获得的一个P4-ATPa...
- 刘廷利连梓伊张保龙杨郁文陈天子袁洪波陈菲
- 文献传递
- 棉花黄萎病抗病相关基因GaVdr1及其应用
- 本发明涉及植物抗病基因及其应用，属于生物技术领域。GaVdr1基因是从抗黄萎病材料亚洲棉中获得的一个表面受体蛋白基因，编码蛋白含有1065个氨基酸，分子量为119.8KD，等电点为8.15。该基因含有9个LRR保守结构域...
- 陈天子张保龙杨郁文刘廷利凌溪铁袁洪波
- 文献传递
- 赋予植物耐寒性的一个棉花P型ATP酶基因Gbpatp的应用
- 本发明涉及一个赋予植物耐寒性的P型ATP酶基因 Gbpatp 的应用，属于生物技术领域。 Gbpatp 基因是从海岛棉品种H7124（Gossypium barbadense）中获得的一个P4-ATPase,该基因含有跨...
- 刘廷利连梓伊张保龙杨郁文陈天子袁洪波陈菲
- 文献传递
- 棉花黄萎病抗病相关基因GaVdr1及其应用
- 本发明涉及植物抗病基因及其应用，属于生物技术领域。GaVdr1基因是从抗黄萎病材料亚洲棉中获得的一个表面受体蛋白基因，编码蛋白含有1065个氨基酸，分子量为119.8KD，等电点为8.15。该基因含有9个LRR保守结构域...
- 陈天子张保龙杨郁文刘廷利凌溪铁袁洪波
- 文献传递
- 棉花耐旱基因GhEXP1及其应用
- 本发明涉及棉花耐旱基因GhEXP1及其应用，属于生物技术领域。本发明涉及基因GhEXP1为棉花中首次报道的扩展蛋白基因。该基因是从棉花陆地棉耐旱品种奥3503中克隆，RT-PCR分析发现GhEXP1在干旱处理后上调表达。...
- 刘廷利张保龙刘小双阚家亮杨郁文陈天子袁洪波凌溪铁
- 文献传递
- 棉花黄萎病病原菌异分支酸水解酶候选基因的克隆与功能分析
- 大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病是危害棉花生产的主要病害之一。由于植物中的抗性材料或基因较缺乏，加之大丽轮枝菌以微菌核的形式长期存活于土壤中，使得黄萎病防治极为困难。大丽轮枝菌的致病机理、变异机理、与寄主植物的互作等研究较少，...
- 袁洪波
- 关键词：棉花黄萎病大丽轮枝菌水解酶基因敲除
- 4个棉花品种对不同黄萎病菌的抗性差异比较被引量：2
- 2012年
- 采用人工接种方法鉴定了4个棉花品种(泗棉3号、鲁棉研21号、苏棉22号和常抗棉)对江苏不同地区的3个落叶型黄萎病菌菌株(V07DF2、GY-2和V08SY-3-3)和3个非落叶型黄萎病菌菌株(BP2、DF-CQ-2和V08SY-3-2)的抗、感情况。鉴定结果显示,在高浓度病菌接种的情况下泗棉3号的抗病性最差,对6个黄萎病菌株都表现为高感;苏棉22号、常抗棉和鲁棉研21号对不同菌株抗感差异较大,苏棉22号对落叶型菌株GY-2表现为耐病,但是对落叶型菌株V07DF2和V08SY-3-3表现为高感;常抗棉对非落叶型黄萎病菌菌株BP2表现为耐病,但是对非落叶型菌株DF-CQ-2又表现为高感;鲁棉研21号对落叶型黄萎病菌菌株V08SY-3-3表现为耐病,但是对落叶型菌株V07DF2和GY-2表现为高感。这一结果表明同一品种对不同黄萎病菌株的抗性不同,不同品种对同一黄萎病菌株的抗性也存在显著差异。培育广谱多抗黄萎病棉花新品种对解决黄萎病的危害具有重要意义。
- 薛艳袁洪波陈天子张保龙
- 关键词：棉花黄萎病抗性
- 农杆菌介导转化大丽轮枝菌的体系优化被引量：7
- 2011年
- 为了揭示大丽轮枝菌的遗传变异和致病机理,以含潮霉素为抗性筛选标记、绿色荧光蛋白GFP为报告基因载体,优化了农杆菌介导转化大丽轮枝菌的遗传转化体系,获得了大丽轮枝菌菌株V991和BP2含绿色荧光蛋白GFP的转化子,转化率达到100×10-6～550×10-6。优化的转化条件为:农杆菌以IM液体培养基调节浓度至OD600=0.2并预培养4 h,然后与等体积的浓度为106个.mL-1的大丽轮枝菌孢子混匀,每皿取200μL混合液涂于固体IM共培养基的纤维素膜上,25℃共培养60 h,转移至固体PDA培养基上以头孢噻肟钠500mg.L-1+潮霉素B 50 mg.L-1进行筛选。研究发现农杆菌LBA4404和AGL-1比农杆菌SK1044和EHA105更适用于大丽轮枝菌转化。对转化子观察和鉴定发现:从表型上,70.8%转化子保持野生型形态,29.2%转化子发生了形态变化;从致病力上,81%转化子的致病力相对于野生型没有发生显著变化,19%转化子的致病力或增强或减弱。
- 陈天子袁洪波杨郁文刘蔼民张保龙
- 关键词：农杆菌大丽轮枝菌潮霉素GFP表型变异
- 棉花钠尿肽基因GhPNP1的耐旱功能分析被引量：1
- 2015年
- 【目的】分析棉花中钠尿肽Gh PNP1的结构特征、表达模式以及耐旱功能,并分析其耐旱机制,为将该基因应用于作物改良奠定基础。【方法】通过对从植物中水平转移到大丽轮枝菌中的钠尿肽基因AVE1进行同源性搜索,得到与AVE1蛋白序列相似度较高的其他物种的蛋白序列;使用MEGA5软件对AVE1蛋白序列及其同源序列进行多序列比对分析并构建同源物种间系统进化树;利用MEGA和expasy在线工具进行蛋白序列分析;并根据编码该蛋白的核酸序列设计引物在陆地棉品种奥3503中克隆到其同源基因Gh PNP1。使用多种生物信息学软件分析Gh PNP1的分子特性,包括Gh PNP1编码蛋白的等电点、分子量、信号肽、进化关系等进行预测分析。利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析Gh PNP1在不同器官部位的组织表达模式以及受到PEG模拟干旱胁迫处理后的表达模式。将Gh PNP1的c DNA序列连入CLCr V沉默载体中,构建Gh PNP1的病毒诱导基因沉默载体CLCr V:Gh PNP1,转入农杆菌,并通过和辅助载体CLCr VB共侵润2叶期幼苗进行叶片注射,获得Gh PNP1的沉默植株。利用PEG模拟干旱处理沉默植株检测其耐旱性,并测定沉默植株的失水率、相对含水量、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化活性(T-AOC水平)、离子渗漏率等与植物抗逆相关的生理指标。【结果】从陆地棉奥3503中克隆到的Gh PNP1的开放阅读框长度为396 bp,编码131个氨基酸,信号肽长度为15个氨基酸,通过系统进化树分析Gh PNP1编码的蛋白含有保守的钠尿肽结构域,与可可树的PNP蛋白进化关系最近。Gh PNP1在棉花植株的根、茎、叶中均表达且在茎中表达量较高,PEG模拟干旱处理后根、茎、叶中的Gh PNP1均上调表达。Gh PNP1沉默后棉花植株耐旱性显著降低。在干旱条件下,Gh PNP1沉默植株的MDA含量、离子渗漏率、叶片失水率均高于对照的未沉默植株;而沉默植株的总抗氧化能力(T-AOC水
- 刘小双刘廷利袁洪波张保龙王荣富
- 关键词：陆地棉干旱胁迫功能分析
