张欢欢 作品数:25 被引量:116 H指数:5 供职机构: 浙江省医学科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省中医药科技计划项目 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
靶向SCNN1A的肿瘤治疗药物及应用 本发明涉及靶向SCNN1A的肿瘤治疗药物及应用,属于药物技术领域。本发明第一方面提出一类有效治疗肿瘤的药物,该药物能够靶向分子SCNN1A,本发明第二方面提出了SCNN1A基因药物和/或SCNN1A激动剂在肿瘤治疗中的应... 余陈欢 张欢欢 方杰 马月 陈勤 应华忠文献传递 橙黄胡椒酰胺酯对脂多糖诱导人肺泡上皮细胞A549凋亡的抑制作用 2017年 目的探讨橙黄胡椒酰胺酯(AA)对脂多糖(LPS)诱导人肺泡上皮细胞A549凋亡的抑制作用及其转录组学调控机制。方法采用MTT法检测经LPS及AA处理后A549细胞的增殖情况。采用流式细胞技术检测细胞凋亡率。采用RNA-seq技术筛选AA处理前后A549细胞的差异表达基因,并将得到的差异表达基因进行GO功能富集以及KEGG通路分析。结果10μg/mLLPS可诱导A549细胞发生明显凋亡,凋亡率为(51.7±3.2)%,与正常组凋亡率[(4.8±0.2)%]相比差异有统计学意义(t=0.000,P〈0.05);给予15-60μg/mLAA干预后,可明显抑制LPS诱导的细胞凋亡,并呈一定的浓度依赖性。通过比较分析,共筛选出差异表达基因76个,其中显著下调的基因为9个,显著上调的基因为67个;依据作用通路分类,显著通路(P〈10^-3)的有2个,分别是细胞外基质受体互作通路和肿瘤坏死因子(TNF)信号通路。结论AA可抑制LPS诱导的A549细胞凋亡,其作用机制可能与细胞炎症及黏附等的调控有关。 张宽宽 张欢欢 俞文英 方杰 余陈欢关键词:急性肺损伤 转录组测序 炎症反应 基于高通量测序技术的实验动物沙门氏菌检测方法的建立与评价 被引量:2 2016年 目的建立基于高通量测序技术的实验动物沙门氏菌检测方法,应用于实验动物沙门氏菌的检测。方法提取小鼠粪便DNA样本,分别针对16S r DNA区域、23S r DNA区域、16S^23S r DNA IS、23S^5S r DNA IS、gyr B优选区域设计通用引物,对各个引物进行测试分析,优化扩增条件并建库,利用Illumina高通量测序技术检测区分42个样本中的沙门氏菌,评价该方法的特异性和稳定性。结果筛选发现沙门氏菌的菌种分类优选区域为gyr B基因,gyr B基因引物序列为FP5’-AACCACCGCAATCAGACCTT3’,FP5’-AGCCACGAAACCTTCACYA-3’。对引物进行优化,确定最佳扩增条件及样品上样量并正式建库,通过高通量测序和序列分析能检测出42个样品中极微量的沙门氏菌,检测方法稳定,灵敏度高,检测限可达0~102的cfu。结论本实验利用高通量测序技术,建立了一套完整检测实验动物沙门氏菌的生物体系,能检测出实验动物体内极微量的沙门氏菌,检测方法稳定性好,灵敏度高,可沿用至其他种类病原微生物的检测。 胡毅翔 张欢欢 余陈欢 金晓音 应华忠关键词:沙门氏菌 实验动物 高通量测序 车前草醇提物治疗肾草酸钙结石的作用及其机制 被引量:22 2016年 目的:观察车前草醇提物对大鼠肾草酸钙结石形成的影响,并探讨其初步作用机制。方法:采用1%乙二醇联合2%氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型。收集各组大鼠尿量;采用化学比色法,检测各组大鼠尿中尿草酸(Ox)、镁离子(Mg^(2+))、肌酐(Cr)含量,血清及肾组织中钙离子(Ca^(2+))、BUN、Mg^(2+)、Cr含量;采用荧光实时定量PCR和蛋白印迹法,分别检测各组大鼠肾组织NOX4、bikunin、Nrf2、HO-1、NQO1和γ-GCS mRNA和蛋白表达水平。结果:与模型组相比,车前草醇提物能显著提高大鼠尿量,提高尿液Ox、Mg^(2+)、Ca^(2+)排泄量,降低血清和肾组织中Ca^(2+)、BUN、Mg^(2+)和Cr含量;此外还能降低肾组织NOX4蛋白表达,提高肾组织bikunin、Nrf2、HO-1、NQO1及γ-GCS mRNA和蛋白表达水平。结论:车前草醇提物可通过促进尿液排泄和上调bikunin、Nrf2/ARE通路相关因子表达,抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。 吕昂 范新 苏倩 余陈欢 钟宇森 张欢欢关键词:车前草 肾结石 BIKUNIN 氧化应激 基于CRISPR技术和水动力尾静脉注射建立肝脏特异性敲除小鼠模型的方法 基于CRISPR技术和水动力尾静脉注射建立肝脏特异性敲除小鼠模型的方法,属于生物技术领域。该方法通过水动力尾静脉注射输送CRISPR系统在肝脏特异性表达建立肝脏特异性敲除小鼠模型。本发明不仅可以针对性使用CRISPR/C... 马月 余陈欢 应华忠 张欢欢 方杰 莫丽文献传递 甲型流感病毒感染小鼠肺组织中环状RNA的表达变化及其靶基因功能分析 被引量:3 2016年 目的明确参与甲型流感病毒(IAV)感染小鼠肺组织中环状RNA(circRNA)的表达变化,并分析其靶基因生物学功能。方法采用高通量测序的方法,测定并鉴定了IAV感染组和正常对照组小鼠肺组织中circRNA的表达差异及其靶基因。利用GeneOntology(GO)和KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes(KEGG)软件分析差异表达的circRNA靶基因生物学功能。结果共获得12个显著差异表达的circRNAs(差异倍数〉2),其中circRNA5828表达量显著下调,circRNAl3602和circRNAl3853表达量显著上调。生物信息学软件分析表明,12个circRNA靶基因在生物过程、细胞组成和分子功能三方面均发挥作用,并影响抗原加工提呈、T011样受体、维甲酸诱导基因-I样受体和心肌功能等相关信号通路。结论circRNA可能通过宿主免疫调控参与IAV的感染过程。 谢珲 张欢欢 马月 俞文英 余陈欢关键词:流感病毒A型 宿主免疫 EB病毒微RNAs在结肠癌中的差异表达及其靶基因的功能预测 被引量:2 2015年 目的筛选结肠癌样本中差异表达的EB病毒微RNAs(microRNAs),并对其靶基因进行功能预测分析。方法采用Exiqon LNATM microRNA芯片分析结肠癌组织和癌旁组织之间差异表达的内源microRNAs和EB病毒microRNAs。以人类mRNA为靶标,采用3种方法预测EB病毒microRNAs的靶基因,并通过GeneOntology分析与分析预测靶基因的生物学功能。结果芯片分析得到3个相对于癌旁组织和结肠癌组织表达显著下调的EB病毒microRNAs,生物信息学分析预测其靶基因有329个,其中48个(14.6%)靶基因参与细胞膜组成,86个(26.1%)靶基因在离子结合方面发挥功能,并影响代谢通路、钙离子信号转导、Wnt信号、T细胞受体等多个信号通路。结论筛选得到3个结肠癌异常表达的EB病毒microRNAs,其靶基因参与信号传导和物质代谢路径,可能影响结肠癌发生发展。 张欢欢 马月 胡毅翔 余陈欢 应华忠关键词:微RNAS EB病毒 结肠肿瘤 芯片分析 一种植物纳米微粒复合物及其制备方法和应用 一种植物纳米微粒复合物及其制备方法和应用,属于药物技术领域。植物纳米微粒复合物通过以下工艺步骤制备得到:取新鲜药用植物,以PBS缓冲溶液为介质,通过将新鲜植物块根、根茎高速匀浆,梯度高速离心,分离制备得到植物纳米微粒复合... 余陈欢 俞文英 张欢欢 应华忠文献传递 一种特异性靶向FOXO1基因的CRISPR-Cas纳米载药系统及其应用 一种特异性靶向FOXO1基因的CRISPR‑Cas纳米载药系统及其应用,属于基因工程及生物医药技术领域。本发明一方面提供了一种特异性靶向FOXO1基因的CRISPR‑Cas纳米载药系统,另一方面提供了该系统在制备用于治疗... 王志远 张欢欢 余陈欢 俞文英 方杰 谢珲 钟宇森 应华忠文献传递 中药化学成分库中结肠癌BRAF^(V600E)抑制剂的筛选 被引量:1 2019年 目的筛选能抑制BRAF^(V600E) CT26细胞株增殖的中药单体化合物。方法通过慢病毒载体感染,构建BRAF^(V600E)稳定表达的CT26细胞稳转株。MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,蛋白印迹检测MEK/ERK信号通路蛋白表达。Discovery Studio筛选BRAF^(V600E)高亲和中药单体化合物,并用MTT验证化合物抑制细胞增殖效果。结果与野生型CT26细胞相比,BRAF^(V600E) CT26细胞的增殖和迁移能力明显增强,MEK/ERK通路被进一步激活。芦荟素(aloin)、安格洛苷C(angoroside C)、杯苋甾酮(cyasterone)对BRAFV600E CT26细胞的抑制效果优于野生型CT26细胞(P <0. 05),并能明显降低BRAFV600E的蛋白表达。结论芦荟素、安格洛苷C、杯苋甾酮可能是结肠癌BRAFV600E突变的天然抑制剂。 张欢欢 方杰 毛诗莹 杨扬 谢珲 余陈欢关键词:抑制剂