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胡秀兰
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
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江苏大学附属人民医院
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相关领域:
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马晓冬
江苏大学附属人民医院
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TDAG8与氧糖缺失-复糖复氧诱发大鼠神经元凋亡时内源性保护机制的关系
被引量:1
2016年
目的探讨T细胞死亡相关基因8(TDAG8)与氧糖缺失-复糖复氧诱发大鼠神经元凋亡时内源性保护机制的关系。 方法原代大鼠皮质神经元以1×105个/ml的浓度种植于6孔板,采用随机数字表法分为5组:对照组(C组,n=24)、氧糖缺失-复糖复氧组(OGD/R组,n=48)、TDAG8激动剂BTB09089组(BTB组,n=24)和TDAG8-siRNA组(siRNA组,n=24)和空白载体组(V组,n=24)。采用无糖无血清的Locker缓冲液,在含有95%N2-5%CO2,37 ℃的厌氧培养箱中孵育60 min,然后正常培养的方法制备氧糖缺失-复糖复氧损伤模型。BTB组、siRNA组和V组于复糖复氧前24 h时分别加入20 μmol/L TDAG8激动剂BTB09089、200 pmol/L TDAG8-siRNA、6 μl/200 μl转染试剂。于复糖复氧6 h时,测定神经元活力和LDH漏出量;采用实时荧光定量PCR法测定神经元TDAG8和caspase-3的mRNA表达水平;OGD/R组分别于复糖复氧即刻、3、6、12和24 h时采用Western blot法测定TDAG8、caspase-3的表达;C组、OGD/R组、BTB组、siRNA组和V组于复糖复氧后6 h时测定TDAG8、caspase-3、p-Akt的表达。 结果OGD/R组复糖复氧后TDAG8表达逐渐上调,caspase-3表达于复糖复氧6 h时达峰值。与C组比较,OGD/R组、V组和siRNA组神经元活力降低,LDH漏出量升高,神经元TDAG8、caspase-3及其mRNA和p-Akt表达上调(P〈0.05);与OGD/R组比较,BTB组神经元TDAG8及其mRNA和p-Akt表达上调,caspase-3及其mRNA表达下调,神经元活力升高,LDH漏出量降低,siRNA组TDAG8及其mRNA和p-Akt表达下调,caspase-3及其mRNA表达上调,神经元活力降低,LDH漏出量升高(P〈0.05),V组上述指标比较差异无统计学意义(P〉0.05)。 结论TDAG8参与了氧糖缺失-复糖复氧诱发大鼠神经元凋亡时部分内源性保护机制,该作用可能与激活Akt信号通路有关。
马晓冬
邵东华
杭黎华
束薇薇
胡秀兰
罗红
关键词:
神经元
再灌注损伤
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