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郭克
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
宁夏医科大学基础医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
周瑜
宁夏医科大学基础医学院
李永玲
宁夏医科大学基础医学院
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宁夏医科大学
作者
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李永玲
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周瑜
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郭克
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中国细胞生物...
年份
1篇
2015
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Egr-1对APP基因表达的调控作用
被引量:5
2015年
该研究构建了含有APP启动子的荧光素酶报告质粒以及缺失突变的报告质粒,将该质粒与Egr-1真核表达载体p CDNA3-Egr-1共转染到HEK293与U87MG细胞中进行荧光素酶活性测定,以确定Egr-1对APP基因表达的调控作用。通过染色质免疫共沉淀实验(chromatin immunoprecipitation assay,Ch IP)和凝胶电泳迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)确定Egr-1蛋白在APP启动子上的结合部位,同时利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA(trichostatin A)和butyrate诱导内源性Egr-1的表达以及Egr-1抑制剂suramin来作用于细胞,通过蛋白免疫印迹分析(Western blot)检测Egr-1对APP蛋白表达的作用。结果显示,Egr-1蛋白在APP基因启动子上5′UTR区域有特异性的结合部位,去除该结合部位则Egr-1失去对APP基因启动子的调控作用,Ch IP和EMSA的结果也证实了该结合位点;通过HDAC抑制剂和suramin干扰内源性Egr-1的表达则显著影响了Egr-1对APP基因表达的调控作用。
马琳
周瑜
李永玲
柴娟
贾中发
郭克
孙涛
崔建奇
关键词:
EGR-1
淀粉样前体蛋白
阿尔茨海默病
基因表达调控
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