李夏
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：大连工业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 集胞藻PCC 6803蛋白SpPhaB和SpPhaE的原核表达及结晶条件筛选被引量：3
- 2015年
- 【目的】克隆蓝藻集胞藻PCC 6803 SpPhaB和SpPhaE的编码基因并构建原核表达载体,优化培养条件以提高在大肠杆菌中可溶蛋白的表达量,筛选SpPhaB结晶条件,为PHB家族蛋白的结构与功能研究提供基础。【方法】克隆集胞藻PCC 6803 PHB合成途径的pha B、pha E基因,将pha B、pha E基因构建到表达载体p ET28a中,优化IPTG浓度、诱导温度和诱导时间,提高在大肠杆菌BL21(DE3)中SpPhaB和SpPhaE可溶蛋白的表达产量,经Ni柱亲和层析纯化分别获得His-SpPhaB和His-SpPhaE蛋白,进一步筛选SpPhaB结晶条件。【结果】构建了p ET28a-SpPhaB和p ET28a-SpPhaE表达载体;优化获得SpPhaB可溶蛋白的最佳表达条件为:诱导温度37°C、转速220 r/min、IPTG浓度0.1 mmol/L、诱导时间7 h;SpPhaE的可溶性蛋白最佳表达条件为:诱导温度25°C、转速220 r/min、IPTG浓度0.5 mmol/L、诱导时间7 h,并获得了SpPhaB的结晶条件。【结论】构建了具有高效表达可溶的集胞藻PCC 6803 SpPhaB和SpPhaE的原核表达系统,并筛选优化了SpPhaB的结晶条件,为研究SpPhaB蛋白的结构及功能奠定了基础。
- 李夏刘颖慧刘志文薛松
- 关键词：聚羟基脂肪酸酯晶体
- 蓝藻集胞藻PCC6803 PHA家族蛋白的结构初探
- 聚羟基脂肪酸酯PHA(Polyhydroxyalkanoate)是存在于多种微生物及其他生物体细胞内的一种聚酯内含物。由于具有生物降解性、生物相容性、高结晶特性等优点,PHA也是一种环境友好型热塑性塑料,甚至可以被自然界...
- 李夏
- 关键词：聚羟基脂肪酸酯晶体
- 文献传递
