林卡娜
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
- 供职机构：浙江大学医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技计划项目浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- FK866抗大鼠星形细胞胶质瘤作用及机制
- 目的 观察尼克酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)抑制剂FK866抗大鼠C6星形细胞胶质瘤的作用及分子机制.方法 MTT法检测细胞活性,流式细胞检测细胞凋亡和细胞周期,细胞计数检测细胞增殖,LC3免疫组化检测细胞自吞噬,We...
- 张丽媛张纬萍刘丽英徐丽华王峰戚玲玲林卡娜方三华卢韵碧魏尔清
- 大鼠GPR17基因真核表达载体的构建及其功能鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:构建大鼠GPR17(rGPR17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,并对其功能进行初步研究。方法:从大鼠脑组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增rGPR17 cDNA,与载体pcDNA3.1(+)连接,并转化到大肠杆菌DH5α以获得重组载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,以PCR、双酶切和测序鉴定;将重组载体pcDNA3.1(+)-rGPR17通过脂质体转染方法,转染HEK293细胞,RT-PCR、免疫荧光法检测rGPR17的表达,Fluo-4测定激动剂LTD4处理后细胞内钙变化。结果:RT-PCR、双酶切和测序证明,重组的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17构建成功,并在HEK293细胞获得表达,加入外源性激动剂LTD4可诱导细胞内钙的增加。结论:成功构建了rGPR17的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,并在HEK293细胞功能性表达,为GPR17受体及其拮抗剂的研究提供了基础。
- 林卡娜方三华蔡蓓蕾王欣欣卢韵碧张纬萍魏尔清
- 关键词：真核表达载体HEK293细胞细胞内钙
- 葡萄籽原花青素对氯化钴诱导的视网膜神经节细胞RGC-5缺氧损伤的保护作用被引量：3
- 2015年
- 目的：探讨体外葡萄籽原花青素对氯化钴致视网膜神经节细胞RGC－5缺氧损伤模型的保护作用。方法：采用氯化钴（400μmol／L）诱导RGC－5细胞化学缺氧损伤，观察葡萄籽原花青素（40μg／mL ）对缺氧的抗损伤作用。以MTT法检测细胞存活率；Hoechst 33342荧光染色法观察细胞凋亡情况；以H2 DCFDA荧光法检测细胞内活性氧的变化；实时定量PCR检测细胞Bcl－2、半胱酰胺天冬氨酸蛋白酶（ caspase ）9和caspase 3 mRNA水平。结果：与缺氧对照组比较，葡萄籽原花青素预处理可提高细胞存活率（ P＜0．001）、减少细胞凋亡（ P＜0．001） ，并减少细胞内的活性氧（ P ＜0．001）；葡萄籽原花青素还显著升高 Bcl－2基因的表达（ P ＜0．001） ，显著降低caspase 9和caspase 3基因的表达（ P＜0．001）。结论：葡萄籽原花青素对氯化钴诱导的视网膜神经节RGC－5细胞缺氧损伤起保护作用，其保护作用可能与细胞内活性氧减少、Bcl－2基因表达上调及casepase 9和casepase 3基因表达下调有关。
- 林卡娜林美丽魏尔清
- hCysLT2受体激活对IL8的影响
- 目的 研究hCysLT2受体激活后的信号通路.方法 采用脂质体转染的方法,将PcDNA3.1-hCysLT1、PcDNA3.1-hCysLT2、PcDNA3.1-rGPR17转到HEK293细胞中,并用G418600 m...
- 林卡娜王欣欣蔡蓓蕾余舒莹方三华卢韵碧张纬萍魏尔清
- CysLT/UDP受体GPR17在缺血性脑损伤中的作用
- 目的 探讨CysLT/UDP受体GPR17在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤脑组织中表达的时间和空间特征。方法 应用免疫组化、RT-PCR及Western blot方法,研究大鼠局灶性脑缺血30 min再灌注6h～28 d期...
- 赵冰魏尔清赵春贞史文珍林卡娜王欣欣方三华卢韵碧张纬萍夏强
- 稳定转染hCysLT_2受体的HEK293细胞株的构建及其受体拮抗剂的初筛被引量：1
- 2011年
- 目的:构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并初筛具有CysLT2受体拮抗活性化合物。方法:采用Lipofectamine 2000将质粒pcDNA3.1(+)-hCysLT2转染至HEK293细胞中,用96孔板有限稀释法挑选阳性单克隆细胞株,以RT-PCR和免疫荧光法检测hCysLT2基因的表达。稳定表达hCysLT2受体的HEK293细胞株,以激动剂LTD4诱导细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)增高为指标,初步筛选有拮抗作用的化合物。结果:转染后的HEK293细胞中挑选12个单克隆细胞株,11株高表达hCysLT2受体。阳性刺激物ATP为50μmol/L及LTD4 100 nmol/L能升高[Ca2+]i。AP-2100984抑制LTD4诱导的hCysLT2-HEK293细胞[Ca2+]i升高,CysLT1受体选择性拮抗剂无抑制作用。新合成化合物DXW2、DXW3、DXW4、DXW5、DXW9、DXW25、DXW26、DXW29、DXW35在1μmol/L能显著抑制LTD4引起的[Ca2+]i升高,其中DXW4和DXW5的IC50分别为0.25μmol/L和7.5μmol/L。结论:成功构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并可用于有拮抗活性化合物的筛选。
- 林卡娜王欣欣黄雪琴蔡蓓蕾方三华卢韵碧张纬萍魏尔清
- 关键词：半胱氨酰白三烯白三烯拮抗剂HEK293细胞细胞内钙
- 普鲁司特通过降低活性氧水平和抑制线粒体功能障碍对过氧化氢诱导的内皮细胞损伤的影响
- 目的 探讨普鲁司特对过氧化氢诱导的内皮细胞氧化损伤的影响和可能机制.方法 以EA.hy926细胞过氧化氢处理建立内皮细胞氧化损伤模型；以MTT法、LDH的释放检测以及细胞的PI和Hoechst染色评价细胞损伤,观察过氧化...
- 方三华林卡娜黄雪琴卢韵碧张纬萍魏尔清
- 半胱氨酰白三烯受体的基因转染及半胱氨酰白三烯受体2的信号转导
- 半胱氨酰白三烯/(cysteinyl leukotrienes, CysLTs,包括LTC4、LTD4和LTE4/)是花生四烯酸/(arachidonic acid, AA/)来源的一类重要炎症介质,通过激活其受体/(C...
- 林卡娜
- 关键词：半胱氨酰白三烯受体HEK293细胞信号通路基因转染
- 文献传递
