刘晓玲
- 作品数：6 被引量：51H指数：4
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- 马铃薯Y病毒CP基因5′端和3′端反向重复结构介导的抗病性研究被引量：23
- 2007年
- 本研究克隆了来源于马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)外壳蛋白(CP)基因(PVYNCP)5′端和3′端的反向重复cDNA序列,并构建了植物表达载体pROKII-5′IR和pROKII-3′IR,利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草NC89,分别获得166和126株转基因烟草。抗病性试验表明,转化PVYNCP基因3′端茎50 bp(环50 bp)hp RNA(hairpin RNA)的烟草抗病率达69%,而转化PVYNCP基因5′端相同片段长度的hpRNA的烟草却全部发病。Southern blot结果表明,转基因植株的抗病性与转基因的拷贝数之间无明显的相关性;Northern blot结果表明,目的片段转录产物的积累量与植株的抗病性呈负相关,证明所获得的抗病性是RNA介导的抗病性。研究结果证明PVYNCP基因的3′端比5′端更能有效地诱发基因沉默,并且hpRNA茎部的长度可减少到50 bp。该结果为探索利用CP基因的最短长度和有效部位的基因片段来培育多抗病毒转基因植物提供了依据。
- 李鹏宋云枝刘晓玲朱常香温孚江
- 关键词：HPRNA马铃薯Y病毒
- 利用RNA介导的抗病性获得抗2种病毒的转基因烟草被引量：23
- 2005年
- RNA介导的病毒抗性(RMVR)是近年发展起来的一种新的植物抗病毒基因工程策略,具有抗病性强、抗性持久、生物安全性高等特点。利用该策略培育多抗病毒植株具有广阔的应用前景和重要的实践意义。本研究将非翻译的马铃薯X病毒的衣壳蛋白(PVX-CP)基因和非翻译的马铃薯Y病毒的衣壳蛋白(PVY-CP)基因组成嵌合基因,构建植物表达载体pROKXY,利用农杆菌介导法转化烟草NC89,获得6株对PVX和PVY的混合侵染表现为免疫的转基因植株。分子分析表明,这种抗性为RNA介导的病毒抗性。这一研究结果为利用RMVR进行植物多抗病毒育种提供了重要数据和资料。
- 白庆荣朱俊华刘晓玲朱常香宋云枝温孚江
- 关键词：马铃薯X病毒嵌合基因转基因烟草
- PVX 25kD运动蛋白基因和外壳蛋白基因介导的抗病性研究
- 利用病毒本身的基因获得抗病毒转基因植株,即源于病原物的抗病性/(pathogen-derived resistance ,PDR/),已经成为植物抗病毒基因工程育种的主要措施之一。其中包括外壳蛋白/(CP/)基因、运动蛋...
- 刘晓玲
- 关键词：运动蛋白外壳蛋白
- 文献传递
- 核基质结合区对马铃薯Y病毒全长非翻译CP基因介导抗病性的影响被引量：7
- 2005年
- 为探索核基质结合区(m atrix attachm ent reg ions,MAR s)对RNA介导的病毒抗性的影响,我们将从烟草中克隆到的核基质结合区TM 2构建在包含马铃薯Y病毒全长非翻译CP基因的植物表达载体pRPVYCPN的表达盒的两侧,构建了植物表达载体pRTM 2CPNTM 2。采用农杆菌介导基因转化法,将表达载体pRPVYCPN和pRTM 2CPNTM 2转入烟草品种NC89中,分别获得了144株和344株转基因烟草。抗病性检测发现,核基质结合区的存在能明显提高RNA介导抗性的产生效率。在含MAR s转基因植株中,抗病植株的比率为15.1%,而不含核基质结合区的转基因植株的抗病比率则为8.3%。这一研究结果对抗病毒植物的分子育种和转基因表达调控有指导意义。
- 迟胜起宋云枝朱常香郑成超刘晓玲温孚江
- 关键词：核基质结合区马铃薯Y病毒
- FGF10基因影响安哥拉兔毛形态的机制研究
- 刘晓玲
- 马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因和外壳蛋白基因介导的抗病性研究被引量：13
- 2005年
- 以马铃薯X病毒(potatovirusX,PVX)的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT PCR)方法分别扩增出长度为681bp的非翻译马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因(PVX p25)和长度为714bp的非翻译马铃薯X病毒外壳蛋白基因(PVX CP)。并分别构建植物表达载体pROKⅡp25和pROKⅡCP。利用农杆菌介导方法转化烟草NC89。经卡那霉素筛选、PCR检测,共获得转非翻译PVX p25的转基因植株78株,转非翻译PVX CP的转基因植株83株。抗病性试验表明,转非翻译PVX p25的78株中有31株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为39.7%;转非翻译PVX CP的83株中有11株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为13.3%。分子生物学检测和抗病性分析表明,抗病性均为RNA介导的病毒抗性。研究结果初步证明,转非翻译PVX p25可以更有效地获得抗PVX转基因植株。
- 刘晓玲宋云枝刘红梅温孚江朱常香白庆荣
- 关键词：马铃薯X病毒运动蛋白外壳蛋白
