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肾上腺脑白质营养不良蛋白慢病毒载体的构建和表达: 2014年; 目的构建并表达野生型及突变型肾上腺脑白质营养不良蛋白(adrenoleukodystrophy protein,ALDP)的慢病毒载体,探讨ABCD1基因突变对ALDP结构和功能的影响。方法选择ABCD1基因的H283R和P534R两个突变,首先采用生物信息学方法,进行突变致病性及突变体结构稳定性预测;再利用分子克隆技术,将ABCD1基因克隆到pLEX-MCS慢病毒载体,构建野生型慢病毒载体:pLEX-ABCD1,定点诱变构建2个突变型重组载体:pLEX-ABCD1-H283R和pLEXABCD1-P534R,并与其他包装载体共转染293T细胞包装病毒。收集病毒并感染宿主细胞,RT-PCR检测慢病毒感染细胞中野生型与突变型ABCD1 mRNA表达,免疫荧光及蛋白质免疫印迹法分析野生型与突变型ALDP亚细胞定位及表达。结果生物信息学预测显示H283R和P534R为ALD致病性突变;RT-PCR结果显示慢病毒感染细胞中野生型与突变型ABCD1 mRNA均过表达;免疫荧光及蛋白质免疫印迹结果表明,H283R和P534R突变可能导致ALDP突变体表达量下降,但未观察到ALDP定位改变。结论成功构建ABCD1基因慢病毒表达载体,并评估了H283R和P534R突变对ALDP表达及亚细胞定位的影响,为深入研究ALD发病机制提供了实验依据。; 张林富显果林宇翔兰风华王志红; 关键词：ABCD1基因计算生物学慢病毒属

论我国对外资并购的反垄断法律规制: 外资并购作为我国外商直接投资的一种重要方式，近年来呈现出一些新动向，其最大的负面效应在于可能导致垄断，甚至有可能危害到我国的产业安全与经济安全。随着中国加入WTO，我国对外资并购的限制逐渐放开，政府在引导外资并购发挥积极...; 张林; 关键词：外资并购反垄断法律规制域外适用; 文献传递

X-连锁肾上腺-脑白质营养不良患者ABCD1基因突变分析及ALDP突变体的真核表达: X-连锁肾上腺-脑白质营养不良(X-linkedadrenoleukodystrophy,X-ALD)是一种遗传异质性疾病,其疾病基因——ABCD1基因定位于染色体Xq28,编码1个含745个氨基酸残基的蛋白质,称为AB...; 张林; 关键词：ABCD1基因生物信息学真核表达

肾上腺脑白质营养不良家系ABCD1基因突变研究被引量：3: 2014年; 目的分析肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy,ALD)家系的先证者及ALD携带者所孕育胎儿的ABCD1基因突变。方法首先从RNA途径,应用RT-PCR技术,对2010年10月至2012年3月福建医科大学福总临床医学院5个家系先证者或其母亲的ABCD1基因编码区进行序列测定查找突变,再通过基因组DNA途径进行突变验证。产前诊断采用STR位点分析方法排除母体基因组DNA污染后,应用DNA测序或PCR-限制性酶切方法对5个胎儿的羊水基因组DNA进行突变分析。结果在5个家系的先证者或先证者母亲分别发现5个不同位点的ABCD1基因突变,依次为c.796G>A,c.521A>G,c.1523C>T,c.1534G>A,c.1252C>T。产前诊断结果显示:5个胎儿均为男性,胎儿1、2、3、4存在与先证者相同的突变,胎儿5未检测到与先证者5相同的突变。结论 ABCD1基因突变分析是ALD分子诊断及产前分子诊断准确、可靠的方法。; 张林林宇翔兰风华王志红; 关键词：肾上腺脑白质营养不良分子诊断产前分子诊断 ABCD1基因

X-连锁肾上腺-脑白质营养不良女性杂合子的分子生物学研究进展被引量：1: 2013年; X一连锁肾上腺一脑白质营养不良（X—linked adrenoleukodystrophy，X—ALD）是最常见的过氧化物酶体病，其生化特点是极长链饱和脂肪酸（verylong chain fatty acids，VLCFAs），特别是二十六烷酸（C26：0）及二十四烷酸（C24：0）在不同组织和体液中的积累。; 张林兰风华王志红; 关键词：突变脑疾病肾上腺脑白质营养不良杂合子

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张林