刘颖慧 作品数:4 被引量:4 H指数:1 供职机构: 中国科学院大连化学物理研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
集胞藻PCC 6803蛋白SpPhaB和SpPhaE的原核表达及结晶条件筛选 被引量:3 2015年 【目的】克隆蓝藻集胞藻PCC 6803 SpPhaB和SpPhaE的编码基因并构建原核表达载体,优化培养条件以提高在大肠杆菌中可溶蛋白的表达量,筛选SpPhaB结晶条件,为PHB家族蛋白的结构与功能研究提供基础。【方法】克隆集胞藻PCC 6803 PHB合成途径的pha B、pha E基因,将pha B、pha E基因构建到表达载体p ET28a中,优化IPTG浓度、诱导温度和诱导时间,提高在大肠杆菌BL21(DE3)中SpPhaB和SpPhaE可溶蛋白的表达产量,经Ni柱亲和层析纯化分别获得His-SpPhaB和His-SpPhaE蛋白,进一步筛选SpPhaB结晶条件。【结果】构建了p ET28a-SpPhaB和p ET28a-SpPhaE表达载体;优化获得SpPhaB可溶蛋白的最佳表达条件为:诱导温度37°C、转速220 r/min、IPTG浓度0.1 mmol/L、诱导时间7 h;SpPhaE的可溶性蛋白最佳表达条件为:诱导温度25°C、转速220 r/min、IPTG浓度0.5 mmol/L、诱导时间7 h,并获得了SpPhaB的结晶条件。【结论】构建了具有高效表达可溶的集胞藻PCC 6803 SpPhaB和SpPhaE的原核表达系统,并筛选优化了SpPhaB的结晶条件,为研究SpPhaB蛋白的结构及功能奠定了基础。 李夏 刘颖慧 刘志文 薛松关键词:聚羟基脂肪酸酯 晶体 基于淀粉磷酸化酶的微藻淀粉合成研究 微藻淀粉可以作为粮食作物的替代,在水产养殖、农业、食品、能源等领域有潜在的应用.目前公认的植物和微藻淀粉合成方式是基于ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)的合成途径,淀粉磷酸化酶(SP)被认为主要在淀粉的磷酸化降解中... 姚长洪 姜君鹏 曹旭鹏 刘颖慧 薛松关键词:淀粉 类火星环境的低气压和水对发状念珠藻复苏的影响 2018年 为了考察发状念珠藻(发菜)在类火星表面半开放体系复苏的可行性,搭建了在线监测模拟类火星环境密闭体系内发菜复苏时放氧速率的试验装置,并考察了水对发菜光合放氧复苏的影响。结果显示,在气压超过5℃、15℃、25℃所对应的水饱和蒸气压时,发菜放氧最高速率分别为5、7和10μmol O_2·h^(-1)·g^(-1)(DW),分别是发菜最大放氧速率的1%、2%和3%;而在气压低于相应的水饱和蒸气压时,发菜放氧平均速率分别下降为1、2和3μmol O_2·h^(-1)·g^(-1)(DW),且随着反应时间的延长,发菜在5℃放氧速率下降为0;然而,在5℃,气压为1.7~1.9 k Pa,加入10 mL BG11时,发菜放氧速率最高上调至12μmol O_2·h^(-1)·g^(-1)(DW)。以上结果显示,水对发菜在类火星表面半开放体系复苏的影响大于气压。 褚亚东 刘颖慧 陆洪斌 曹旭鹏 薛松关键词:发菜 低气压 放氧 极端低气压处理后低温高温交替对发状念珠藻的光合生理活性的影响 被引量:1 2017年 为考察发状念珠藻在类地行星环境中生存的可行性,搭建了模拟类地行星环境的极端低气压实验装置,并研究极端低气压与低温-高温交替作用对发状念珠藻光合生理活性的影响。结果显示,在气体组成为CO_2和N_2(体积比为95∶5)的氛围中,在-20℃、100 Pa、600 Pa和1200 Pa气压下,分别处理发菜4天、7天、15天、30天和60天,发菜的呼吸和光合放氧速率与未处理样品没有差别。此外,不同气压下,-20℃到25℃交替处理发菜10天、20天和30天,发菜的光合及呼吸速率与正常相比也没有差异。以上结果表明,发菜能够生存在极端低气压下的低温-高温交替环境。通过分析样品的脂肪酸组成和游离脯氨酸含量发现,处理后样品的游离脯氨酸含量升高,脂肪酸组成也发生了相应的变化,这些变化是维持发菜耐受极端低气压和低温-高温交替的物质基础。 刘颖慧 褚亚东 陆洪斌 曹旭鹏 薛松关键词:发菜 低气压 脯氨酸