贡岳松
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中国药科大学更多>>
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- 平菇钙调素的分离纯化和性质的研究
- 1994年
- 钙调素(Calmodulin,CaM)是广泛存在于一切真核生物中的一种多功能调节蛋白,作为细胞内的主要钙离子受体,人们确信它在动物、植物细胞功能活动中起着重要作用,目前有关真菌CaM的研究较少,对真菌CaM性质的系统研究,国内尚无报道。本文从平菇(Pleurotus ostreatus)中分离纯化得到真菌CaM,并做了有关物理化学特性及其生物活性的研究。 一、材料和方法 (一)供试材料 平菇购自南京蔬菜研究所;苯基琼脂糖Phenyl-sepharose CL 4B为Pharmacia产品;DEAE-Cellulose 32为Whatman产品;Ampholyte为中国科学院上海生化所产品,其余试剂均为分析纯。 (二)试验方法 包括以下五个方面。 1.平菇CaM的分离纯化:平菇加入3倍体积缓冲液A(Buffer A:20mmol/l Tris-HCl,1mmol/l)巯基乙醇,0.5mmol/l PMSF,2retool/l EDAT,pH17.5)匀浆10″×6次,8000g离心30分钟,重复抽提,合并上清,加入30%TCA至终浓度为3%,离心,弃上清,沉淀用缓冲液搅匀透析过夜,再加适量缓冲液A,用1mol/l Tris-base调pH17.5,搅拌30分钟。
- 戴洁贡岳松胡卓逸
- 关键词:平菇钙调素提纯
- 若干蝙蝠葛碱衍生物对人红细胞膜Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase活力的影响
- 1993年
- 本文测定了数种蝙蝠葛碱衍生物对钙调素(CaM)激活的人红细胞膜Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase活力的影响。结果表明,这些化合物对该酶都有不同程度的抑制作用,其机制表现为竞争性抑制,过量的CaM能完全逆转这些化合物所引起的抑制。当Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase被胰蛋白酶(trypsin)限制性酶解完全活化后,其活力不再受CaM激活,但仍被这些化合物所抑制。
- 李志强贡岳松胡卓逸
- 关键词:红细胞镁腺苷三磷酸蝙蝠葛碱
- 四种小檗胺衍生物对钙调素诱导的肌球蛋白轻链激酶的抑制作用
- 1991年
- 本文叙述了肌球蛋白(MLC)及其激酶(MLCK)与磷酸二酯酶(PDE)的制备。以已知的CaM拮抗剂三氟啦嗪(TFP)为对照,检测了小檗胺(E_0)及其衍生物(E_1、E_5、E_6)对MLCK和PDE活力的影响。结果TFP和E_0及其衍生物E_1、E_5、E_6对CaM诱导的MLCK活力抑制的IC_(50)值分别为34,40(抑制25%),99,19和8μmol/L,对PDE抑制的IC_(50)值依次为2.8,9.8,8.0,0.8和0.53μmol/L。E_0经结构衍生化后,化合物E_6对二酶均有明显的抑制作用,且各化合物抑制强度有平行关系。
- 贡岳松胡卓逸沈子龙
- 关键词:小檗胺钙调素肌球蛋白MLCK
- 平菇钙调素总结合蛋白的制备及性质研究被引量:1
- 1995年
- 钙调素(Calmodulin,CaM)是广泛存在于一切真核细胞中的耐热钙结合蛋白,它的许多功能是通过与CaM结合蛋白的相互作用而实现的。目前CaM结合蛋白是CaM研究的一个活跃领域。一般来说,CaM与CaM结合蛋白的相互作用在有Ca^(2+)较无Ca^(2-)时有更大的亲和力,往往可以利用CaM-Sepharose 4B柱,在Ca^(2+)存在条件下,让CaM结合蛋白结合上去,在EG-
- 戴洁贡岳松胡卓逸
- 关键词:平菇钙调素