李日清
- 作品数：4 被引量：55H指数：4
- 供职机构：华南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划山东省教育厅科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 蜂毒肽的溶血作用与红细胞膜上两种酶活性变化的关系(英文)被引量：5
- 2008年
- 从蜂毒肽作用于红细胞膜上的Na+-K+-ATPase和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性变化的角度,利用分光光度法测定酶活性,研究蜂毒肽与红细胞及膜作用过程中可能的靶点,讨论了蜂毒肽溶血过程与RBC膜上2种酶活性的变化.结果发现,蜂毒肽抑制RBC膜上酶活性的主要模式为附着/插入质膜与游离态并存模式,附着/插入质膜中的作用大于游离态的作用.Na+-K+-ATPase的K+结合位点是蜂毒肽的1个作用靶点.蜂毒肽插膜过程与其对此酶的作用随时间延长同步发生.蜂毒肽通过作用于葡萄糖-6-磷酸和NADP使G-6-PD的催化受到缓慢抑制,蜂毒肽形成四聚体的程度与酶活性密切相关.EDTA抑制蜂毒肽聚集,干扰蜂毒肽作用于G-6-P,蜂毒肽作用于底物G-6-P及辅酶NADP的生化机理相似,蜂毒肽抑制作用与G-6-PD的结构无关.
- 赵亚华李日清张微钟杨生梁祖承林健荣
- 关键词：蜂毒肽NA^+-K^+-ATPASE酶活性
- 蜂毒溶血肽对鸡红细胞及膜的生化作用被引量：13
- 2008年
- 本文采用荧光分光光度、薄层层析、原子吸收、荧光显微图像等多种生化技术,系统研究了蜂毒肽作用于鸡红细胞及膜的生化机理。结果表明:蜂毒肽影响红细胞膜上及胞内两种酶的功能。它抑制膜Na+-K+-ATPase活性,导致胞内外离子转运异常,K+浓度失衡;它也抑制细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性,其正电区域干扰胞内带负电小分子的作用,影响红细胞正常代谢。蜂毒肽干扰膜中阴离子通道的转运功能,使细胞渗透压改变,引起膨胀而溶血。蜂毒肽对有核红细胞核内DNA没有作用,与其他抗微生物多肽作用的靶向不同。据此认为,抗菌蛋白类抗生素对细菌作用的生化机理与传统抗生素不同,这是细菌对其不易产生耐药性的重要原因。
- 赵亚华张微李日清钟杨生郑慧平林健荣
- 关键词：蜂毒溶血肽生化机理NA^+-K^+-ATPASE葡萄糖-6-磷酸脱氢酶阴离子通道
- 高通量PCR模板植物基因组DNA制备方法被引量：19
- 2013年
- 制备大量生物样品的模板DNA用于PCR检测是费时费工的工作。本文介绍一种快速高通量的植物基因组DNA(gDNA)制备及其用于PCR基因型检测的操作方法。将一小段单子叶植物苗叶片(与96方孔板的孔深大致相同)或一小块(约2～5mg)双子叶植物叶片放入96方孔板的各孔中、放入一粒直径4mm或3mm的合金珠和150μL制备缓冲液,盖上硅橡胶盖,在涡旋器或震动研磨器震动2～4min破碎组织。此方法获得的粗制gDNA样品浓度约2～4ngμL?1。用96针复制器或多通道移液器转移约0.5～1.0μL的gDNA溶液到96孔PCR板的反应液中,利用各种类型的PCR标记(简单序列重复SSR,插入缺失InDel等)进行基因型检测。此方法制备的gDNA模板也适合于较大DNA片段(>1kb)的扩增。本方法的关键是控制好在一定溶液量中破碎合适量的叶片,以及不要加入过量的gDNA溶液,以免带入过多的杂质抑制PCR效果。这种从材料种植、制备gDNA、转移样品gDNA,到PCR都是96格式化操作的快速、高通量、低成本的方法特别适合大量植物样品的规模化基因型检测。
- 王慧娜初志战马兴亮李日清刘耀光
- 关键词：PCR基因分型
- 蜂毒溶血肽作用机理研究进展被引量：18
- 2007年
- 该文系统归纳了蜂毒溶血肽的生物学功能,分子结构与性质,溶解血细胞的机理,以及溶血和抑菌活性与结构的关系,并结合本实验室研究着重综述了近年来国内外对蜂毒溶血肽作用机理的研究。提出今后研究应该向定量化方向发展,应用计算技术深入阐明蜂毒肽作用的动力学过程及结构与功能的关系,为今后指导分子设计打下一定的理论基础。
- 赵亚华刘霭珊李日清高向阳张微郑慧平
- 关键词：蜂毒溶血肽生物活性分子结构构效关系
