张新华 作品数:32 被引量:161 H指数:7 供职机构: 复旦大学 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 语言文字 生物学 理学 更多>>
三种树突状细胞肝癌瘤苗的构建及其抗肝癌活性比较 <正> 以小鼠Hepal-6肝癌细胞株构建小鼠肝癌模型;分离提取Hepal-6肝癌细胞膜抗原、肝癌细胞总RNA,并分离、纯化人AFP,体外分别以上述3种成份脉冲或以脂质体介导转染由C57BL/6J小鼠骨髓前体细胞培养、扩... 钟翠平 王国强 范强 张新华 顾云娣文献传递 树突状细胞负载前列腺癌细胞抗原后的抗肿瘤免疫作用 2004年 目的 探讨小鼠树突状细胞 (DC)负载前列腺癌细胞株RM 1的裂解产物后 ,诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)及其抗肿瘤的免疫作用。方法 将RM 1细胞的裂解产物 (T lysate)作为肿瘤抗原负载小鼠骨髓来源的DC ,构建DC瘤苗 (T lysate/DC) ,采用流式细胞术和四唑氮蓝 (MTT)还原法检测其免疫活性 ;ELISA法检测其诱导细胞因子白介素(IL) 2和γ 干扰素 (IFN γ)的作用 ;体内实验检测DC瘤苗的抗肿瘤免疫治疗作用和免疫保护作用。结果 DC负载RM 1细胞的裂解产物后 ,其主要组织相容性复合物 (MHC Ⅰ、Ⅱ )及共刺激分子 (B7 1、B7 2 )的表达明显增高 ;T lysate/DC能够诱导小鼠产生RM 1特异性CTL ,使细胞上清液中IL 2和IFN γ水平升高 ,对小鼠具有免疫保护作用 ,并能有效抵抗肿瘤细胞的攻击 ;经T lysate/DC治疗的荷瘤小鼠瘤体生长减慢 ,存活期延长 ,瘤体出现坏死和炎细胞浸润。 结论 DC负载前列腺癌细胞裂解产物后 ,能够有效诱导抗肿瘤免疫反应 ,为前列腺癌的临床治疗提供了新策略。 李博 夏术阶 刘海涛 徐东亮 张新华 钟翠平 唐孝达关键词:树突状细胞 前列腺癌 免疫治疗 稀土元素对铅及其合金阳极腐蚀影响的研究 铅酸蓄电池作为应用范围最广,技术最成熟的化学电源,在实际应用中仍存在着一些难以解决的问题,如较低的质量比能量和较差的深循环性能,引起后者的关键因素之一是板栅合金的腐蚀破坏.针对这方面,该文论述了稀土元素Pr,Nd和Gd对... 张新华关键词:稀土元素 铅 铝合金 电化学测量 文献传递 小鼠肝癌总RNA转染的树突状细胞体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞的研究 被引量:6 2002年 目的 :探讨小鼠骨髓树突状细胞 (dendriticcell,DC)体外经Hepa 1 6肝癌细胞株总RNA转染后 ,对特异性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)的诱导作用。方法 :自小鼠骨髓分离DC前体细胞 ,经GM CSF +IL 4培养、扩增 ;制备Hepa 1 6小鼠肝癌细胞株总RNA ,体外转染DC ,检测DC诱导同基因型小鼠T细胞增殖及其特异性CTL的反应能力。结果 :经Hepa 1 6肝癌细胞总RNA转染的DC ,其组织相容性分子 (MHC I、II)及共刺激分子 (B7 1 、B7 2 )表达明显增高 ,刺激同基因型小鼠T细胞增殖能力增强 ,且能诱导Hepa 1 6特异性CTL。结论 :以肝癌总RNA转染DC ,构造肝癌疫苗为肝癌的临床治疗提供了新的策略。 王国强 钟翠平 傅继东 范强 张新华 吴超群 顾云娣关键词:树突状细胞 肝癌 细胞毒T淋巴细胞 RNA转染 肝再生的分子生物学研究进展 被引量:7 2003年 肝细胞具有很强的增殖能力。肝损伤后机体能精确地调控肝细胞增殖、生长 ,迅速恢复其原有体积和重量。当肝细胞复制被阻断或延误时 ,肝内就会启动干细胞增生。最近研究发现再生肝基因表达可分几个阶段 :肝再生的启动始于大量即刻基因表达 ,G1期的肝细胞对生长因子肝细胞生长因子 (HGF) ,转化生长因子α、β(TGFα、β)、表皮生长因子 (EGF)和肿瘤坏死因子 (TNF)及IL 6等细胞因子有反应 ;至少有四种转录因子即NFkB、STAT3、AP 1和C/EBPβ在起动肝再生中发挥重要作用。 陈伟 张新华 钟翠平关键词:肝再生 分子生物学 细胞增生 肝前体细胞 核因子-κB对小鼠树突状细胞分化成熟及其体外刺激T细胞免疫反应的影响 被引量:8 2004年 目的 探讨在小鼠树突状细胞 (DC)成熟过程中核因子 κB(NF κB)基因的作用。方法 应用特异性NF κB寡聚脱氧核苷酸诱骗剂 (NF κBODNDecoys)阻断NF κB活性 ,观察DC形态、细胞表面分子表达以及同种T淋巴细胞增殖反应的变化 ,了解NF κB基因对DC成熟及免疫生物活性的影响。结果 NF κBODNDecoys的有效摄取 ,抑制了DC表面共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达和白细胞介素 1 2 (IL 1 2 )的分泌 ,阻碍了DC的发育成熟 ,这种阻碍作用不可被脂多糖 (LPS)所逆转。混合淋巴细胞反应显示 ,NF κBODNDecoys的应用可诱导DC刺激同种T淋巴细胞低反应活性 ,抑制了T细胞IL 2和γ 干扰素 (IFN γ)的分泌。结论 NF κB是DC发育成熟过程中关键性调控基因。应用NF κBODNDecoys可抑制DC的成熟 ,从而为生成耐受原性未成熟DC。 徐东亮 唐孝达 李博 刘永 张新华 吴超群 钟翠平关键词:核因子-ΚB 小鼠 树突状细胞 细胞免疫反应 TGFβ1基因转染对大鼠树突状细胞分子表型和细胞因子分泌的影响 被引量:1 2006年 目的:研究转化生长因子β1(TGFβ1)基因转染大鼠树突状细胞(DC)表面分子表达以及细胞因子分泌的影响。方法:构建TGFβ1重组真核表达质粒TGFβ1-pcDNA3,以脂质体Am ine介导转染大鼠骨髓DC,经过W estern b lot、RT-PCR、免疫细胞化学以及免疫荧光染色检测转染效率,应用FACS和免疫细胞化学等方法检测TGFβ1-DC分子表型以及细胞因子分泌的变化。结果:结果显示TGFβ1基因转染后可得到一定数量稳定的TGFβ1-DC,并获得有效TGFβ1的mRNA和蛋白表达。并发现TGFβ1-DC表面RT1B、B7-2、ICAM-1和OX62等分子表达均明显低于对照组,TGFβ1-DC分泌的Th2型细胞因子TGFβ1和IL-10的表达明显高于反义TGFβ1转染对照组,而Th1型细胞因子IL-12的合成则受到一定程度的下调。结论:TGFβ1基因转染可调节大鼠骨髓DC分子表型和细胞因子的分泌,增强DC的免疫耐受性,在器官移植治疗中有应用前景。 张新华 张锦堃 梁春敏 周播江 顾云娣 钟翠平关键词:TGFΒ1基因 树突状细胞 可控性大鼠卵巢癌DC活疫苗的制备及其体外研究 被引量:2 2005年 目的:制备可控性大鼠卵巢癌树突状细胞(DCs)活疫苗并检测其免疫生物活性。方法:从大鼠Fischer344骨髓前体细胞中分离、扩增DCs,与转导有自杀基因Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(HSV1-tk)基因的大鼠卵巢癌细胞株NuTu-19/tk融合制成活疫苗。以流式细胞仪、激光共聚焦显微镜分析此活疫苗的生物学特征;LDH释放法检测其细胞毒活性(CTL);MTT法测定其对丙氧鸟苷(GCV)的反应性。结果:细胞融合率为28.14%,融合细胞呈典型的双阳性表现,高表达表面分子MHC-Ⅱ(OX6)、B7-2、OX62和ICAM-1。CTL结果显示活疫苗组对亲本肿瘤细胞的杀伤活性最强,死疫苗组次之,DCs与NuTu-19/tk混合组最差(P<0.01)。100μg/mlGCV对活疫苗的杀伤率为88.42%。结论:卵巢癌DC融合活疫苗在体外可产生明显的抗肿瘤免疫效应,并可通过自杀基因的杀伤作用将其在体外灭活。将自杀基因系统引入肿瘤活疫苗,为制备有效而安全的肿瘤疫苗提供了新思路。 康玉 徐丛剑 刘惜时 张新华 吴超群 钟翠平 顾健人关键词:卵巢肿瘤 树突状细胞 自杀基因 融合细胞 活疫苗 负载供者凋亡细胞的受者未成熟树突状细胞可延长小鼠移植心脏的存活时间 被引量:14 2004年 目的 探讨吞噬供体凋亡细胞的受者树突状细胞 (DC)的功能及其在诱导同种异体小鼠心脏移植耐受中的作用。方法 应用中波紫外线照射的方法诱导供者脾细胞凋亡 ,并在体外与受者骨髓来源的DC共同培养 ,同时用核因子 κB寡聚脱氧核苷酸诱骗剂 (NF κBODNDecoy)抑制DC的成熟。建立同种异体小鼠心脏异位移植模型 ,移植术前 7d经门静脉给受者输注经上述处理的DC ,观察移植物的存活时间 ,并检测移植物内相关细胞因子基因的表达情况。结果 NF κBODNDecoy可明显抑制DC吞噬凋亡细胞后的成熟 ;经NF κBODNDecoy处理且负载凋亡脾细胞的DC可抑制T淋巴细胞增殖反应 ,且具有供者特异性 ,接受DC门静脉输注的受者 ,移植心脏的平均存活时间明显延长 ,移植心脏内白细胞介素 2及γ干扰素mRNA的水平减低 ,白细胞介素 10mRNA的水平升高 ,而输注仅负载凋亡脾细胞的DC ,移植心脏的平均存活时间未见延长 (P <0 .0 1) ,这种保护作用具有抗原特异性。结论 以NF κBODNDecoy处理的、吞噬同种凋亡细胞的受者未成熟DC可明显延长同种小鼠移植心脏的存活时间。 徐东亮 唐孝达 谭建明 刘永 李博 张新华 钟翠平关键词:凋亡细胞 树突状细胞 小鼠 存活时间 脾细胞 肝再生大鼠血清诱导骨髓干细胞向肝细胞分化的实验研究 被引量:42 2004年 目的 观察肝大部切除大鼠再生血清和肝细胞生长因子(HGF)诱导骨髓干细胞向肝实质细胞分化的作用;探讨骨髓干细胞向肝细胞分化和增殖的体外培养条件和方法,为患者应用自身骨髓细胞修复损伤肝脏提供实验依据。 方法 制作肝大部切除大鼠肝再生动物模型,收集术后24 h血清;分别应用鼠肝再生血清和HGF对大鼠骨髓细胞进行定向诱导分化培养;以免疫组化、RT-PCR和western blot等方法对分化不同阶段细胞进行检测。将分化细胞经尾静脉输入同系大鼠,观察输注细胞在肝、脾内的生长情况。 结果 活体移植分化细胞能定向迁移至肝和脾体外及体内分化细胞在mRNA水平和蛋白质水平均表达白蛋白,并在一定时期内表达甲胎蛋白。 结论 大鼠骨髓干细胞在肝大部切除再生血清或HGF的诱导下能横向分化为肝实质样细胞。 周播江 钟翠平 顾云娣 张新华 梁春敏 吴超群关键词:骨髓干细胞 肝再生 肝大部切除 分化细胞 横向分化