冯年花
- 作品数:11 被引量:27H指数:4
- 供职机构:首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 昆明鼠胚胎干细胞系的建立及其特性(英文)被引量:1
- 2009年
- 背景:到目前为止,国际上通用的动物胚胎干细胞细胞系大多是从129品系和C57BL/6系小鼠中获得的,少部分来自BALB/C系,来自于中国昆明鼠则鲜有报道。目的:分离培养昆明系小鼠胚胎干细胞,并对其生物学特性进行初步鉴定。设计、时间及地点:以细胞为对象的观察性实验,于2006-05/2007-06在南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所完成。材料:昆明小鼠3.5d胚龄的囊胚。方法:自昆明系小鼠3.5d胚龄的囊胚分离内细胞团细胞,接种于小鼠原代胚胎成纤维细胞饲养层上,对分离的内细胞团细胞进行扩增、传代培养。主要观察指标:观察胚胎干细胞集落的生长情况,对其碱性磷酸酶表达进行染色分析,采用免疫荧光法检测其阶段特异性胚胎抗原1表达,以反转录-聚合酶链反应检测其特异性表达因子c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2的基因表达情况,并对其体内外分化能力对进行鉴定分析。结果:分离、培养自内细胞团的细胞呈典型的胚胎干细胞集落样生长,碱性磷酸酶染色及阶段特异性胚胎抗原1荧光染色阳性,细胞表达c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2等基因,细胞在体内外均能分化成来源于不同胚层的多种细胞类型。结论:成功从昆明小鼠囊胚中分离并建立一株胚胎干细胞系,其生物学特性与其他胚胎干细胞株相符。
- 谢安汪泱娄远蕾张立行冯年花
- 关键词:胚胎干细胞昆明小鼠细胞培养
- 人胚胎干细胞向间充质干细胞分化的低血清诱导法的建立
- 2016年
- 目的建立人胚胎干细胞向间充质干细胞分化的低血清诱导方法。方法用低血清培养体系培养人胚胎干细胞,每3d半量换液,7-10d后消化成单细胞用扩增培养基培养,每3d传代1次。结果人胚胎干细胞呈克隆样增殖,边缘呈锯齿状,表达多能干细胞标志OCT4、SOX2和NANOG。诱导3d后,克隆间隙出现体积较小的成纤维样细胞,增殖能力强,经两次传代后可获得形态一致的长梭形细胞。这些细胞表达间质细胞标志VIMENTIN,细胞均表达CD105、CD90、CD73、CD44和HLA-ABC,不表达CD34、CD45和HLA-DR,且具有成脂和成骨分化能力。结论用低血清诱导法能快速获得较高纯度的人胚胎干细胞源性间充质干细胞。
- 冯年花曲学彬
- 关键词:间充质干细胞胚胎干细胞
- 宫颈癌移植瘤及癌旁组织中NF-κB的活化及其调控的miRNA的表达情况研究
- 目的:通过比较宫颈癌移植瘤小鼠的癌与癌旁组织中miR-15b和miR-16的表达水平及NF-κB信号通路的活化状况,评价NF-κB信号通路及其相关的miR-15b和miR-16在宫颈癌早期诊断中的潜在价值,为临床上宫颈癌...
- 冯年花甘自立林红李勇熊秋迎刘丝荪郭菲
- 关键词:宫颈癌NF-ΚB
- 文献传递
- 人诱导性多能干细胞的培养及鉴定被引量:7
- 2010年
- 目的建立稳定的人诱导性多能干细胞(iPS细胞)培养体系。方法取第3~5代的小鼠胚胎成纤维细胞,丝裂霉素C处理后用作饲养层。人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代。倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态;观察拟胚体形成能力;RT-PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况。结果(1)小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形。细胞增殖旺盛。(2)生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长。克隆呈圆形或椭圆形,边界清晰。克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核/质比高。RT-PCR结果显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体(EB)。结论本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能。
- 冯年花谢安娄远蕾阮琼芳郭菲吴珏邓志锋汪泱
- 关键词:细胞培养饲养层
- 人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的实验研究
- 目的:
诱导性多能干细胞(Induced Pluripotent Stem cells,iPS细胞)是通过成体细胞重编程技术产生的多能干细胞,具有分化为三个胚层细胞的能力,类似于胚胎干细胞。由于iPS细胞可来自自体...
- 冯年花
- 关键词:诱导性多能干细胞神经干细胞细胞分化维甲酸无血清培养基神经系统损伤
- 文献传递
- TNF-α体外诱导rMSC向神经细胞分化的研究被引量:1
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。方法采用密度梯度离心法分离rMSCs,取培养至3~5代的rMSCs以含TNF-α 5ng/ml的培养基培养,镜下观察细胞诱导后形态的变化,采用免疫荧光细胞化学染色法检测神经前体细胞标志物巢蛋白nestin和神经元特异性烯醇化酶在细胞中的表达强度和分布。结果rMSCs经TNF-α诱导6h后基本表现为典型神经样细胞形态,nestin和NSE呈阳性表达。结论TNF-α具有体外诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的作用。
- 娄远蕾邓志锋赖贤良谢安冯年花郭菲汪泱
- 关键词:神经细胞分化
- 人诱导性多能干细胞定向分化为神经干细胞的实验研究被引量:7
- 2010年
- 目的观察人诱导性多能干细胞(iPS细胞)定向分化为神经干细胞(NSCs)的潜能。方法用维甲酸(RA)诱导人iPS细胞向NSCs分化。倒置显微镜下观察iPS细胞的形态变化,RT-PCR检测NANOG、OCT4、SOX2的表达;免疫组织化学方法检测Nestin、SOX2、β-TubulinШ和GFAP的表达。结果 RA诱导后第4天,贴壁的拟胚体出现了早期神经祖细胞特有的神经管样结构并不断增多,细胞表达神经巢蛋白Nestin,而对照组未观察到神经管样结构。神经管样结构内的细胞能分化为β-TubulinШ阳性的神经元,但GFAP阳性的星形胶质细胞少见。结论人iPS细胞具有定向分化为NSCs的潜能,并能模拟神经发育过程。
- 冯年花谢安娄远蕾阮琼芳郭菲汪泱
- 关键词:诱导性多能干细胞神经干细胞维甲酸分化
- 氯化镧抑制Hela细胞中TNF-α诱导的NF-κB信号通路的活化
- 目的:分析氯化镧对NF-κB信号通路中IκB激酶复合物(IKKβ)活化的调控作用。方法:将Hela细胞接种于含10%胎牛血清的RMPI 1640液体培养基中,于5%CO2、37℃恒温培养箱中培养。实验随机分为4组:①TN...
- 冯年花何凤娄远蕾汪泱郭菲
- 关键词:氯化镧IKKΒIΚBΑ
- 文献传递
- 人胚胎干细胞源性间充质干细胞的研究进展被引量:4
- 2015年
- 人胚胎干细胞源性间充质干细胞(human embryonic stem cell derived mesenchymal stem cells,h ESC-MSCs)是由胚胎干细胞诱导分化而来的间充质干细胞,具有成体间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)相似的生物学特性和功能,由于其来源丰富、均一性好,受到广泛关注,是MSCs的一种新的获取途径。其应用避免了胚胎干细胞直接应用而面临的致瘤性问题,是胚胎干细胞应用于疾病治疗的一种新的形式,具有广阔的应用前景。然而,h ESC-MSCs真正运用于临床治疗仍面临较多的问题需要解决。该文就h ESC-MSCs的诱导分化、生物学特性、应用前景及目前尚存在的问题作一综述。
- 冯年花
- 关键词:间充质干细胞人胚胎干细胞
- 诱导性多能干细胞体外定向诱导分化的研究进展
- 2009年
- 胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究已成为发育生物学和细胞移植治疗学的研究热点,但伦理及免疫排斥问题一直阻碍胚胎干细胞(ES)的研究和临床应用。近两年,科学家成功地从多种成体细胞获得了诱导性多能干细胞(iPS细胞),iPS细胞具有和胚胎干细胞相似的特性,由于其可来自自体成体细胞,因而可避开伦理及免疫排斥问题,是胚胎干细胞良好的替代材料,具有广阔的应用前景。iPS只有诱导分化为成熟的功能细胞才能用于疾病的治疗。主要介绍iPS细胞向成熟细胞分化的研究现状及目前存在的一些问题。
- 冯年花汪泱
- 关键词:诱导性多能干细胞胚胎干细胞分化