陈香梅
- 作品数:12 被引量:29H指数:2
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- 发文基金:国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 氯化铷法制备感受态细胞被引量:9
- 2004年
- 目的 研究氯化铷法制备感受态细胞的转化效率和不同条件对其的影响。方法 采用氯化铷法制备感受态细胞 ,用不同的质粒进行转化。分析不同菌种、冻存时间对转化效率的影响 ,并与通常所使用的氯化钙法进行转化效率的比较。结果 氯化铷法制备感受态细胞可用于不同的质粒的转化 ,对于同一种质粒 ,不同的菌种和冻存时间对转化效率无影响 ,其转化效率高于氯化钙法。结论 氯化铷法制备感受态细胞是一种可以长期保存而不影响转化效率的方法。
- 李振宇徐开林潘秀英鹿群先陈香梅何徐彭
- 关键词:氯化铷感受态细胞质粒分子克隆技术分子生物学
- 慢病毒载体的构建、改造及其包装细胞系的建立
- <正> 目的构建并改造来源于人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的慢病毒载体三质粒包装系统,建立慢病毒载体的包装细胞系,筛选出转导效率较高的内部启动子,完成其结构改造。方法三质粒系统中,包装质粒为△NRF,内含CMV启动子...
- 李振宇徐开林潘秀英鹿群先孙海英主鸿鹄陈香梅何徐彭
- 文献传递
- 携带绿色荧光蛋白基因的逆转录病毒载体的构建及其介导的T细胞基因转移研究被引量:19
- 2005年
- 为了构建含绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因的逆转录病毒载体和研究逆转录病毒对T细胞的感染能力,利用亚克隆技术将磷酸甘油酸激酶启动子(phosphoglyceratekinasepromoter,PGK)基因和GFP全长cDNA插入逆转录病毒载体pLXSN,采用磷酸钙沉淀法将重组载体转染PA317包装细胞,G418筛选出抗性克隆,收集滴度最高的病毒上清感染NIH3T3和T细胞,在倒置荧光显微镜下观察GFP表达情况。结果表明;重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞后,可在荧光显微镜下观察到GFP的表达。G418筛选后,含GFP的逆转录病毒可感染原代培养的T细胞。结论:逆转录病毒载体能够快速、稳定地将外源基因转移至T细胞,可作为介导T细胞基因转移的重要工具。
- 陈香梅徐开林潘秀英李振宇鹿群先李德鹏
- 关键词:逆转录病毒载体绿色荧光蛋白基因T细胞基因转移
- 携带绿色荧光蛋白基因的逆转录病毒载体的构建及其介导的T细胞基因转移研究
- 目的:构建含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的逆转录病毒载体,将逆转录病毒感染小鼠脾细胞(T细胞),研究逆转录病毒对T细胞的感染能力。方法:利用亚克隆技术将磷酸甘油酸激酶启动...
- 陈香梅徐开林潘秀英李振宇鹿群先李德鹏
- 文献传递
- 逆转录病毒与慢病毒介导HSV-TK/GCV防治移植物抗宿主病的比较研究
- 2007年
- 移植物抗宿主病(GVHD)是限制异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)临床应用的最主要并发症,现有的防治方法均不理想,应用自杀基因系统防治GVHD是一个新的尝试。本实验将携带单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因的逆转录病毒和慢病毒分别感染供鼠(C57BL/6小鼠)脾细胞,感染后细胞与供鼠骨髓细胞混合移植到经Co^60γ射线照射后的受鼠(BABL/C小鼠),移植后分别给受鼠腹腔注射更昔洛韦(GCV),初步观察HSV-TK/GCV系统控制GVHD的效果,并在体内外实验中对两种载体进行比较研究。
- 杜冰徐开林朱锋高飞陈香梅潘秀英
- 关键词:移植物抗宿主病TK/GCV慢病毒介导逆转录病毒C57BL/6小鼠
- 携带HSV-TK基因的逆转录病毒载体的构建及其对T细胞的杀伤作用
- 目的:探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(the herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因在小鼠脾细胞(T细胞)中表达的意义。方法:应用亚克隆技术将磷酸甘油酸激酶(phosph...
- 徐开林陈香梅潘秀英李振宇鹿群先李德鹏
- 文献传递
- 携带HSV-TK基因的逆转录病毒载体的构建及其对T细胞的杀伤作用
- <正>目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(the herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因在小鼠脾细胞(T细胞)中表达的意义。方法应用亚克隆技术将磷酸甘油酸激酶(phosp...
- 徐开林陈香梅潘秀英李振宇鹿群先李德鹏
- 文献传递
- 奥氮平联合奥施康定治疗重度癌痛的临床疗效分析
- 目的:观察奥氮平联合奥施康定(盐酸羟考酮缓释片)治疗重度癌痛的疗效及不良反应.方法:对40例重度癌痛患者随机平均分为2组:实验组使用奥氮平联合奥施康定;对照组单独使用奥施康定,评价治疗前后疼痛变化,生活质量评分及不良反应...
- 刘太锋陈香梅刘勇
- 关键词:癌性疼痛奥氮平奥施康定联合用药止痛效果
- PGK驱动逆转录病毒载体介导HSV-TK/GCV控制GVHD的研究被引量:1
- 2007年
- 目的:研究磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子驱动的逆转录病毒载体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦(HSV-TK/GCV)系统在小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT)后能否减轻移植物抗宿主病(GVHD)。方法:将转HSV-TK基因的逆转录病毒感染供鼠(C57BL/6鼠)脾淋巴细胞,感染后细胞与供鼠骨髓细胞混合移植给Coγ7射线照射后的受鼠(BALB/c鼠)。移植后腹腔注射GCV,用药1周,按移植后首次给药时间,分为GCV0d组、GCV7d组、GCV12d组。观察移植后受鼠生存期、存活率、GVHD发生率及严重程度、T细胞免疫重建(CD3、CD4、CD8)及异基因嵌合等指标。结果:TK/GCV0d组、TK/GCV7d组小鼠平均生存时间分别为(26.90±4.88)d、(27.00±4.80)d,较TK/GCV12d组(21.504±3.26)d和移植对照组(15.10±O.43)d明显延长(P〈0.05),TK/GCV0d组与TK/GCV7d组之间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。对照组小鼠12~14d100%发生Ⅲ~Ⅳ级GVHD,实验组死亡小鼠有Ⅱ~Ⅳ级GVHD病理学改变,而长期生存小鼠仅出现Ⅰ~Ⅱ级GVHD。TK/GCV0d组、TK/Gcv7d组、TK/GCV12d组在移植后5、10、15d3个时间点检测CD4^+ T细胞均高于对照组(P〈0.05),CD8^+ T细胞均低于对照组(P〈0.05)。移植后30d检测10只受鼠异基因嵌合率均在95%~100%。结论:PGK启动子驱动的逆转录病毒载体介导HSV-TK/GCV系统能有效控制小鼠allo-BMT后GVHD,移植后早期预防性用药效果优于发生GVHD后治疗性用药。
- 朱锋徐开林杜冰陈香梅潘秀英
- 关键词:逆转录病毒载体HSV-TK/GCV移植物抗宿主病异基因移植
- 携带绿色荧光蛋白基因的逆转录病毒载体的构建及其介导的T细胞基因转移研究
- <正>目的构建含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的逆转录病毒载体,将逆转录病毒感染小鼠脾细胞(T细胞),研究逆转录病毒对T细胞的感染能力。方法利用亚克隆技术将磷酸甘油酸激酶启...
- 陈香梅徐开林潘秀英李振宇鹿群先李德鹏
- 文献传递