耿骥
- 作品数:6 被引量:29H指数:3
- 供职机构:江苏大学药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 异鼠李素诱导HCT116细胞自噬被引量:2
- 2015年
- 目的研究中华补血草[Limonium sinense(Girard)Kuntz]中主要抗癌活性成分之一异鼠李素诱导人结直肠癌(HCT116)细胞自噬的机理。方法采用四唑盐比色法(MTT)检测异鼠李素对HCT116细胞的抑制作用,单丹尸磺酰胺(MDC)染色法检测自噬小泡的形成,蛋白印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3的表达情况。结果异鼠李素明显抑制HCT116细胞的增殖,且呈剂量依赖性效应。异鼠李素处理24 h后,自噬小泡形成增多,LC3蛋白表达增强。3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理能够明显降低异鼠李素对肿瘤细胞的抑制作用。结论实验结果显示中华补血草中的异鼠李素可以诱导HCT116细胞发生自噬,导致细胞死亡。
- 刘佳郭文洁耿骥谈德斐汤新慧高静
- 关键词:中华补血草异鼠李素HCT116细胞细胞自噬
- 积雪草酸对实验性胆汁淤积型肝损伤的影响被引量:3
- 2017年
- 目的:研究积雪草酸改善胆管结扎小鼠肝纤维化的作用及其机制。方法:在体实验,小鼠麻醉后打开腹腔,用缝合线结扎胆总管,建立淤胆型肝损伤小鼠模型。手术后将C57小鼠随机分为假手术组、模型组、积雪草酸15 mg/kg组和积雪草酸30 mg/kg组。假手术组和模型组给予0.5%的羧甲基纤维素钠(CMC-Na),其余两组给予0.5%CMC-Na稀释的积雪草酸,各组均连续口服灌胃5 d。末次给药后空腹12 h,眼眶采血检测天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)。处死小鼠,取肝脏及脾脏称重并计算肝脏指数、脾脏指数;将肝脏组织切片进行HE染色、Masson染色和TUNEL染色;采用实时荧光定量PCR检测肝组织炎症因子基因水平,包括前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2),IL-6,TNF-α和趋化因子配体3(CCL3);蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。细胞实验采用甘氨鹅脱氧胆酸钠诱导人肝HL-7702细胞损伤,分别加入0.1、0.3、1和3μmol/L积雪草酸,MTT法检测细胞存活率,AnnexinⅤ/PI流式细胞术检测细胞凋亡。结果:积雪草酸给药后的小鼠血清AST、ALT水平明显低于模型组;显微镜下观察,给药组肝组织胶原纤维和细胞凋亡明显减少;炎症因子基因水平降低,Bax蛋白表达水平降低,Caspase3活化减少,Bcl2表达水平增加。细胞实验显示,低浓度积雪草酸能够促进HL-7702细胞增殖,抑制凋亡。结论:积雪草酸通过抑制肝细胞凋亡,减轻胆管结扎模型小鼠肝纤维化,同时能缓解炎症,改善肝损伤。
- 周炳杰赵梦蝶耿骥郭文洁高静
- 关键词:积雪草酸胆管结扎肝纤维化凋亡
- 积雪草酸对结肠癌HCT116细胞增殖及自噬水平的影响被引量:10
- 2015年
- 目的:观察积雪草酸对结肠癌HCT116细胞增殖和自噬水平的影响。方法:用10、30、60、90μmol/L的积雪草酸作用于结肠癌HCT116细胞24、48 h,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞存活率;用MDC自噬特异性荧光染料观察自噬囊泡的形成情况;蛋白质印迹法检测30、60、90μmol/L的积雪草酸作用12 h和90μmol/L积雪草酸作用4、8、12 h的细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62、p-m TOR、p-4EBP1的表达。结果:积雪草酸90μmol/L对结肠癌HCT116细胞有明显抑制作用;30、60、90μmol/L积雪草酸均可以诱导结肠癌细胞发生自噬,90μmol/L积雪草酸作用4、8、12 h,自噬蛋白LC3-Ⅱ生成明显增加;90μmol/L积雪草酸与氯喹5μmol/L共同作用于癌细胞12 h,能促进自噬潮的产生;积雪草酸可抑制p-m TOR、p-4EBP1的表达。结论:积雪草酸能明显抑制结肠癌HCT116细胞的增殖,并呈时间、剂量依赖性地抑制m TOR-4EBP1通路来诱导自噬潮的产生。
- 耿骥郭文洁刘佳谈德斐Daniel Boison高静
- 关键词:积雪草酸结肠癌细胞自噬氯喹
- 积雪草酸对TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖的抑制作用被引量:4
- 2018年
- 目的探讨积雪草酸对TNF-α诱导的人角化细胞系HaCaT增殖的影响及其可能机制。方法分别通过MTT实验和PI染色流式细胞术检测不同浓度TNF-α对体外HaCaT细胞增殖能力和细胞周期的影响。采用免疫荧光染色法检测不同浓度积雪草酸对TNF-α诱导HaCaT细胞NF-κB核转位的影响。通过Western印迹法检测NF-κB信号通路中p-NF-κB、NF-κB的表达水平。结果 TNF-α诱导的HaCaT增殖实验结果显示,与正常对照组相比,模型组中细胞存活率明显升高(P<0.01),S期细胞比例显著升高(P<0.05),G2期细胞比例显著降低(P<0.05),p-NF-κB表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,10、25和50μmol/L积雪草酸组细胞存活率显著下降(均为P<0.05),10和40μmol/L积雪草酸组G2期细胞比例显著升高(P<0.05),pNF-κB表达显著降低(P<0.05)。结论积雪草酸可能通过抑制NF-κB信号通路来抑制角质形成细胞的增殖,可以作为治疗银屑病的潜在药物。
- 黄涛周炳杰耿骥丁红群高静
- 关键词:积雪草酸银屑病肿瘤坏死因子-Α
- 利莫那班衍生物对高脂肥胖模型小鼠的减肥作用被引量:3
- 2016年
- 目的:观察利莫那班衍生物ZH-101-S对高脂饲料饲喂小鼠的减肥作用。方法:以高脂饲料喂养ICR雄性小鼠1月建立高脂肥胖模型。将小鼠随机分为5组,对照组、高脂模型组、利莫那班30 mg/kg组、ZH-101-S 10 mg/kg组和ZH-101-S 30 mg/kg组。正常组和模型组给予0.5%的羧甲基纤维素钠,其他3组分别给予相应的药物,各组均连续灌胃给药18 d。实验过程中测量小鼠体质量,末次给药后空腹12 h,眼眶采血检测小鼠空腹血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血糖、极低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)水平。处死小鼠,取附睾脂肪称重并计算脂肪系数(附睾脂肪质量/净体重),并将脂肪及肝脏组织进行切片和HE染色。结果:连续给药18 d后ZH-101-S组小鼠体质量、血清总胆固醇、三酰甘油、血糖、LDL-C、AST、ALT、LDH水平均明显低于模型组(P<0.05),HDL-C较模型组明显升高;光镜下,ZH-101-S组脂肪细胞直径、肝组织脂滴空泡数均明显小于或少于模型组。结论:利莫那班衍生物ZH-101-S在减轻高脂肥胖模型小鼠体质量的同时能降低血脂水平,改善肝损伤。
- 王瑾周炳杰耿骥冯建科范儒霖郭文洁高静
- 关键词:减肥脂质代谢
- 积雪草酸对MPTP诱导小鼠帕金森样运动症状的影响被引量:8
- 2018年
- 目的考察积雪草酸(AA)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导小鼠帕金森(PD)样运动症状的影响及其神经保护机制。方法取雄性C57BL/6小鼠45只,除对照组9只小鼠外,其余用25 mg/kg MPTP腹腔注射7 d建立帕金森病模型,随机分为模型组,积雪草酸低、高剂量组,阳性对照组。造模同时开始连续11 d灌胃给予相应药物或溶剂(0.5%羧甲基纤维素钠),第12天进行行为学测试。ELISA试剂盒检测血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫组织化学法检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞;检测中脑IL-1β、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2(COX-2)的mRNA表达,以及丙二醛(MDA)含有量。结果与模型组相比,给予积雪草酸的小鼠在行为学测试中表现更好(P<0.05,P<0.01)。而且,积雪草酸通过上调TH表达、增加TH阳性细胞数量来有效保护黑质多巴胺能神经元(P<0.05);抑制中脑i NOS、COX-2、IL-1β、TNF-α的mRNA表达(P<0.05,P<0.01);降低中脑MDA水平(P<0.01);降低血清IL-1β、TNF-α含有量(P<0.05,P<0.01)。结论积雪草酸能缓解PD小鼠运动障碍和多巴胺能神经元损伤,抗炎、抗氧化是其可能的神经保护机制。
- 赵梦蝶耿骥耿骥郭文洁李静周炳杰高静
- 关键词:积雪草酸帕金森病炎症反应