王磊 作品数:14 被引量:58 H指数:4 供职机构: 江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省科技攻关计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 化学工程 轻工技术与工程 生物学 农业科学 更多>>
近平滑假丝酵母(R)-羰基还原酶在大肠杆菌中的外泌表达及高效转化(R)-苯基乙二醇 2014年 克隆了近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)(R)-羰基还原酶基因rcr,构建胞外表达工程茵Escherichia coli BL21(DE3)/pET20b-rcr,实现了(R)-羰基还原酶在大肠杆菌中高效外泌表达,周质空间和发酵液酶的比活力分别达0.68 U/mg和0.26 U/mg,与大肠杆菌的胞内体系重组酶相比,酶的比活力提高了近两倍。为了更好地促进该重组酶的外分泌于大肠杆菌细胞外,通过添加温和型化学渗透剂甘氨酸,改善细胞壁的透性,(R)-羰基还原酶的活力提高至1.99 U,与添加甘氨酸前相比,酶活力提高了12.4倍,比活提高了4.3倍。浓缩后的发酵液催化2-羟基苯乙酮,产生(R)-苯基乙二醇,产率为88.1%,e.e.值为93.9%。与胞内重组酶相比,产率和光学纯度分别提高了44.4%和15.9%。本研究通过构建(R)-羰基还原酶的大肠杆菌分泌表达体系,大幅度提高了(R)-羰基还原酶的比活和生物转化手性醇的效率。 王磊 张荣珍 徐岩 范文来 李尧慧 梁宏博关键词:分泌表达 甘氨酸 大肠杆菌 近平滑假丝酵母 基于β-乳球蛋白配体结合特性的活性成分包埋和保护研究现状 被引量:3 2015年 虽然营养活性成分具有调节生理机能的功能,但环境敏感性和低溶解度限制了许多活性成分在功能食品、药品和化妆品开发中的应用。可食用载体体系的设计和研发提供了克服这些限制的可能性。阐明载体物质和活性成分间作用机制,是设计和制备非乳状液型载体体系的关键。食品蛋白由于具有高营养价值和多种功能特性,因此被广泛应用于制备载体体系。β-乳球蛋白是牛乳中主要乳清蛋白,具有多个配体结合位点,可结合脂肪酸、维生素、磷脂、多酚类化合物等多种物质。β-乳球蛋白也可同时结合叶酸、白藜芦醇和维生素E,生成蛋白质-多配体复合物。本文概述了β-乳球蛋白与不同营养活性成分间相互作用,以及生成复合物对活性成分的保护作用,讨论了天然β-乳球蛋白作为营养活性成分载体的优、缺点以及开发基于此蛋白的多活性成分载体的可能性。 王磊 程昊 倪莹宙 梁丽关键词:Β-乳球蛋白 活性成分 钝顶螺旋藻固定模拟烟道气中的CO_2 2012年 研究了钝顶螺旋藻对模拟烟道气中CO2的固定性能,及其对NOx和SOx水溶形态亚硝态氮、亚硫酸氢根的耐受性。结果显示:随CO2浓度的增加,藻细胞达到最大比生长速率的时间缩短,CO2浓度为15%时藻细胞比生长速率达到最大的时间最短,生物量最终达到最大值4.1 g/L;CO2浓度为15%时藻细胞的固碳率为12.34 mg/(L·h)。研究发现,钝顶螺旋藻能够耐受浓度小于10 mmol/L的亚硝态氮,可将其作为钝顶螺旋藻生长的唯一氮源,但藻生长的延迟期增长。钝顶螺旋藻能够耐受8 mmol/L的亚硫酸氢盐,可将其作为生长的唯一硫源,藻细胞6 d后开始快速增长。 王磊 任洪艳 缪恒锋 阮文权关键词:固碳 CO2浓度 烟道气 钝顶螺旋藻 亚硝态氮 氮源NH_4Cl浓度对粪产碱杆菌发酵生产热凝胶的影响 被引量:16 2005年 研究了利用粪产碱杆菌 (Alcaligenesfaecalis)发酵生产热凝胶的发酵条件 ,氮源是菌体生长的限制性底物 ,单纯地提高初始底物 (氮源 )浓度并不一定能促进细菌的生长和产物的合成。在分批发酵过程中 ,底物消耗导致培养环境pH的改变也是影响细菌进一步生长和产物合成的重要因素。通过增加培养基中初始氯化铵的浓度并同时控制发酵过程的pH条件 ,得到了较高的菌体浓度 ,热凝胶的合成水平也得到了显著提高。当培养基中NH4 Cl浓度提高到 3 6g L时 ,菌体浓度达到 7 2g L ,热凝胶合成的产量可达 30 5g L ,比原来NH4 Cl浓度为 1 1g L时提高了 5 1 7%。提高菌体浓度意味着需要提高溶氧水平来满足细菌的生长和代谢。初始氮源NH4 Cl浓度的增加虽然能使菌体浓度得到提高 ,但发酵过程对溶氧的需求也相应增加 ,需要提高搅拌转速和通风以增加供氧水平。但高搅拌速率产生的高剪切力对热凝胶的凝胶性能将产生破坏作用 ,因此在发酵过程中需要综合考虑细菌培养密度对合成热凝胶产量和质量的影响。 孙永生 王磊 詹晓北 郑志永 陈远志关键词:粪产碱杆菌 氯化铵 NTG对E.coli突变株聚唾液酸产量的影响 被引量:3 2002年 在不同的 pH条件下 ,用NTG连续处理E .coli,得到突变菌株JYⅡ 74 ;摇瓶培养 ,发酵液中聚唾液酸产量达 2 80 0mg/L ,比出发菌株提高了 130 0mg/L ,提高幅度为 72 .5 % ,且生产能力稳定 .提取发酵液中的聚唾液酸 ,红外光谱鉴定其纯度 ,13C核磁共振图谱表明 ,该多糖是一种α 2 ,8糖苷键连接的唾液酸同聚物 . 詹晓北 于军华 吴剑荣 朱莉 仇英海 王磊关键词:NTG E.COLI 聚唾液酸 突变菌株 物理诱变 酸雨胁迫对大豆萌发种子糖代谢影响初探 被引量:3 2010年 为探索酸雨影响大豆种子萌发机理,采用模拟酸雨处理大豆种子,研究酸雨对大豆萌发种子糖代谢的影响。结果表明:大豆种子的可溶性糖、还原性糖、蔗糖及淀粉含量,α-淀粉酶和淀粉酶活性均在pH2.0酸雨胁迫下受到抑制而降至最低,4种碳水化合物含量随酸雨胁迫强度的减弱呈上升趋势,α-淀粉酶对酸雨胁迫的敏感性低于淀粉酶,大豆萌发种子糖代谢对酸雨胁迫有较强适应。 王磊 周青关键词:酸雨胁迫 大豆种子 萌发 糖代谢 pH控制对热凝胶发酵的影响 被引量:11 2002年 A two-stage pH control method was employed in batch fermentation of curdlan by Alcaligenes faecalis WX-C12 where cell-growth stage was constantly controlled at pH 7.0 and stationary stage was controlled at a constant pH as well. The influence of pH control on the curdlan production was investigated. The optimal pH control of batch process for curdlan production was obtained when cell-growth stage was controlled at pH 7.0 and stationary stage was constantly controlled at pH 5.6. Production and productivity of curdlan, Q p and Y P/ S reached 28.19 g/L, 291 mg/(L·h), 132.27 mg/(L·h·g) and 0.659, an improvement of 20.4 %, 38.1 %,38.1 % and 29.5 % compared to a pH uncontrolled operation respectively. 王磊 詹晓北 朱一晖 李珍雨 杨烨关键词:PH控制 热凝胶 发酵 重组大肠杆菌生产L-色氨酸发酵条件优化 被引量:4 2012年 为了提高重组大肠杆菌FB-04/pSV-04发酵生产L-色氨酸的产量,减少代谢副产物乙酸的生成,考察了比生长速率和无机盐对重组大肠杆菌发酵生产L-色氨酸的影响。在确定了合适的比生长速率和无机盐浓度之后,乙酸积累很少,L-色氨酸的产量为53.4 g/L,比优化前提高了141.6%。经30 L发酵罐初步放大,L-色氨酸的产量达53.6 g/L,发酵结果稳定,具有工业化应用前景。 邹纯 陈晟 赵志军 王磊 罗锋 吴丹 陈坚 吴敬关键词:比生长速率 无机盐 L-色氨酸 乙酸 乳清分离蛋白-维生素E乳状液的金属离子依赖性 本文选择Ca2+、Fe2+和Fe3+为金属离子模型,研究了金属离子种类和浓度对乳清分离蛋白稳定的水包油(O/W)型乳状液结构以及维生素E包埋和保护的影响。结果 表明,金属离子诱导WPI乳状液聚集,增加了WPI乳状液的界面... 方正 王磊 岳春 范祺 梁丽关键词:乳状液 维生素E 包埋 金属离子 稳定性 一株粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)产热凝胶的发酵条件 被引量:13 2001年 通过对一株粪产碱杆菌WX C12 (Alcaligenesfaecalis)的摇瓶发酵研究 ,确定了其最佳发酵培养基组成及最适摇瓶发酵工艺条件 .摇瓶实验确定的最佳培养基组成为 ( g/L) :葡萄糖 50 ,NH4 Cl 1.0 7,KH2 PO4 2 .72 ,K2 HPO4 1.71,MgSO4 ·7H2 O 0 .4 9,酵母膏 1,少量无机盐溶液 .最佳工艺条件为 :初始 pH 7.0 ,装液量为 60mL/ 2 50mL摇瓶 ,摇床转速为 2 2 0r/min ,温度为 30℃ .15L自动机械搅拌罐放大试验结果表明 ,在不改变操作参数的情况下 ,经 60h发酵 ,热凝胶产量可达2 .2 % ,转化率超过 50 % 詹晓北 韩杰 李珍雨 朱莉 王磊 朱一晖关键词:热凝胶 摇瓶发酵