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严重急性呼吸综合征冠状病毒2单克隆抗体的制备: 2020年; 目的制备针对严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的单克隆抗体,用于抗原诊断。方法收集分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞上清液,并用Western blot和间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测单克隆抗体与SARS-CoV-2 N蛋白之间的反应。通过免疫荧光,检测单克隆抗体与Vero细胞培养物中SARS-CoV-2的反应性。结果从杂交瘤细胞中获得了两种单克隆抗体,分别称为A1和A2。它们都可以与SARS-CoV-2 N蛋白发生反应,而A2也可以识别SARS-CoV N蛋白。这些单克隆抗体可用于ELISA和免疫荧光实验。结论获得了2种针对SARS-CoV-2 N蛋白的单克隆抗体,为发展SARS-CoV-2抗原检测方法提供了基础。; 王迎迎吴超肖霞肖霞王营王聪慧肖艳郭丽任丽丽肖艳; 关键词：核衣壳蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附试验免疫荧光

EV71 3C蛋白酶对肿瘤坏死因子受体相关因子3（TRAF3）的切割作用研究被引量：2: 2014年; 目的探讨肠道病毒71型（EV71）编码的3C蛋白酶对于肿瘤坏死因子受体相关因子3（TRAF3）的切割作用.方法采用Western blot的方法检测EV71感染对于TRAF3蛋白表达的影响.体外转染TRAF3和3C蛋白,通过Western blot检测3C对于TRAF3蛋白的影响.通过构建3C突变体,检测其蛋白酶活性对于切割的影响.通过免疫共沉淀检测3C对于TRAF3和TRIF相互作用的影响.结果 EV71感染细胞后可引起TRAF3蛋白的减少,其3C蛋白酶可以引起TRAF3的切割,蛋白酶活性位点突变后则不引起TRAF3的切割.位点突变试验显示TRAF3的Q242位突变后则不能被3C切割,且3C可以减少TRAF3与TRIF的结合.结论 EV71 3C蛋白酶可通过切割TRAF3机制在天然免疫逃逸中发挥作用.; 韩宁肖霞雷晓波王健伟; 关键词：肠道病毒71型天然免疫

PEF1在肠道病毒71型复制中的作用研究: 2019年; 目的探讨PEF1(penta-EF-hand domain containing 1)对肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)复制和感染的影响。方法采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)方法,敲低人恶性胚胎横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma,RD)中PEF1的表达,通过RT-PCR、蛋白免疫印迹(western blot,WB)实验检测siRNA的效率。通过RT-PCR、WB和空斑实验检测并比较对照细胞和PEF1敲低细胞中EV71的复制水平。利用免疫荧光检测EV71感染后PEF1在细胞中的定位。采用CRISPR-Cas9技术构建PEF1敲除的RD细胞系,并通过测序和WB实验验证敲除效果,同时使用WB实验检测PEF1敲除的细胞中EV71的复制。结果siRNA能够显著降低RD细胞中PEF1的表达。EV71在PEF1敲低的细胞中的复制水平低于对照细胞。EV71感染后细胞内PEF1的表达水平并未发生改变,但是在细胞内的定位发生了改变。PEF1敲除细胞中EV71的复制水平也显著降低。结论敲低或敲除PEF1的表达能抑制EV71的复制,EV71感染并不影响PEF1的表达但改变其在细胞内的定位。; 董思文肖霞齐建利雷晓波王健伟; 关键词：肠道病毒71型病毒复制 DOMAIN CONTAINING

高尔基体蛋白ACBD3参与肠道病毒复制的机制研究: 肠道病毒71型(EV71)是引起婴幼儿重症手足口病的主要病原体，其感染可导致严重的神经性疾病，包括无菌性脑膜炎、脑干脑炎和神经性肺水肿等。近年来大规模发生的手足口病疫情，严重危害婴幼儿、尤其是农村地区幼儿的身体健康，给公...; 肖霞; 关键词：肠道病毒病毒复制分子机制

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肖霞