陈军
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)稳定剂配方的筛选被引量：6
- 2016年
- 目的筛选出适合冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的热稳定性好、无明胶的稳定剂配方。方法以水分、外观、效价、热稳定性效价为指标,尤其是效价和热稳定性效价,对A、B、C、D、E、F、G等6种稳定剂配方进行系统的优化组合筛选,6种稳定剂配方分别含有蔗糖、乳糖、人血白蛋白、甘氨酸、精氨酸、明胶、尿素、甘露醇、右旋糖苷,其中A为现行疫苗生产配方。运用单因素五元设计法,筛选出最优稳定剂组合。结果方差分析结果显示D组配方对冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的M-ABT结果 13.95,37℃放置4周M-ABT结果 13.05;NIH效价1.94,37℃放置4周NIH效价1.56。结论 D组配方对冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)有较好的保护作用。
- 马超陆俭孙燕陈军刘鹏李守丽于滢张轶
- 关键词：稳定剂
- 无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立被引量：5
- 2016年
- 目的建立无血清培养基(virus production-serum-free medium,VP-SFM)培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株的工艺。方法分别采用VP-SFM和含5%牛血清DMEM于方瓶中培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株,比较无血清培养基培养不同代次Vero细胞间及无血清与含血清培养基培养Vero细胞间制备的狂犬病病毒滴度及效力。将2 g/L微载体cytodex-1加至250 ml spinner flask中,加入Vero细胞,37℃培养3 d,按MOI=0.02接种狂犬病病毒CTN-1V株,检测病毒收获液的病毒滴度及效力,每天显微镜下观察细胞生长情况,计算细胞比生长速率。结果无血清培养基培养不同代次Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度和效力差异无统计学意义(P>0.05);无血清和含血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度差异无统计学意义(P>0.05),但无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒效力明显高于含血清的培养基(P<0.05)。搅拌瓶微载体系统培养Vero细胞制备狂犬病病毒,细胞贴壁均匀,生长良好,收获病毒液的平均病毒滴度为6.50 lg FFU/ml,平均病毒效力为6.77 IU/ml。结论初步建立了微载体系统无血清培养Vero细胞制备狂犬病病毒的工艺,为无血清规模化制备狂犬病疫苗奠定了基础。
- 孙燕张香玲陈军刘鹏马超张生琰李薇
- 关键词：无血清培养基VERO细胞狂犬病病毒
- 浅谈狂犬病毒免疫机制
- 2012年
- 狂犬病毒引起的免疫应答是由多因素参与和多种方式共同作用的结果,不仅涉及病毒中和抗体(virus neutralization antibody,VNAb)的产生和细胞毒性T细胞(CTL)作用,而且细胞因子,免疫分子亦发挥重要作用。
- 陈军李薇
- 关键词：狂犬病毒免疫应答免疫分子
- 响应面法优化MDCK-siat7e细胞培养工艺
- 2017年
- 目的以响应面法优化MDCK-siat7e细胞培养条件。方法以MDCK-siat7e细胞培养的起始氨浓度、乳酸浓度、渗透压和活细胞密度（viablecelldensity，VCD）为因子，以MDCK0siat7e细胞培养的72h细胞比生长率、细胞活率、乳酸比生成率和氨比生成率为响应值，采用全因子实验设计和响应面分析来研究这些因子对M1X；K-siat7e细胞培养的影响。结果在MDCK-siat7e细胞培养过程中，对72h细胞比生长率有显著影响的因子是起始VCD（t=3．43，P〈0．05）；对72h细胞活率有显著影响的因子是起始乳酸浓度（t=4．32，P〈0．05）和氨浓度（f=2．86，P〈0．05）；对72h乳酸比生成率有显著影响的因子是起始乳酸浓度（t=8．92，P〈0．05）、渗透压（t=4．11，P〈0．05）和VCD（t=2．66，P〈0．05），其中乳酸浓度起主要作用；对72h氨比生成率有显著影响的因子是起始氨浓度（t=2．63，P〈0．05）。结论用响应面法优化MDCK-siat7e细胞培养工艺可对该细胞培养过程中的条件控制起指导作用。
- 陈军李朋伟孙燕张生琰孙振鹏马超刘鹏李薇
- 关键词：细胞培养技术响应面法
- 狂犬病病毒4aG株G蛋白基因的克隆及其生物信息学分析
- 2012年
- 目的克隆狂犬病病毒(Rabies virus,RV)4aG株G蛋白基因,并与其他疫苗毒株G蛋白基因序列进行比较,为我国狂犬病疫苗的研制提供理论依据。方法从RV 4aG株中扩增G蛋白基因,并进行序列测定,利用生物信息学软件绘制系统进化树,预测G蛋白功能位点、二级结构和B细胞抗原表位,并与其他疫苗毒株进行比较。结果克隆的4aG株G蛋白基因序列与GenBank中登录的序列一致。进化树分析显示,4aG株与CVS株的进化关系较远;4aG、4aGV18、CVS、PV及RC-HL毒株跨膜区域在第460～479氨基酸之间,其他毒株在459～478氨基酸之间;PV株有5个糖基化位点,RV-97株有3个糖基化位点,其他毒株均有4个糖基化位点;G蛋白抗原表位位于氨基酸100～300及480～520之间;不同毒株G蛋白抗原位点区域有所不同,与CVS株比较,PV株抗原表位与其最为接近,4aG、4aGV18、CTN-1-31及Flury-HEP株与其抗原表位较为接近。结论4aG株G蛋白功能位点和抗原表位与CVS株相差较大,但其在Vero细胞上传代稳定,可用于制备Vero细胞纯化疫苗。
- 李建强孙燕孙振鹏范秀娟陈军李薇
- 关键词：狂犬病病毒G蛋白基因克隆生物信息学
