苏秋东
- 作品数：28 被引量：44H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 广东省佛山市乙型肝炎患者伴随丁型肝炎感染的现状调查被引量：2
- 2012年
- 目的了解广东省佛山市的丁型肝炎（丁肝）感染现状，为全国的丁肝流行病学调查工作奠定基础。方法搜集广东省佛山市第一人民医院2011年的乙型肝炎（乙肝）阳性血清，以不同公司的丁肝酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）诊断试剂平行检测；进一步以反转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT—PCR）方法辅证。结果两种ELISA丁肝诊断试剂检测结果一致，8例阳性；经RT-PCR进一步验证，结果正确。结论广东省佛山市丁肝病毒感染率高于全国平均水平，无性别统计学差异，且感染人群偏于高年龄组。
- 李炜煊丁军颖卢学新苏秋东伊瑶贾志远田瑞光邱丰毕胜利
- 关键词：流行病学研究
- 基因工程丁肝抗原的获取和鉴定
- 2012年
- 目的获取有生物活性的基因工程丁肝抗原蛋白,探讨其作为诊断试剂的应用价值。方法合成人工编码的丁肝小抗原基因;以M48为载体,构建重组表达质粒;进行原核表达;以亲和层析纯化并以Western blotting和ELISA鉴定该蛋白。结果酶切鉴定构建的表达质粒正确;SDS-PAGE电泳结果显示该蛋白与预期分子质量大小一致;Western blotting和ELISA结果显示该蛋白能与丁肝抗体特异性结合。结论成功获取了有生物活性的基因工程丁肝抗原蛋白,可以1∶1000稀释度作为包被抗原替代丁肝抗体诊断试剂成分,用于ELISA检测。
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- 关键词：基因工程蛋白表达
- 自发生物素化风疹病毒重组诊断抗原的制备被引量：4
- 2016年
- 目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒（Rubella Virus,RV）重组抗原E1（RV-E1）,并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物（BSP）插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白（Thioredoxin,TRX）插入到RV-E1的氨基端,密码子优化后全基因合成;在大肠埃希进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化获取生物素化的RV-E1抗原;利用Western Blotting技术对目的蛋白进行鉴定,并建立风疹病毒IgM抗体检测方法,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.结果 获取高度均质的生物素化的可溶性RV-E1抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被RV-E1抗原和TRX抗原单克隆抗体识别,而且可以被标记HRP的链霉亲和素所识别.分别对50份风疹病毒感染阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异.结论 RV-E1诊断抗原携带BSP,可以在大肠埃希菌表达过程中自发共价结合生物素分子,并可以作为新型诊断抗原应用于生物素-亲和素ELISA血清学检测中.
- 苏秋东郭敏卓邱丰贾志远卢学新孟庆玲田瑞光高燕毕胜利伊瑶
- 关键词：原核表达
- 甲型肝炎病毒3C蛋白的原核表达及其抗原性研究
- 随着人民生活水平提高,甲型肝炎的发病率逐年下降,群体免疫力却随之减弱,极易造成大规模的爆发流行。国家因此通过人工主动免疫的方式提升甲型肝炎群体免疫力。但甲型肝炎疫苗的普种却引发了一些负面问题。现行的甲型肝炎诊断试剂,如被...
- 苏秋东
- 关键词：自然感染原核表达系统非结构蛋白急性期血清
- 1例HDV抗体IgM阳性HBVS抗原阴性的肝炎患者分子诊断分析
- 2016年
- 目的 为了进一步对临床中可能出现HDV抗体IgM阳性，常规HBV五项检测阴性的特殊患者进行诊断，从而对HDV的感染进行准确的判定。方法设计HBV和HDV的特异引物，通过提取血清中病毒的核酸，扩增出病毒的基因组序列，使用BLAST在Genebank中进行比对。结果本实验在这例血清中扩增到了HDV和HBV的基因序列，通过BLAST后发现扩增序列与HBV和HDV基因序列存在较高的一致性。结论在临床诊断中，HDV感染者会出现血清中HDV抗体IgM阳性HBVS抗原阴性的特殊情况，应当引起临床的重视。
- 卢学新伊瑶苏秋东毕胜利
- 关键词：HDV共感染分子诊断
- 乙型肝炎疫苗新制剂方案的免疫原性研究
- [目的]： 制备嵌合乙型肝炎病毒（HBV）优势表位的病毒样颗粒（VLP）和生物佐剂与HBsAg共价偶联疫苗制剂两个思路探索解决现行疫苗在预防和控制HBV感染中所存在的低无应答、低效激起细胞免疫、无法打破免疫耐受以及...
- 苏秋东
- 关键词：乙肝疫苗病毒样颗粒
- 高效表达乙型肝炎病毒表面抗原的CHO细胞株的建立
- 2013年
- 目的探索乙型肝炎病毒表面抗原（s）基因在CHO无血清细胞培养系统中的高效表达。方法构建包含乙肝病毒s基因的质粒，转染CHO细胞，经MTX筛选后对培养液上清中的表达产物进行血清学检测以及形态学的观察。结果获得了能高效稳定表达HBsAg的CHO细胞株，电镜下可观测到小球型和管型颗粒，ELISA检测表达产物滴度达到1：5000。结论成功构建高效表达乙型肝炎病毒s蛋白的CHO无血清培养细胞株，表达的HBsAg具有良好的抗原活性。
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- 关键词：细胞培养
- 一种改良的环介导恒温扩增技术在甲型肝炎病毒核酸检测上的应用被引量：2
- 2012年
- 目的建立一种更加快速简便的环介导恒温扩增技术（LAMP）检测甲型肝炎病毒（HAV）。方法本研究通过在传统LAMP的基础上加入加速引物建立了一种改进型的LAMP体系。结果精确性和可重复性实验证实改进后的HAVLAMP检测体系稳定可靠，重复性强，并且较传统的LAMP灵敏度更高，检测极限可以达到5TCID50／ml。当该方法用于甲型肝炎患者急性期血清临床样本的检测时，实验结果与TaqMan实时荧光定量PCR的检测结果一致。结论改进型的LAMP技术有望应用于HAV临床样本检测，同时也适用于HAV流行地区的病原学监测和调查。
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- 关键词：核酸扩增技术
- 两种嵌合乙型肝炎病毒preSl中和表位的乙肝核心病毒样颗粒的制备与抗原性分析被引量：1
- 2013年
- 目的构建嵌合preSl2147位氨基酸（aa）、以全长乙肝病毒（HBV）核心抗原（HBcAg）为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3，并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插入到全长HBc（aa1—183）和截断HBc（8a1—144）的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间，密码子优化之后全基因合成，目的片段经双酶切（NdeI和XhoI）回收后连接到同样处理的pET43．1a载体上，在大肠埃希菌E．coliBL21（DE3）中表达，精细纯化后通过电镜观察蛋白形态、ELISA以及WesternBlott检测其抗原性。结果成功构建表达质粒H2和H3，并在BL21（DE3）中高效表达和自发组装成病毒样颗粒。纯化后电镜观察H2和H3形态为二十面体立体对称样病毒样颗粒，H2为实心颗粒，直径为（31．61±1．27）nm，H3为空心颗粒，直径为（28．46±1．16）nm。统计分析可得H2直径要比H3直径大（P〈0．01）。ELISA和WesternBlott检测结果证实其插入表位preSl以及载体蛋白HBc的抗原性。结论成功获得两种嵌合HBVpreSl中和表位的病毒样颗粒，为其在疫苗研究中的应用探索奠定基础。
- 苏秋东郭敏卓伊瑶陈斯勇贾志远卢学新邱丰毕胜利
- 关键词：肝炎病毒乙型表位病毒核心蛋白质类病毒样颗粒
- 慢性乙型肝炎感染自然史被引量：10
- 2012年
- 依据病毒学和生物化学参数，可将慢性乙肝自然史划分为免疫耐受期（I期）、免疫清除期（Ⅱ期）以及免疫无活性乙肝病毒非复制期（Ⅲ期）。有时患者会进入一个乙肝e抗原（HBeAg）血症消失而病毒血症出现以及慢性活动性肝炎发展的时期，即HBeAg阴性的HBV复制期（IV期），表征着前核心区（pre—core）突变株的出现[1]。四个时期并不是必须全部出现在某一患者身上，也不是必须按顺序出现。
- 苏秋东毕胜利
- 关键词：慢性乙型肝炎感染自然史免疫耐受期病毒血症免疫清除期乙肝E抗原
