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少棘蜈蚣抗菌肽scolopin 2的克隆、表达与抗癌机制研究被引量：10: 2016年; 旨在研究AMP-scolopin 2的抗菌活性和抗癌机理。利用SUMO融合技术对AMP-scolopin 2进行了体外表达;采用抑菌圈、MTT、流式细胞术和Western blotting等技术分析了其抗菌活性、溶血活性和对肿瘤细胞的促凋亡作用。结果表明,成功表达并纯化了AMP-scolopin 2;AMP-scolopin 2对白血病细胞(K562)和肝细胞癌(Hep G2)具有抑制增殖和促凋亡作用,但对红细胞和正常细胞HEK293的影响很小;AMP-scolopin 2(40μmol/L)可以诱导K562(21.4%)和Hep G2(18.5%)细胞凋亡;此外,AMP-scolopin 2下调了与线粒体相关的凋亡蛋白pro-caspase-3、pro-caspase-9和pro-PARP的表达,且呈浓度依赖性。AMP-scolopin2可以通过线粒体caspase依赖性途径促进肿瘤细胞凋亡。; 侯欢欢卢佳章纬菁黄芳任文华; 关键词：蜈蚣 SUMO 抗菌活性

长江江豚TRAIL基因的克隆、体外表达及生物学功能分析被引量：2: 2016年; 构建可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的表达体系,研究其蛋白表达产物对肿瘤细胞凋亡的影响,为以后江豚免疫系统的研究奠定基础。通过RT-PCR技术从江豚Neophocaena phoconoides血液总RNA中反转录扩增出肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(简称fTRAIL)的全长cDNA序列,并将fTRAIL的胞外可溶性(简称fsTRAIL)片段连接入表达载体pET43.1a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化,Western blotting对产物Nus-His-fsTRAIL蛋白进行鉴定。体外用MTT法、台盼蓝拒染法及流式细胞术检测Nus-His-fs TRAIL蛋白对Jurkat细胞和HeLa细胞的影响。成功构建了fTRAIL胞外可溶性片段(简称fsTRAIL)与pET43.1a组成的表达载体,并获得Nus-His-fsTRAIL蛋白。体外实验表明,Nus-His-fsTRAIL蛋白能够以剂量依赖的方式抑制Jurkat和HeLa细胞的增殖并诱导其凋亡。Nus-His-fsTRAIL表达产物具有对Jurkat和HeLa细胞体外抗肿瘤活性的作用。; 裴丽丽章纬菁卢佳黄芳曹倩倩任文华; 关键词：TRAIL 江豚 JURKAT细胞 HELA细胞

孵化温度对王锦蛇胚胎代谢和幼体适合度的影响被引量：1: 2017年; 孵化温度所驱动的爬行动物的表型变异是生理生态学研究的热点。本研究以王锦蛇(Elaphe carinata)为实验动物,检验了24℃和28℃孵化温度对王锦蛇胚胎代谢速率、孵化过程中的卵重量、孵出幼体代谢和行为的影响。研究结果显示:卵重和胚胎的呼吸代谢均与孵化时间呈正相关;28℃下胚胎代谢速率大于24℃;幼蛇孵出15 d内体重随着生长时间的延长而减小,24℃孵出幼体的代谢速率大于28℃孵出幼体,两温度下孵出幼体的呼吸代谢速率和生长时间无显著关系;28℃孵出幼体的疾游速和吐信频次均大于24℃;两孵化温度孵出幼体的选择体温无显著差异,但在消耗完体内的剩余卵黄后28℃孵出幼体有60%的个体摄食,而24℃孵出幼体无摄食个体。总体而言,王锦蛇28℃孵出幼体适合度优于24℃孵出幼体。; 黄芳周进樊天骐屈彦福; 关键词：王锦蛇孵化适合度选择体温

鲫鱼TNFSF13b(BAFF)基因的克隆、可溶性表达及生物学功能分析: 2016年; 目的:获得鲫鱼B细胞活化因子(BAFF)基因的全长序列,并构建鲫鱼B细胞活化因子(BAFF)基因的可溶性表达体系,研究其蛋白表达产物对鲫鱼B淋巴细胞的作用。方法:通过RTPCR技术克隆鲫鱼BAFF(简称CaBAFF)的全长cDNA序列,并利用RACE技术快速扩增cDNA末端,将CaBAFF的可溶性片段(简称CasBAFF)与表达载体sumo连接,并在大肠杆菌BL21中高效表达和纯化,Western bloting对产物Nus-His-CasBAFF蛋白进行鉴定。激光扫描共聚焦显微镜分析表明,Nus-His-CasBAFF蛋白可以与鲫鱼B淋巴细胞结合。体外,通过MTT检测纯化的NusHis-CasBAFF蛋白能否促进鲫鱼B淋巴细胞的存活。结果:成功克隆鲫鱼BAFF基因,构建了重组表达载体,获得可溶性Nus-His-CasBAFF蛋白。体外实验证明,可溶性Nus-His-CasBAFF蛋白能够促进鲫鱼B淋巴细胞的存活。结论:可溶性Nus-His-CasBAFF蛋白能够促进鲫鱼B淋巴细胞的存活/增值,为鲫鱼免疫系统的研究奠定了基础。; 裴丽丽黄芳李瑰婷庞书英任文华; 关键词：BAFF RACE 细胞活性

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黄芳