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郭芳芳: 作品数：14 被引量：11H指数：2; 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金北京市农林科学院科技创新能力建设专项北京市农林科学院青年基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生化学工程更多>>

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肠菌素结合载体疫苗降低空肠弯曲菌在鸡肠道定植的研究: 空肠弯曲菌是引起人细菌性肠炎的主要病原,是最重要的食源性病原微生物之一。该菌感染鸡不引起任何明显的临床症状,但在鸡肠道内长期定植,是人弯曲菌病的主要污染来源。肠菌素（enterobactin,Ent）是由肠杆菌科细菌分泌...; 崔一芳郭芳芳曹晓亚杨兵周宏专苏霞徐福洲; 关键词：空肠弯曲菌肉鸡定植

大肠杆菌肠菌素对空肠弯曲菌的促生长作用研究: 2024年; [目的]调查鸡肠道内大肠杆菌分泌肠菌素的水平,以及其对空肠弯曲菌的促生长作用。[方法]利用间接竞争ELISA(ic-ELISA)方法检测临床分离的30株鸡肠道大肠杆菌分离株的肠菌素产量;利用λRed同源重组系统构建大肠杆菌entB基因缺失突变株,并用ic-ELISA方法测定大肠杆菌亲本株和突变株的肠菌素产量;检测亲本株和突变株在不同限铁培养基中的生长曲线;将大肠杆菌亲本株和突变株培养上清接种空肠弯曲菌,探究大肠杆菌肠菌素对空肠弯曲菌生长的影响。[结果]30株鸡肠道大肠杆菌分离株分泌肠菌素水平介于11~126μmol/L之间。利用λRed同源重组系统成功构建2株大肠杆菌entB基因缺失突变株。定性结果显示,大肠杆菌亲本株在CAS培养基中产生黄色晕圈,而entB基因缺失株不产生晕圈。ic-ELISA检测结果显示,亲本株分泌肠菌素浓度为100~150μmol/L,而基因缺失株未检测出肠菌素。大肠杆菌亲本株和entB基因缺失株在富铁培养基中生长无显著差异(P>0.05),在限铁培养基中达到平台期的D 600 nm值分别为0.6和0.3。促生长试验结果显示,大肠杆菌亲本株培养上清接种空肠弯曲菌24和36 h,菌落数分别为7.8和8.2 lg CFU/mL,而entB基因缺失株培养上清接种后菌落数分别为7.0和7.3 lg CFU/mL。[结论]大肠杆菌具有分泌肠菌素的能力,且其在限铁环境下能促进空肠弯曲菌的生长,试验结果为深入研究肠菌素介导的肠道细菌之间的相互作用奠定基础。; 时晨欣崔一芳申学阳焦晓丽郭芳芳丁保安徐福洲; 关键词：大肠杆菌空肠弯曲菌

不同宿主源弯曲菌黏附侵袭肠上皮细胞及在鸡肠道内定殖的比较: 2022年; 【背景】弯曲菌(Campylobacter)是重要的人畜共患病原菌,可在多种动物肠道定殖,但不同宿主源弯曲菌对肠上皮细胞的黏附侵袭特征及在鸡肠道内的定殖能力并不明确。【目的】探究不同宿主源弯曲菌对不同宿主肠上皮细胞黏附侵袭及在鸡肠道内定殖能力的差异性。【方法】利用5株来自不同宿主源弯曲菌,包括人源、鸡源、鸭源和牛源空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)及猪源结肠弯曲菌(Campylobacter coli),在对菌株PCR鉴定、运动力及生物膜形成能力测定的基础上,分别测定各菌株对人源肠上皮细胞Caco-2、猪源肠上皮细胞IPEC-J2和大鼠源肠上皮细胞IEC-6的黏附能力,通过庆大霉素保护试验测定菌株对肠上皮细胞的侵袭能力,比较黏附量和侵袭量的差异;将5株弯曲菌分别口服攻毒鸡,于攻毒后不同日龄(different days post inoculation,DPI)采集肠道样品测定弯曲菌的菌落数,比较不同弯曲菌在鸡肠道内定殖的差异。【结果】人源弯曲菌运动力显著高于其他4株动物源弯曲菌,而牛源和猪源弯曲菌生物膜形成能力显著高于其他菌株。黏附侵袭测定结果显示,人源弯曲菌对Caco-2细胞的黏附能力显著高于动物源弯曲菌,但侵袭能力显著低于动物源弯曲菌;鸭源和牛源弯曲菌对IPEC-J2细胞的黏附能力显著低于其他菌株,而且鸭源弯曲菌的侵袭能力显著低于其他菌株;不同菌株对IEC-6细胞的黏附能力无显著差异,但鸡源弯曲菌侵袭能力显著低于其他菌株。不同弯曲菌口服攻毒鸡后1、3和6 d动物源弯曲菌定殖水平显著高于人源,在攻毒后10 d和15 d仅牛源弯曲菌显著高于人源,于攻毒后15 d所有菌株达到约8-10 Log10(CFU/g)的稳定定殖水平。【结论】来源于不同宿主的弯曲菌对不同宿主肠上皮细胞均具有黏附侵袭能力,同时可在鸡肠道内稳定定殖,提示弯曲菌在不同动物间传播和适应性定殖的特征,对开展弯�; 郭家卉崔一芳李鹏祥申学阳曹晓亚马洪海郭芳芳丁保安徐福洲; 关键词：弯曲菌宿主肠上皮细胞定殖

Toll样受体3激动剂在疫苗佐剂中的应用进展被引量：1: 2020年; 模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)在先天免疫系统中起着至关重要的作用,是重要的宿主传感器,可识别入侵病原体所显示的病原体相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP)。PAMP是独立的免疫调节剂,且具有多种生化成分和特殊结构,逐渐被认为是许多现代疫苗的关键成分。Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)3激动剂是一种合成的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA),能够以与病毒感染相似的模式激活宿主免疫防御的多种通路。当与抗原适当混合时,TLR3激动剂可以用作PAMP-佐剂,以调节和优化抗原特异性免疫应答。基于此,主要讨论了TLR3及其激动剂的作用机制以及TLR3激动剂在疫苗佐剂中的应用进展,以期为动物疫苗的研究提供新的思路。; 曹晓亚徐福洲郭杰温彤苏霞周宏专杨兵崔一芳郭芳芳; 关键词：适应性免疫佐剂先天免疫 TOLL样受体3

胸膜肺炎放线杆菌利用肠菌素摄取铁促生长的研究: 2024年; 肠菌素(Ent)介导的铁摄取系统在病原细菌生长和定植过程中发挥关键作用。胸膜肺炎放线杆菌是引起猪传染性胸膜肺炎的病原,为鉴定该菌不同血清型菌株能否利用肠菌素摄取铁发挥促生长作用,试验选用胸膜肺炎放线杆菌血清1~12型参考菌株,首先在限铁条件下通过肠菌素促生长试验鉴定不同血清型菌株能否利用肠菌素;进而通过添加不同浓度的铁螯合剂DFO、细菌接种量、肠菌素等因子,筛选胸膜肺炎放线杆菌利用肠菌素促生长的最适培养条件;最后分别在限铁和富铁培养条件下通过生长曲线鉴定肠菌素对胸膜肺炎放线杆菌12个血清型菌株的促生长作用。结果显示,在测定的胸膜肺炎放线杆菌血清1~12型参考菌株中,除血清2型和10型外,其他型菌株在限铁条件下均可利用肠菌素促生长。不同因子筛选结果显示,最适细菌接种浓度为1×10^(4)CFU/mL,添加DFO浓度为20μmol/L,而添加0.4、2.0、10.0μg/mL等不同浓度的肠菌素对胸膜肺炎放线杆菌均有显著促生长作用,且随肠菌素浓度升高而促生长能力显著增强。试验证实胸膜肺炎放线杆菌可利用肠菌素促进其生长,同时证实不同血清型利用肠菌素方面存在显著差异,为解析肠菌素介导的铁摄取系统在胸膜肺炎放线杆菌中的作用机制奠定了基础。; 焦晓丽崔一芳申学阳时晨欣武金亮郭芳芳崔国林刘娜徐福洲; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌血清型铁促生长

胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxⅡC-/apxⅠA+、ureC-/apxⅢ+减毒双突变菌株的构建及特性研究: 胸膜肺炎放线杆菌(APP)是引起猪传染性胸膜肺炎的呼吸道病原细菌,其中Apx毒素和尿素酶(Urease)均是其主要的毒力因子,且Apx毒素又是其主要的免疫原性蛋白。为构建APP减毒突变菌株,本试验首先利用仅表达ApxⅡ毒...; 崔国林郭芳芳陈小玲杨兵周宏专苏霞徐福洲; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌 APX毒素尿素酶突变

胸膜肺炎放线杆菌ureC-/apxⅢ+突变株构建及生物学特性研究: 胸膜肺炎放线杆菌是引起猪传染性胸膜肺炎(APP)的呼吸道病原菌,其中尿素酶是其主要的毒力因子之一.为构建APP尿素酶基因突变弱毒菌株,在ureC基因中缺失一段基因片段,并插入具有免疫原性的apxⅢ基因片段,利用sacB基...; 崔国林郭芳芳杨兵陈小玲周宏专苏霞徐福洲; 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌尿素酶; 文献传递

空肠弯曲菌全菌灭活疫苗免疫鸡效果评价被引量：1: 2022年; 目的拟研制一种可降低空肠弯曲菌在鸡肠道内定植的全菌灭活疫苗。方法利用一种新的灭活剂H;O;与CuCl;混合物灭活空肠弯曲菌制备油佐剂灭活疫苗,免疫SPF鸡后测定灭活疫苗诱导产生的特异性抗体水平,通过口服攻毒评价疫苗免疫对空肠弯曲菌在鸡盲肠内定植的影响,同时测定盲肠细胞因子在转录水平的变化,以及对盲肠绒毛长度和隐窝深度的影响。结果制备的全菌灭活疫苗免疫SPF鸡后可诱导产生特异性血清IgG和胆汁IgA,但口服攻毒后不能抑制或降低空肠弯曲菌在盲肠内的定植水平,且对免疫鸡的盲肠绒毛长度和隐窝深度无明显影响。测定的鸡盲肠中多数细胞因子在空肠弯曲菌攻毒前与攻毒后1 d的转录水平差异不明显,而在攻毒后10 d明显上升;同日龄样品比较结果显示,部分细胞因子的表达量在佐剂对照组和全菌免疫组较空白对照组明显上调。结论本试验研制的全菌灭活疫苗虽可诱导产生高水平特异性抗体,但不能降低空肠弯曲菌在鸡盲肠内的定植水平,提示空肠弯曲菌在鸡盲肠内的定植机制需深入探究。; 魏国昊崔一芳郭芳芳曹晓亚王雪刘彦威徐福洲; 关键词：空肠弯曲菌定植抗体细胞因子

副猪嗜血杆菌血清4型和13型的分子血清分型研究被引量：4: 2021年; 为在临床诊断中快速鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)血清4型和13型等优势流行血清型,分子血清分型方法较常规的基于特异性抗血清的血清分型方法更加准确和高效。根据HPS血清4型脂多糖合成蛋白基因wcip 4和血清13型糖脂转移蛋白基因gltP序列设计特异性引物,分别建立了简便快速鉴定HPS血清4型和13型的环介导等温扩增方法(LAMP)。特异性检测结果显示,HPS血清4型或13型参考菌株检测为阳性,而其他HPS血清型参考菌株及19种其他细菌检测均为阴性;敏感性检测结果显示,在25μL反应体系中,HPS血清4型和13型基因组DNA检测限分别为1 pg和2.5 pg。对已知血清型的22株HPS临床分离株检测结果显示,13株血清4型和5株血清13型分别检测均为阳性,而其他血清型分离株检测均为阴性。结果表明,建立的LAMP方法可用于HPS血清4型和13型的快速鉴定,有助于HPS优势流行血清型的快速调查及疫苗防控。; 李忍郭芳芳郭杰崔一芳曹晓亚徐福洲; 关键词：副猪嗜血杆菌环介导等温扩增特异性敏感性

胸膜肺炎放线杆菌在不同培养基中生长、生物膜形成及Apx毒素分泌能力的差异研究被引量：4: 2022年; 为比较胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清1型~12型菌株在不同培养基中的生长、生物膜形成以及Apx毒素分泌能力的差异,选用5种细菌培养基BHI、LB、MHB、PPLO和TSB,首先测定APP不同血清型菌株在5种培养基中的生长曲线,进而测定不同血清型菌株在5种培养基中的生物膜形成能力,同时测定这些菌株对20种抗菌药物的耐药性,最后测定APP血清1型菌株在5种培养基中添加CaCl_(2)对ApxⅠ毒素分泌的影响。结果显示,APP不同血清型菌株在BHI和TSB中生长较好,而在MHB、LB和PPLO生长较差;在不同培养基中培养24 h生物膜形成能力为MHB>BHI>TSB>LB>PPLO,血清3、4、7型和12型参考菌株生物膜形成能力较强;药敏结果显示,APP不同血清型菌株仅对万古霉素耐药;Apx毒素分泌结果显示,ApxⅠ在MHB、LB和PPLO中表达量显著高于BHI和TSB,而且培养基中添加5 mmol/L CaCl_(2)后ApxⅠ分泌量显著增加。研究结果可为分析APP不同血清型菌株在不同培养基中的生物学特性以及疫苗研制提供参考。; 吕佩帅张丽红丁小松郭芳芳崔一芳曹晓亚徐福洲; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌生物膜形成 APX毒素

郭芳芳

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