黄海燕
- 作品数：45 被引量：83H指数：6
- 供职机构：山东省医药生物技术研究中心更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家科技重大专项山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信更多>>
- 制备蛋白质微阵列的玻璃表面修饰方法比较被引量：2
- 2006年
- 目的探讨用于制备蛋白质微阵列的5种不同修饰方法的玻片对蛋白质的固定能力,通过对荧光信号强度的大小以及蛋白芯片检测的灵敏度的比较确定一种蛋白质固定效果好、信噪比高的玻片。方法将系列稀释的人IgG分别点在5种不同修饰方法[包括氨基、多聚赖氨酸、3-氨丙基三乙氧基硅烷(APES)、醛基-磷酸盐缓冲液、醛基-H2O]修饰的玻片上制备蛋白质微阵列,比较不同玻片修饰方法荧光信号强度的大小以及蛋白芯片检测的灵敏度。结果5种玻片中APES修饰的玻片蛋白质固定效果最好,信噪比最高。结论APES修饰的玻片比较适合制备蛋白质微阵列。
- 徐华韩金祥高雪芹李钿黄海燕潘继红
- 关键词：蛋白质微阵列
- 自身免疫性疾病抗体检测微阵列制备条件的优化和初步应用被引量：2
- 2006年
- 目的优化制备蛋白质微阵列的几个关键因素,初步建立自身免疫性疾病抗体检测微阵列,以期用于自身免疫性疾病的诊断。方法选择与制备蛋白质微阵列有关的4个因素,即温育时间、封闭剂、封闭时间和与二抗结合时间,进行正交优化,得出制备蛋白质微阵列的最优化条件,并根据该条件,进一步确定6种自身抗原适合的点样浓度及血清的最佳稀释度。根据优化条件,制备出同时检测6种自身抗体的微阵列,并初步应用,与间接免疫荧光(IIF)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法加以比较,对结果进行评价。结果制备蛋白质微阵列的最佳优化条件是温育2h,封闭剂采用含有1%小牛血清白蛋白和2．5%蔗糖的PBST,封闭时间为30min,与二抗反应30min,6种自身抗原适合点样浓度从100μg/ml到300μg/ml不等,最佳血清稀释浓度是1∶2。微阵列法对抗核抗体(ANA)的检测与IIF法相比,灵敏度是88．6%,特异度是83．3%,微阵列法对其他5种自身抗体的检测与ELISA法相比,灵敏度在80．0%～88．2%之间,特异度在90．2%～98．6%之间。结论上述优化条件适合于制备自身免疫性疾病抗体检测微阵列,微阵列检测结果与现有常规方法检测结果比较一致,值得推广应用。
- 徐华韩金祥高雪芹黄海燕李钿潘继红刘灿兰
- 关键词：蛋白质阵列分析免疫系统疾病自身抗体
- 检测HSV等5种病原体抗体的微阵列技术被引量：3
- 2006年
- 目的建立抗原微阵列技术检测多种病原体抗体。方法将病原体的基因工程抗原,以电脑操纵的机械手将其点在赖氨酸修饰的玻片上,制备抗原微阵列,与血清反应后随之与Cy3标记的二抗反应,用激光共聚焦扫描仪扫描玻片,检测血清中相应病原体的IgG,并进行了灵敏度和重复性的检测。结果5种抗原的最低检测限度为HSV1-gG 1．56μg／ml,HSV2-gG 3．125μg/ml,CMV- p150 1．56μg/ml,RV-E1E2 3．125μg／ml,MT-LAM 31．26μg/ml;抗原微阵列与ELISA检测的结果相比有较高的符合率;检测IgG和IgM的灵敏度分别为50 pg、10 Pg;不同批次2张玻片间总体变异系数为IgG 6．52,IgM 18．89。结论抗原微阵列可用于平行检测血液中病原体特异性抗体。
- 刘毅曹鲁全黄海燕王进鸿韩金祥
- 关键词：病原体抗体
- 芯片杂交中核酸靶样品的制备优化
- 2003年
- 样品来源、基因含量、检测方法和分析目的的不同 ,采用的核酸分离、扩增和标记方法各异。核酸样品制备条件的优化处理主要包括核酸的单链化处理 ,片段化和标记方法。根据具体情况选用合适的处理方法 。
- 黄海燕韩金祥
- 关键词：基因芯片核酸
- 一种同时检测B、C组人轮状病毒的玻璃基因芯片
- 本实用新型公开了一种同时检测B、C组人轮状病毒的玻璃基因芯片，由玻璃基片和阵列式分布于基片之上的寡核苷酸探针与对照及空白的点涂层组成，其中，所述的玻璃基片是表面有醛基化修饰层的玻璃片；所述点涂层的形状为圆形，涂层区设1～...
- 黄海燕韩金祥王健伟
- 文献传递
- 利用寡核苷酸芯片检测SARS病毒被引量：2
- 2004年
- 目的:利用寡核苷酸芯片检测SARS病毒。方法:根据序列Blast比对分析结果,设计逆转录不对称PCR扩增引物和寡核苷酸检测探针。采用Trizol试剂从人静脉血中提取总RNA,经过逆转录和不对称PCR扩增得到的PCR产物与排列有寡核苷酸探针的芯片杂交,杂交后的芯片经激光共聚焦扫描分析。结果:SARS阳性样品与寡核苷酸芯片杂交后出现阳性杂交信号,具有不同二级结构的寡核苷酸探针杂交信号强度不一。结论:寡核苷酸芯片适于快速准确、平行大量地检测SARS病毒。
- 鲁艳芹韩金祥潘继红黄海燕
- 关键词：严重急性呼吸综合征寡核苷酸芯片
- 基因芯片接触式点样条件的优化被引量：9
- 2003年
- 样品的点制是基因芯片制备中的关键一步,影响因素众多,如点样液和液面高度、基片的选择、控制湿度、点样针运行速度、与基片接触时间等。对玻片点制各条件进行了摸索和优化,并对膜芯片的点制参数进行筛选,以期得到规整和重现性好的样品点。
- 黄海燕韩金祥
- 关键词：基因芯片玻片
- 质粒DNA抗原芯片检测抗双链DNA抗体的初步研究
- 2006年
- 目的:建立以质粒DNA作为抗原的检测血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体的芯片方法,并与酶联免疫吸附实验比较,初步探讨用芯片法检测抗dsDNA抗体的临床价值。方法:将原核表达载体质粒pcDNAⅡ用质粒DNA快速抽提试剂盒提取纯化DNA后按1∶2稀释,用点样仪点在经3-氨丙基三乙氧基硅烷(APES)修饰的玻片上,温孵后用含有1%小牛血清白蛋白和2.5%蔗糖的PBST封闭,以Cy3标记的人IgG为二抗,建立检测dsDNA抗体的芯片方法,并与德国欧蒙公司生产的抗双链DNA检测ELISA试剂盒做比较,对包括58例系统性红斑狼疮(SLE)、25例干燥综合征(SS)、10例皮肌炎(DM)和7例类风湿关节炎(RA)在内的病人和60例健康人对照进行了抗dsDNA的对比检测。结果:对阳性标本的检测,与现用常规检测方法ELISA相比,芯片检测抗dsDNA的灵敏度为91.3%,特异度为90.7%,阳性预测值为89.3%,阴性预测值为92.5%;对健康对照的检测,2种方法均为阴性,符合率为100%。结论:与ELISA相比,用质粒DNA作为抗原建立的芯片方法的灵敏度和特异度较高,为今后建立同时检测多个自身抗体的芯片奠定了基础。
- 徐华韩金祥高雪芹黄海燕潘继红王传玺
- 关键词：生物芯片质粒DNA抗双链DNA抗体
- 轮状病毒微量核酸检测技术研究进展被引量：1
- 2005年
- 同经典的免疫学检测方法相比,现代分子生物学技术用于检测轮状病毒具有更高的灵敏性,特异性和样品检测的广泛性。本文主要介绍了聚丙烯酰胺凝胶电泳法,RT-PCR相关的扩增技术和核酸杂交技术,限制性片段长度多态性分析(RFLP),着重讨论了新兴的实时荧光定量PCR,基因芯片技术,核酸序列依赖性扩增(NASBA)技术等。并对各种方法的灵敏性,特异性等进行了比较。
- 黄海燕韩金祥王健伟
- 关键词：轮状病毒核酸
- 采用cDNA微阵列技术研究阿司匹林对肿瘤转移相关基因表达的影响
- ＜正＞1 研究背景阿司匹林等非甾体类药物主要用于减轻炎疼痛和炎症。由于阿司匹林可以抑制血小板的聚集和凝集,因此也广泛地用于心脑血管病的预防,长期使用阿司匹林可以使结肠癌的发病率降低50％,也可以使诱发性结肠腺瘤的数量和体...
- 高雪芹韩金祥黄海燕闫实
- 文献传递
