吕烨
- 作品数:9 被引量:22H指数:3
- 供职机构:天津科技大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金天津市重点科技攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- pSH-CUP重组质粒的构建及面包酵母酸性海藻糖酶基因的敲除被引量:4
- 2008年
- 设计含有与面包酵母(Saccharomyces cerevisiae BY-6)编码酸性海藻糖酶ATH基因内部部分序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除单元,转化面包酵母获得G418阳性克隆。将铜抗性基因(CUP1-MT1)导入Cre重组酶表达质粒pSH47,得到重组质粒pSH-CUP,并转化阳性克隆,以铜抗性筛选面包酵母转化子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kan^r基因。重组质粒pSH-CUP的构建,不仅解决了酵母转化子筛选标记问题和非酵母基因的引入,而且使LoxP-kanMX-loxP基因敲除体系在进行真核生物基因敲除时更加方便可行。
- 和东芹肖冬光吕烨
- 关键词:面包酵母基因敲除
- 高耐性酿酒酵母工程菌及其构建方法
- 本发明公开了一种高耐性酿酒酵母工程菌及其构建方法。本发明所提供的酿酒酵母工程菌,是利用改进的Cre/loxP系统将酿酒酵母中编码中性海藻糖酶的基因敲除,得到生物活性保护物质海藻糖含量提高的菌株Saccharomyces ...
- 肖冬光郭学武郝欣吕烨
- 文献传递
- Cre/lox P系统介导的基因重组及其在酵母中的应用被引量:3
- 2008年
- Cre/loxP系统是源于P1噬菌体的一个DNA重组体系,具有位点特异、时期特异、组织特异和高效重组的特点,它为转基因生物工程研究提供有力工具。概述了Cre/loxP系统的组成、结构、作用方式、机制、特点及其在酵母中的应用。
- 和东芹肖冬光吕烨
- 关键词:CRE/LOXP系统CRE重组酶基因重组
- 海藻糖在酿酒酵母耐性方面的研究进展
- 海藻糖是一种非还原性的二糖,在细菌、真菌和植物中具有很重要的生理作用。本文就海藻糖在酿酒酵母酒精耐性、冷冻耐性、高渗耐性、耐高温以及干燥耐性
方面的研究进展进行了论述。
- 肖冬光吕烨和东芹
- 关键词:海藻糖酿酒酵母耐高温性
- 文献传递
- 海藻糖含量与酿酒酵母酒精耐性的关系被引量:3
- 2008年
- 对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae BY-6)中性海藻糖酶缺失突变株(Δnth1)的海藻糖含量和酒精耐性之间的关系进行了研究。结果表明,中性海藻糖酶缺失突变株细胞海藻糖含量较高,用18%vol的酒精处理4 h后仍可保持高的细胞存活率,并且无呼吸缺陷型的出现,说明高海藻糖含量可以保护细胞膜,防止线粒体DNA丢失和胞内物质的外渗,与酵母的酒精耐性之间存在一定的关系。
- 吕烨肖冬光和东芹吴文韬
- 关键词:微生物酿酒酵母海藻糖
- 酿酒酵母海藻糖含量与酒精和高温耐性的关系被引量:2
- 2009年
- 海藻糖的积累对增加酿酒酵母多种压力耐性具有重要作用。为了深入研究海藻糖与酒精和高温耐性的关系,以工业酵母菌株为出发菌株构建中性海藻糖酶突变株(△nth1)。研究结果显示,与出发菌株相比,突变株△nth1海藻糖积累能力提高,用20%的酒精处理后仍可保持高的细胞存活率,无呼吸缺陷型的出现,并且在45℃发酵时仍能保持相对较高的产酒量,表明高海藻糖含量可以保护细胞,提高细胞酒精耐性和高温耐性,突变株△nth1可作为酿酒和燃料酒精等工业优良生产菌株。
- 肖冬光张翠英吕烨
- 关键词:发酵工程基因工程酿酒酵母海藻糖
- 酵母海藻糖酶缺失突变株的构建及其耐性被引量:11
- 2008年
- 【目的】构建酵母海藻糖酶缺失突变株,并进行耐性分析,进一步研究海藻糖与酵母耐性之间的关系,为商业生产打下一定的基础。【方法】利用同源重组的方法,敲除了编码酸性海藻糖酶的ATH1基因和中性海藻糖酶的NTH1基因,构建了酸性海藻糖酶缺失突变株(△ath1)、中性海藻糖酶缺失突变株(△nth1)和双缺失突变株(△ath1△nth1),并进行了耐性分析。【结果】结合PCR和Southernblot的结果,验证了突变株构建的正确。所有突变株的海藻糖积累量和细胞密度均高于亲本,冷冻、高温、高糖和酒精耐性提高了。【结论】说明海藻糖含量与酵母耐性有一定的相关性。突变株耐性的改善,表明它们在酿造和烘焙产业中具有潜在的商业价值。
- 吕烨肖冬光和东芹郭学武
- 关键词:海藻糖
- 高耐性酿酒酵母工程菌及其构建方法
- 本发明公开了一种高耐性酿酒酵母工程菌及其构建方法。本发明所提供的酿酒酵母工程菌,是利用改进的Cre/loxP系统将酿酒酵母中编码中性海藻糖酶的基因敲除,得到生物活性保护物质海藻糖含量提高的菌株Saccharomyces ...
- 肖冬光郭学武郝欣吕烨
- 文献传递
- Cre/loxP系统介导的基因重组及其在酵母中的应用
- Cre/loxP系统是源于P1噬菌体的一个DNA重组体系,具有位点特异、时期特异、组织特异和高效重组的特点,它为转基因生物工程研究提供有力工具。概述了Cre/loxP系统的组成、结构、作用方式、机制、特点及其在酵母中的应...
- 肖冬光和东芹吕烨
- 关键词:基因重组酵母系统组成系统结构
- 文献传递