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湖南永州人群高血压病患者脑血管疾病的防治研究: 2009年; 目的观察从单纯的血压控制转移到降低脑血管疾病为治疗原则的高血压新疗法的临床效果。方法选取238例高血压病患者(基础收缩压为160mmHg以上),随机分为两组,治疗组123例持续的给予氨氯地平(5mg)加辛伐他汀(20mg),对照组115例给予氨氯地平(5mg)加安慰剂;观察两年内脑卒中的发生情况。结果两组的血压无显著性差异(P>0.05),两组的甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白之间均有显著性差异(P<0.05或<0.01);治疗组患者脑卒中发生率较对照组显著降低(P<0.01),两组的卒中病死率无显著性差异(P>0.05)。随着治疗时间的延长临床效果越显著。结论给予高血压患者氨氯地平控制血压联合他汀类药物降血脂能够更大幅度的降低脑卒中的发生风险。; 严洁张成忠唐子惠蒋恒波胡斌唐启龙; 关键词：高血压病患者脑血管疾病氨氯地平低密度脂蛋白高密度脂蛋白

“互联网+”时代乡村医生培养项目的诊断学教学模式重构: 2020年; 新农村建设的不断深入对乡村医生培养提出了更高要求,诊断学课程更是成为了临床医学(乡村医生)专业的核心课程,因此改善该课程教学是培养优秀乡村医生的重要途径。"互联网+"时代的到来为诊断学教学的创新优化提供了良好机遇和挑战,紧抓机遇并合理应对挑战,能够有效重构诊断学教学模式,将为大量优秀乡村医生的培养奠定基础。本文将简单分析互联网背景下诊断学教学面临的机遇和挑战,并对"互联网+"时代乡村医生培养诊断学教学模式重构策略展开探讨。; 李杰熊礼杭严洁; 关键词：乡村医生诊断学教学模式重构

金黄色葡萄球菌锰超氧化物歧化酶的表达纯化及活性分析被引量：3: 2020年; 目的克隆表达、纯化金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)并测定其活性。方法使用Clustal Omega比对不同来源Mn-SOD的序列,使用Swiss model网站预测金黄色葡萄球菌Mn-SOD的三级结构。提取细菌DNA,以此为模板PCR扩增获得Mn-SOD基因并将其与pET28a连接,构建pET28a-Mn-SOD重组质粒。将重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)获得重组菌BL/pET28a-Mn-SOD,使用IPTG诱导表达重组Mn-SOD,通过镍柱亲和层析纯化Mn-SOD蛋白并测定不同pH条件下的酶活性。结果金黄色葡萄球菌Mn-SOD具有Mn-SOD的特征序列和锰离子结合位点。成功得到重组质粒pET28a-Mn-SOD,转化大肠埃希菌BL21后表达相对分子质量为24.8×10^3的Mn-SOD,使用Ni^2+柱纯化后得到高纯度的Mn-SOD,且在pH值为7.5时活性较高,约为3 200 U/mL。结论成功构建了pET28a-Mn-SOD重组质粒能,表达的Mn-SOD重组蛋白纯化后仍具有SOD活性。; 杨宇虹严洁李杰; 关键词：金黄色葡萄球菌锰超氧化物歧化酶生物信息学

鲍曼不动杆菌UspA蛋白的克隆表达及生物信息学分析被引量：1: 2019年; 目的克隆表达及纯化鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)普遍应急蛋白A(Universal stress protein A.UspA).并进行生物学预测和分析。方法查询鲍曼不动杆菌UspA基因序列,设计特异性PCR引物,以提取的鲍曼不动杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UspA片段。回收目的片段,连接到质粒pET28a.转化大肠埃希菌.37℃培养后,进行PCR扩增并测序。将重组质粒转入表达菌,加人IPTG诱导重组UspA蛋白表达.并经Ni2+亲和层析纯化。采用生物信息学软件分析UspA蛋白的生物学特性。结果获得全长为444 bp的鲍曼不动杆菌UspA基因,且成功构建了重组质粒pET28a-UspA.得到纯度较高的相对分子质量17X103的重组UspA蛋白。该蛋自为细菌的胞质蛋白,其a-螺旋占51%,延伸链占27%,无规卷曲的含量占31%。由2个同源UspA蛋白分子构成二聚体。结论成功克隆表达了鲍曼不动杆菌UspA蛋白。该蛋白可能含B细胞表位,而具有免疫原性,为其生物学活性及耐药机制研究提供了理论基础。; 李杰严洁李冉; 关键词：鲍曼不动杆菌生物信息学

福氏志贺菌临床分离株CTX-M9及TEM基因的检测: 2013年; 目的探讨湖南永州地区福氏志贺菌临床分离株中β-内酰胺酶耐药基因CTX-M9及TEM的检出情况。方法采用分离培养以及生化和血清学鉴定临床分离株。K-B纸片扩散法分析其对抗菌药物的敏感性,同时针对CTX-M9及TEM基因设计特异性引物,采用PCR方法对齐进行扩增。结果永州市区医院分离的55株福氏志贺菌,其中对氨卞西林的耐药率为87.3%,复方磺胺甲噁唑耐药率为83.6%,头孢曲松耐药率为15.3%。耐药基因TEM的2011年1月—2012年11月检出率为32.7%。CTX-M基因占所有阳性分离株的79.6%,其中同时携带TEM和CTX-M基因的占19.5%。结论永州地区福氏志贺菌对氨卞西林、头孢曲松等抗生素耐药率较好,可能与CTX-M9及TEM基因的高表达有关。; 李杰严洁蒋恒波; 关键词：福氏志贺菌 Β-内酰胺酶 TEM

慢性呼吸道感染患者呼吸道分泌物分离奈瑟菌的cppB与pJD1基因检测: 2022年; 目的探究对慢性呼吸道感染患者呼吸道分泌物分离奈瑟菌的cppB与pJD1基因检测进行检测的临床诊断意义。方法将2018年5月-2019年5月在我院治疗的98例慢性呼吸道感染患者作为菌株来源,对患者进行痰标本菌株分离,共分离出奈瑟菌株368株,菌种9种,其中浅黄色奈瑟菌25株,微黄奈瑟菌46株,干燥奈瑟菌37株,嗜乳糖奈瑟菌48株,黏液奈瑟菌26株,多糖奈瑟菌52株,灰色奈瑟菌65株,脱氨奈瑟菌49株以及淋病奈瑟菌20株。分析所分离菌株中的cppB与pJD1基因检测结果差异。结果对分离出的奈瑟菌属菌种进行cppB及pJD1基因检测,共有90株奈瑟菌检出cppB阳性占比为24.46%,51株检出pJD1阳性,占比为13.86%。其中cppB检测干燥奈瑟菌与黏液奈瑟菌检出率均为100%,淋病奈瑟菌cppB与pJD1检测均表现为阳性反应。结论慢性呼吸道感染患者呼吸道中存在的正常奈瑟菌群也会引起患者泌尿生殖系统感染,可能引起尿道炎等疾病。对正常奈瑟菌进行cppB及pJD1检测时也会出现较为明显的反应,因此在临床诊断中需要对患者进行病原体分析联合常规细菌检测提高诊断的准确性。; 唐利亚李杰严洁; 关键词：慢性呼吸道感染奈瑟菌基因检测

永州市福氏志贺菌临床分离株毒力基因的研究: 2013年; 目的对2012年湖南省永州市医院分离的144株福氏志贺菌进行毒力基因的检测,以了解其毒力基因的携带情况。方法针对毒力基因,设计特异性引物,采用PCR方法检测临床分离株中ial、ipaH和icsP毒力基因的分布情况。结果 144株福氏志贺菌中,其中F 1 a 65株(45.1%),F 2 a 30株(20.8%),Fx 24株(16.7%),其他25株(17.3%)。ipaH、icsP基因的阳性率为100%(144/144),而ial基因的阳性率为53.4%(77/144)。结论永州市的福氏志贺菌的ipaH和icsP携带率非常高,而ial基因携带率相对较低。; 李杰严洁蒋恒波; 关键词：福氏志贺菌毒力基因临床分离株

NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素8的机制: 2024年; 目的:研究幽门螺杆菌NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的机制。方法:利用NapA蛋白处理巨噬细胞,然后使用ELISA法检测上清中MCP-1和IL-8的表达量。使用C29、ST2825、SB203580、SP600125以及PDTC和巨噬细胞预先共孵育1 h,分别抑制Toll样受体2(toll-like receptors 2,TLR2)、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核糖核酸酶p蛋白亚基p38(ribonuclease p-protein subunit p38,p38)、应激活化蛋白激酶(c-Jun N-terminal kinase,c-Jun)和核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的活性,然后再加入NapA蛋白孵育4 h,收集上清并检查其中MCP-1和IL-8的表达量。结果:NapA蛋白刺激巨噬细胞后,MCP-1和IL-8的表达量明显高于未处理组。利用抑制剂C29抑制TLR2的活性,NapA蛋白诱导的MCP-1和IL-8表达量降低。使用ST2825、PDTC以及SB203580分别抑制MyD88、NF-κB以及p38的活性,能够降低NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8的能力,但是抑制c-Jun不影响NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。结论:幽门螺杆菌NapA蛋白通过TLR2/MyD88/NF-κB通路诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。; 李杰严洁严洁; 关键词：趋化因子单核细胞趋化蛋白1 白细胞介素8

幽门螺杆菌Tip α蛋白经激活NF-kB对巨噬细胞分泌细胞因子诱导机制分析被引量：2: 2020年; 目的探讨幽门螺杆菌Tipα蛋白经激活NF-kB对巨噬细胞分泌细胞因子诱导机制。方法选择经重组纯化Tipα蛋白刺激的巨噬细胞,通过ELISA法检测TNF-α、IL-1β以及IL-18等炎症细胞因子的表达水平。通过NF-kB通路阻断剂PDTC、ROS清除剂NAC对细胞进行预处理,应用ELISA法对预处理前后的Tipα诱导细胞的促炎细胞因子水平进行检测对比,通过Western Blot法对NLRP3、Caspase-1分子表达水平进行检测。结果随Tipα蛋白浓度提高,TNF-α、IL-1β以及IL-6表达水平也相应提高;多黏菌素B对于Tipα诱导所产生的TNF-α无明显的影响(P>0.05);PDTC对Tipα诱导巨噬细胞的TNF-α、IL-6以及IL-1β表达水平起到抑制作用。结论Tipα蛋白经激活NF-κB诱导巨噬细胞产生TNF-α、IL-1β以及IL-6等炎症因子。; 李杰熊礼杭严洁; 关键词：幽门螺杆菌巨噬细胞细胞因子

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严洁

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