刘安军
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：济南军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠子宫内胚胎电转技术方法的改良被引量：1
- 2018年
- 目的优化小鼠子宫内胚胎电转技术,用于检测胎鼠大脑新生神经元的迁移和分化特征。方法通过选择异氟烷气体麻醉方式,改进毛细玻璃针的制备方法,减少手术中胚胎的暴露时间,优化电转参数等,对小鼠子宫内胚胎电转技术进行一系列优化。采用优化的子宫内胚胎电转技术给6只怀孕16.5 d的孕鼠进行了手术,共电转胚胎42只。结果电转后孕鼠和胚胎的存活率达到100%,其中大脑表达外源基因的胎鼠占85%±3%。结论优化的小鼠子宫内胚胎电转技术可以获得令人满意的胎鼠存活率和基因电转效率。
- 杨小薇刘安军刘安军王志彬章卫平吕建新吕建新
- 关键词：大脑基因发育小鼠
- 电穿孔法介导siRNA高效转染小鼠原代软骨细胞
- 2015年
- 目的建立小鼠原代软骨细胞高效电转si RNA的方法。方法常规分离得到的小鼠原代软骨细胞继续用链丝菌蛋白酶消化3h,然后应用高效电转缓冲液和优化的电转参数转染p CMV-EGFP表达质粒或si RNA,用台盼蓝检测细胞存活率;转染后48h分析转染效率和si RNA靶分子的m RNA和蛋白表达水平。结果电穿孔后原代软骨细胞的存活率>80%,质粒的转染效率达到37.3%±5.2%;si RNA靶分子的m RNA和蛋白表达水平分别下调了75%和66%。结论成功建立了通过电穿孔介导si RNA转染小鼠原代软骨细胞的方法,达到了很好的基因沉默效果且保持了较高的细胞存活率。
- 刘安军麻献华杨瑞高琳陈李斌佶章卫平谢志芳
- 关键词：RNA干扰SIRNA电穿孔
- 优化整体原位杂交方法检测基因在幼鼠大脑中的表达
- 2016年
- 目的优化整体原位杂交方法,用于检测基因在幼鼠大脑中的时空表达分布。方法通过摸索最佳蛋白酶K的消化时间,改良杂交缓冲液成分,并延长杂交时间和漂洗时间,对整体原位杂交方法进行优化,并用优化的方法检测了Cdh6、Bhlhb5和Lmo4 mRNA在出生后7天的小鼠大脑中的整体表达分布。结果采用优化的整体原位杂交方法成功地检测了3种mRNA在幼鼠全脑的区域性表达特征,特异性杂交信号强,非特异性背景低。结论成功优化了幼鼠全脑原位杂交方法,为开展后续的研究打下基础。
- 刘安军麻献华杨瑞章卫平谢志芳
- 关键词：整体原位杂交小鼠大脑基因表达
