熊梅
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 与兔出血症病毒VP60蛋白相互作用蛋白的初步鉴定被引量：2
- 2010年
- 为获得与兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)相互作用的细胞蛋白,本研究以pMD-VP60重组质粒为模板扩增RHDV的VP60基因,克隆于表达载体pGEX-6p-1中,构建了重组表达质粒pGEX-VP60,并转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达GST重组蛋白(rVP60),western blot分析表明该蛋白具有与VP60单克隆抗体(MAb)良好的反应原性。以亲和层析纯化的rVP60进行pull-down实验,从兔的肝脏细胞膜蛋白中获得与VP60相互作用的蛋白,多肽质量指纹图谱分析表明,其相互作用的蛋白为ATP合成酶β亚基,提示该蛋白可能与RHDV的感染相关。
- 熊梅穆亚芳刘家森郭东春原冬伟姜骞林欢曲连东
- 关键词：兔出血症病毒VP60蛋白ATP合成酶
- 兔肝cDNA文库的构建
- 本研究分离纯化3月龄新西兰白兔肝组织总RNA,构建以真核表达载体pGADT7-Rec为载体的酵母cDNA文库,文库容量为2.55×10个转化子/μg质粒,文库滴度为2.7×10cfu/mL,文库插入片段大小约为0.5 k...
- 熊梅穆亚芳刘家森原东伟郭东春姜骞林欢曲连东
- 关键词：肝脏CDNA文库EST
- 兔肝组织cDNA文库的构建及表达序列标签分析
- 2010年
- 分离纯化了3月龄新西兰白兔肝组织总RNA,构建了以真核表达质粒pGADT7-Rec为载体的酵母cDNA文库,该文库的库容量为2.55×106转化子/μg质粒,文库的效价为2.7×109CFU/mL,PCR分析结果表明文库插入片段大小为0.5～2.0kb,重组率约为100%。对随机挑选的50个克隆进行的测序结果表明,37个EST片段与日本大耳白兔基因有较高的同源性,11个EST片段与其他种属哺乳动物功能基因有较高的同源性,另有2个EST片段为未知基因。所构建的兔肝组织cDNA文库符合要求,为进一步研究兔肝组织的功能基因奠定了基础。
- 熊梅穆亚芳刘家森原冬伟郭东春姜骞林欢曲连东
- 关键词：CDNA文库表达序列标签
