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稳定干扰αv整合素表达的HT-29细胞系的建立: 2011年; 目的探讨逆转录病毒介导RNA干扰(RNAi)稳定抑制αv整合素表达的有效性,并建立稳定抑制αv整合素表达的结肠癌HT-29细胞系。方法设计并合成3对针对αv整合素基因的短发夹RNA(shRNA)序列,构建逆转录病毒质粒;脂质体转染逆转录病毒质粒至结肠癌细胞株HT-29;G418筛选,局部消化法挑选阳性克隆;Western blotting检测蛋白表达水平。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示,构建成功的逆转录病毒载体被HindⅢ限制性内切酶切为两个分别长1950bp与5800bp片段。测序结果显示,针对αv整合素基因的3对shRNA序列皆成功插入逆转录病毒质粒;转染逆转录病毒载体的HT-29细胞持续表达绿色荧光蛋白,并对G418具抗性;Western blotting结果显示逆转录病毒介导的shRNA能有效地抑制αv整合素表达。结论逆转录病毒介导的shRNA能够高效、稳定地抑制αv整合素表达,进而可以建立稳定干扰αv整合素表达的结肠癌HT-29细胞系。; 何建明江恒庞学利肖红陈克力胡绍毅黄海辉梁后杰; 关键词：整合素逆转录病毒 RNAI

回生口服液联合盐酸羟考酮缓释片治疗中重度癌痛的疗效观察: 目的：观察回生口服液联合盐酸羟考酮缓释片治疗中重度癌痛患者的临床疗效. 方法：将140例中重度癌痛患者随机分成两组,对照组给予盐酸羟考酮缓释片规范癌痛治疗,观察组在盐酸羟考酮缓释片规范癌痛治疗基础上给予回生口服...; 敬新蓉李青李莉江恒孙薏; 关键词：中重度癌痛中西医结合治疗回生口服液盐酸羟考酮缓释片临床疗效

结肠癌HT-29细胞中PIDD蛋白的表达及其对细胞耐药性的影响被引量：2: 2009年; 目的:以结肠癌HT-29细胞株为载体,研究PIDD(p53-induced protein with a death domain)蛋白在结肠癌耐药中的作用机制。方法:构建并转染PIDD基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段,用Western印迹法检测其干扰效果。通过MTT比色法检测细胞对化疗药物的敏感性,并用凝胶阻滞分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)法检测核因子NF-κB活性的变化。结果:RNA干扰后给予细胞药物刺激,细胞核中PIDD表达下降,核因子NF-κB活性明显降低,细胞耐药性下降。结论:转染siRNA后,HT-29细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的敏感性增加,此作用可能与细胞核PIDD复合体减少、核因子NF-κB活性减低及细胞凋亡增多有关。; 彭晶晶李建军梁后杰边志衡江恒; 关键词：结肠肿瘤肿瘤 RNA干扰

结肠癌细胞促人淋巴管内皮细胞体外成管作用的研究: 2010年; 目的探讨结肠癌细胞对人淋巴管内皮细胞(hLECs)体外成管的影响。方法实验组hLECs采用结肠癌细胞SW480的培养上清液进行培养,对照组hLECs采用单纯内皮细胞培养基进行培养。观察两组hLECs体外成管能力的差异;采用免疫荧光法检测hLECs细胞骨架变化情况和Prox-1蛋白表达;Western blotting检测hLECs中整合素α9的表达水平。结果与对照组比较,实验组hLECs的成管能力更强,培养第7天即形成丰富的网状结构,至第14天形成典型的管状结构。从第6天开始实验组形成的小管数量(2.93±0.56条)即明显多于对照组(1.56±0.26条,P<0.05)。实验组微丝结构完整连续,呈极性排列,细胞有伪足伸出,对照组微丝结构不明显;两组的微管结构无明显差异。实验组Prox-1和整合素α9的表达(37.46±16.73,1.20±0.04)与对照组(20.35±12.58,0.59±0.05)比较均有增加(P<0.05)。结论结肠癌细胞在体外可通过外分泌作用促进hLECs形成管状结构。; 欧娟娟萨日娜江恒梁后杰; 关键词：内皮淋巴管淋巴管生成微丝

羟考酮缓释片联合椎体成形术及放疗治疗多发性骨髓瘤椎体转移性疼痛的临床观察被引量：3: 2018年; 目的:观察盐酸羟考酮缓释片联合椎体成形术及局部放疗治疗多发性骨髓瘤椎体转移性疼痛的临床疗效及对生活质量的影响。方法:盐酸羟考酮缓释片联合椎体成形术及局部放疗组患者16例(研究组),盐酸羟考酮缓释片联合椎体成形术组患者19例(对照组)。所有患者服用盐酸羟考酮缓释片1周后行病变椎体成形术,术后1~2周,同时实验组开始病椎放疗。采用KPS(karnofsky)评分法,对两组患者在椎体成形术前及术后1周,2周,1个月,3个月进行生活质量评价。结果:研究组患者在椎体成形术后1周,2周,NRS评分均明显降低,盐酸羟考酮缓释片用量较前减少(P<0.05)。生活质量也明显改善,差异均有统计学意义(P<0.05)。在术后1个月,3个月的随访中,疼痛继续得到很好的控制。结论:盐酸羟考酮缓释片联合椎体成形术及局部放疗治疗多发性骨髓瘤椎体转移性疼痛患者,可使患者获得持久的止痛效果,提高患者的生活质量。; 李莉张文华代小春江恒敬新蓉罗文平李青廖皓钟国成张明慧席洁琳孙薏; 关键词：盐酸羟考酮缓释片椎体成形术多发性骨髓瘤

超大剂量盐酸羟考酮缓释片与硫酸吗啡缓释片治疗重度癌痛的疗效及安全性比较被引量：50: 2017年; 目的:观察超大剂量盐酸羟考酮缓释片(奥施康定)与硫酸吗啡缓释片(美施康定)治疗重度疼痛的临床疗效及安全性。方法:将重度疼痛的晚期肿瘤患者随机分为盐酸羟考酮缓释片组(奥施康定组)和硫酸吗啡缓释片(美施康定组)组,剔除观察期内(14天)两组患者中奥施康定和美施康定使用未达到超大剂量的患者。共有76例患者纳入本研究,其中奥施康定组33例,美施康定组43例。比较两组患者的止痛疗效、生活质量、不良反应。结果:奥施康定组达到首次疼痛控制稳定时间短于美施康定组,且在观察期间内,奥施康定组爆发痛发生次数以及解救药物使用剂量均少于美施康定组,差异具有统计学意义(P<0.05)。奥施康定组疼痛缓解率87.88%,美施康定组疼痛缓解率83.72%,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。奥施康定组和美施康定组治疗后生活质量较治疗前好转,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者用药后生活质量变化比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗过程中,奥施康定组便秘发生情况低于美施康定组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:奥施康定和美施康定可有效缓解晚期癌症患者的疼痛,改善患者生活质量,具有较好的临床疗效,但盐酸羟考酮缓释片止痛快速、持久、稳定,不良反应发生率低。; 孙薏李莉张明慧敬新蓉钟国成江恒王跃蓉廖皓席洁琳岳伦莉王奎李青; 关键词：重度癌痛盐酸羟考酮缓释片硫酸吗啡缓释片

肺腺癌HOXA10基因启动子甲基化的改变及其临床意义: 2016年; 目的探讨肺腺癌HOXA10基因启动子区甲基化改变情况及其与临床病理特征和预后的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法检测30例肺腺癌标本及其配对癌旁组织标本中HOXA10基因启动子甲基化状态,并分析HOXA10基因甲基化状态与临床病理特征和预后的关系。结果 MSP法检出17例(56.7%)肺腺癌组织HOXA10基因启动子区发生低甲基化改变,其中4例为完全去甲基化改变;而癌旁组织仅有6例(20.0%)HOXA10基因启动子区发生低甲基化改变(P<0.05)。HOXA10低甲基化与肿瘤大小、临床分期及淋巴转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤分化程度无关(P>0.05)。生存分析显示,HOXA10基因低甲基化患者的中位无病生存期为27.0个月,明显低于HOXA10基因甲基化患者的46.0个月(P=0.002)。结论肺腺癌HOXA10基因启动子区低甲基化为频发事件,提示与患者的不良预后有关,可作为判断肺腺癌预后的指标。; 原薇薇江恒谭艳程朋苏晓妹李东罗巧丽张涛; 关键词：肺腺癌 HOXA10 低甲基化

人HCT116结肠癌细胞系中CD133^+结肠癌干细胞分离及鉴定被引量：4: 2009年; 目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+细胞鉴定其体外增殖特性;采用含血清培养基诱导干细胞克隆球分化并采用免疫组化检测CK20表达情况鉴定其分化特性。结果HCT116细胞系中存在CD133+细胞,免疫磁珠能有效的分选CD133+细胞,分选后的阳性含量为91.92%,分选后的阳性细胞具有典型干细胞的体外增殖、分化特性。结论CD133+结肠癌干细胞在体外具有和普通干细胞类似的无限增殖、自我更新和分化能力,同时它们也表达ABCG2等耐药相关蛋白。; 陈克力梁后杰江恒陈建芳裴莉郑晨宏; 关键词：HCT116 结肠癌干细胞 CD133

结肠癌HT29多细胞球的培养及其结构与生物学特性的观察: 2010年; 目的建立结肠癌体外三维细胞培养模型HT29多细胞球,鉴定并检测其基本生物学特性。方法琼脂糖抑制细胞贴壁、水平回旋振荡法培养HT29多细胞球;扫描电镜、HE染色、免疫组化检测多细胞球的组织病理学性质;透射电镜检测细胞超微结构;Cell counting kit-8检测药物敏感性。结果成功培养由细胞相互黏附形成的多层细胞构成的结肠癌多细胞球模型;多细胞球内细胞接触广泛而紧密,可见大量细胞连接;多细胞球局部可见腺腔样结构,细胞角蛋白表达强弱与腺腔样结构有关;多细胞球药物敏感性显性降低,在500μg/L奥沙利铂处理48h条件下,单层细胞生存分数为(9.3±2.0)%,而多细胞球则为(42.9±4.0)%,二者相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立了结肠癌多细胞球模型,此模型是研究体内无血管的微小结肠癌及结肠癌无血管区的较理想模型。; 何建明江恒陈克力黄海辉庞学利梁后杰; 关键词：结肠癌细胞黏附耐药

沉默孕烷X受体增强结肠癌LS174T细胞对奥沙利铂敏感性的影响被引量：5: 2012年; 目的观察沉默孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)表达对结肠癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响,初步探讨其可能机制。方法构建PXR基因的siRNA质粒表达载体,转染结肠癌LS17T细胞,并建立稳定表达细胞,用RT-PCR和Western blot方法检测特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)和多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance-asso-ciate protein 3,MRP3)表达,MTT方法检测奥沙利铂化疗敏感性。结果成功建立PXR敲低细胞克隆PXRi 1#、PXRi 2#;在PXRi 1#和PXRi 2#细胞克隆中,MRP3 mRNA及蛋白表达明显下降,SP1表达也下降;与PXRi control相比,细胞克隆PXRi 1#、PXRi 2#奥沙利铂的IC50值均显著降低[(4.83±0.22)、(4.75±0.19)vs(9.44±0.37),P<0.05]。结论 PXR表达沉默可增强结肠癌LS174T细胞对奥沙利铂化疗敏感性,这可能与PXR沉默后,SP1、MRP3表达下调相关。; 江恒陈健陈克力李建军潘凤梁后杰; 关键词：孕烷X受体结肠肿瘤多药耐药奥沙利铂

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江恒

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