温建新
- 作品数：11 被引量：27H指数：3
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省科技重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Bacillus subtilis FS321的α-淀粉酶基因的克隆与表达被引量：1
- 2011年
- 耐热α-淀粉酶被广泛用于食品等诸多行业,从中国北方高温堆肥分离的枯草芽孢杆菌FS321中克隆了一中度耐热α-淀粉酶基因,并实现在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达。通过PCR技术克隆Bacillus subtilis FS321的α-淀粉酶编码基因(BSA),该基因全长1980bp。并构建重组表达质粒pET-28a/BSA,转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测到大小约为73.0kD的重组融合蛋白,可溶性淀粉平板检测结果表明BSA在大肠杆菌中实现了有效表达。该重组α-淀粉酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH7.5。
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- 关键词：枯草芽孢杆菌Α-淀粉酶克隆
- 一株耐热脂肪酶产生菌的鉴定及其脂肪酶基因的克隆被引量：4
- 2008年
- 目的:从北方堆肥土样中分离、筛选获得产耐热脂肪酶的嗜热菌株FS32b,确定该菌株的分类学地位及其所产耐热脂肪酶基因。方法:通过研究该菌株16SrDNA基因序列的系统进化树,进行菌种分类鉴定并利用PCR技术获得其脂肪酶基因。结果:FS32b与报道过的Bacillus subtilisX60646有紧密的亲缘关系,二者的16S rDNA序列相似性为99%,其脂肪酶基因经序列测定分析表明,该菌株含长度为639bp的耐热脂肪酶基因的完整开放阅读框架(ORF)。此片断编码有213个氨基酸的酶。结论:FS32b初步鉴定为Bacillus subtilis,其脂肪酶基因的克隆为以后高效基因工程菌的构建奠定了基础。
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- 关键词：基因克隆
- Bacillus subtilis FS1403耐热脂肪酶基因的克隆和表达
- 利用PCR技术克隆Bacillus subtilis FS1403脂肪酶基因,该基因全长639bp,GenBank登陆号为：EF538417.将该基因连接到原核表达质粒pET-28a上,构建重组表达质粒pET-28a-l...
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- 关键词：BACILLUSSUBTILIS基因克隆
- 脂肪酶产生菌Bacillus subtilis FS321的分离鉴定及其产酶条件的初步优化被引量：11
- 2008年
- 从北方堆肥试样中分离筛选得到1株中度耐热脂肪酶产生菌,编号为FS321。对该菌株进行产酶条件的初步优化,得到了摇瓶发酵条件:产酶培养基M4,发酵周期为48～60 h,摇瓶发酵温度为37℃,通气量为25 mL/250 mL锥形瓶。所产脂肪酶在50℃,pH 9.0时表现最高活性。为了鉴定该菌株,分析该菌的细胞脂肪酸谱,克隆测序了其16S rDNA基因序列,系统进化树及细胞脂肪酸组分分析均表明,FS321与Bacillus subtilis具有最紧密的亲缘关系。
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- 关键词：枯草芽孢杆菌产酶条件RDNA
- 一株产耐热脂肪酶的枯草芽孢杆菌的16SrDNA及其脂肪酶基因的克隆与测序
- 从北方堆肥试样中分离、筛选得到一株产耐热脂肪酶的细菌,编号为FS32a。该菌株产生的脂肪酶可以在55℃条件下水解底物三丁酸甘油酯。该菌株细胞结构中脂肪酸成分与细菌的DNA具有高度的同源性,借助全自动微生物鉴定系统(she...
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- 文献传递
- Bacillus subtilis FS321淀粉酶基因的克隆与表达
- 根据GenBank上B.subtilis的淀粉酶基因的保守序列设计引物,PCR扩增获得1980bp的B.subtilis FS321淀粉酶基因的完整阅读框,命名为BSA(GenBank登陆号为EU195860)。其与Ge...
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- 关键词：淀粉酶基因克隆
- 文献传递
- 中华拟德氏吸虫分子系统发生初步研究被引量：1
- 2008年
- 对中华拟德氏吸虫核糖体基因进行扩增、克隆和测定，研究其系统发生．测得ITS-2rDNA和18srDNA部分序列分别为537bp和1819bp，GenBank上登录号分别为EU082007、EU081899．序列分析表明：中华拟德氏吸虫与寄生于琥珀鱼的5种拟德氏吸虫ITS-2rDNA序列相似性很低，为49．0％～54．2％，可初步判断中华拟德氏吸虫是拟德氏属的一个独立种；基于18SrDNA序列分别与海水未定名血居吸虫（AY157184）、淡水血居吸虫Plethorchis acanthus（AY222096）的亲缘最近，同源性高达99．4％和95．1％；与旋睾科吸虫Unicaecum sp．（AY604719）及5种裂体吸虫的同源性则分别为92．7％和91．5％～92．5％．可见血居科与旋睾科和裂体科吸虫的亲缘关系密切．
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- 关键词：红鳍东方纯遗传进化树
- 耐热脂肪酶产生菌FS1403的分离筛选和16SrDNA基因序列的分析被引量：11
- 2008年
- 从菲律宾火山口土样中分离、筛选获得一株产脂肪酶的耐热菌FS1403，对该菌脂肪酶的酶学性质初步研究表明：酶的最适作用温度为55℃，60℃处理1h保持70％酶活性，为中度耐热脂肪酶。酶的最适pH值为8．0，在pH7～pH10的条件下酶活都比较稳定。采用细菌16SrDNA通用引物，PCR扩增、克隆并分析了该菌的16SrDNA基因序列，同源性和系统发育学分析表明菌株FS1403与Bacillus subtilis具有最紧密亲缘关系。
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- 关键词：脂肪酶耐热菌
- Bacillus subtilis FS321脂肪酶基因的克隆与表达
- 根据GenBank中一些已知的B.subtilis的脂肪酶基因的保守序列,设计引物,以B.subtilis FS321基因组NA为模板,PCR扩增获得了FS321脂肪酶基因的完整阅读框(CenBank登陆号为EF5674...
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- 关键词：BACILLUSSUBTILIS脂肪酶基因克隆
- 一株耐热脂肪酶产生菌的鉴定及其脂肪酶基因的克隆
- ＜正＞从菲律宾火山口土样中分离、筛选获得的FS14-3菌株,从平板上挑取新活化单菌落,接种于产酶培养基,振荡培养,离心,取上清液,各制成多块琼脂板,将离心上清液加入其中,并分别在不同温度和pH下比较菌株所产脂肪酶的活性。...
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- 文献传递
