张婷
- 作品数：18 被引量：214H指数：9
- 供职机构：浙江科技学院生物与化学工程学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省重大科技专项基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学理学化学工程更多>>
- 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达和性质鉴定被引量：1
- 2018年
- 通过密码子优化改造编码sn-1,3位置专一性疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)基因,同时通过重叠PCR技术合成该基因,并将其克隆到巴斯德毕赤酵母的表达载体p PIC9K中。结果表明,TLL脂肪酶被高效胞外表达,在摇瓶中发酵168 h得到的发酵液的上清脂肪酶表达量达到0.1 mg/m L,对应的p NPP水解酶活达到312.72U/m L。与对应的原始编码基因重组菌酶活(179.42 U/m L)相比,密码子优化后酶活提高74.29%,表明密码子优化策略成功提高了TLL在巴斯德毕赤酵母中的重组表达。比较毕赤酵母来源的重组TLL与商业化的米曲霉酶学性质发现它们具有相似的最适p H和温度耐受范围。另外,它们在有机溶剂耐受性、表面活性剂和金属离子效应以及位置选择性方面均较为相似,表明毕赤酵母来源的重组TLL同样具有商业化应用的潜力。
- 蔡海莺张婷Dumba Trish赵敏洁李杨童志超毛建卫张辉冯凤琴
- 关键词：密码子优化毕赤酵母
- 甜米酒酒曲微生物分离和菌种鉴定被引量：13
- 2019年
- 甜米酒传统酿制工艺中对微生物多样性的研究较为不足。对不同来源的酒曲微生物进行分离和初步分类鉴定。从12种甜米酒酒曲分离纯化细菌和真菌微生物,分别利用细菌16S rRNA基因和真菌内部转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列为目的基因进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增和测序,通过序列相似性比对和构建系统发育树,并分别进行细菌和真菌初步菌种鉴定。结果显示,从12种不同来源的酒曲筛选和分离到46株细菌和54株真菌;通过分子生物学方法鉴定出41株细菌和16株真菌的种属;酒曲微生物中含有大量芽孢杆菌(Bacillus),少量病原菌和腐败菌,表明酒曲仍需要严格的制作工艺和标准;真菌除酿酒酵母外,还鉴定出毕赤酵母和扣囊复膜酵母等非酿酒酵母及米根霉、小孢根霉、印度毛霉和卷枝毛霉等丝状真菌。
- 蔡海莺张婷沈灵智彭佩莹戴璟张琪罗洁毛克羽蔡成岗蔡成岗
- 关键词：甜米酒酒曲芽孢杆菌生物多样性
- 同工酶共表达增强脂肪酶的毕赤酵母重组表达
- 较低的表达水平是酶制剂的价格居高不下,并限制其作为生物催化剂在工业应用的重要因素之一。本研究尝试利用脂肪酶同工酶的表达策略提高催化同一反应的脂肪酶同工酶在表达系统中的整体表达水平。我们设计并构建了4种脂肪酶同工酶的共表达...
- 蔡海莺张婷张琪罗洁葛展榜李江俞韩科王珍珍毛旸晨蔡成岗毛建卫冯凤琴；
- 关键词：脂肪酶
- 文献传递
- 五肽前导肽增强疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母的重组表达和蛋白折叠研究
- 脂肪酶前导肽可作为分子伴侣影响其成熟蛋白的许多性质。然而,前导肽作用机制可能不同。本研究的主要目的是通过研究疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)五肽前导肽对其在毕...
- 蔡海莺张婷罗洁张琪葛展榜李江俞韩科王珍珍毛旸晨蔡成岗毛建卫冯凤琴；
- 关键词：前导肽蛋白折叠分子印迹
- 文献传递
- 柘树植物酵素中氨基酸分析及抗氧化性能研究被引量：29
- 2018年
- 分别以柘树的小青果、花、叶为原料,按植物酵素传统发酵工艺制得柘树小青果酵素、柘树花酵素和柘树叶酵素,研究其氨基酸种类、含量以及抗氧化性能。结果表明:三种酵素的氨基酸含量丰富,总氨基酸含量分别为12.667、2.870、1.198 mg/mL,人体必需氨基酸占总氨基酸比例分别为32.8%、32.9%、40.0%,比值系数分别为54.31、31.65、46.49,柘树小青果酵素具有更高的营养价值,三种酵素主要的氨基酸为天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和赖氨酸,半胱氨酸和蛋氨酸含量极少。三种酵素的抗氧化能力都很强,其中柘树小青果酵素抗氧化性能均优于柘树花酵素和柘树叶酵素,且ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和还原力均表现出了浓度依赖性。氨基酸含量与抗氧化性能具有正相关性,尤其是天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)和脯氨酸(Pro)这六种主要氨基酸含量与还原力具有显著的正相关性(r>0.99),可以利用还原力来评价柘树植物酵素的抗氧化性能。
- 程勇杰陈小伟陈小伟楼坚张沙沙王珍珍楼坚沙如意张婷
- 关键词：氨基酸抗氧化性能自由基
- 不同提取方法对牡丹籽油品质与抗氧化性的影响被引量：12
- 2019年
- 采用瞬时压榨法、液压法与正己烷浸提法提取‘凤丹’牡丹籽油,研究不同方法对牡丹籽油的出油率、理化特性、主要成分组成及抗氧化性能的影响。结果表明:正己烷浸提法(31.26%)、瞬时压榨法(14.27%)和液压法(7.81%)三者出油率相互之间均有显著性差异(p <0.05);瞬时压榨法和液压法对牡丹籽油碘值差异无显著影响(p> 0.05),对皂化值有极显著性影响(p <0.01);正己烷浸提和液压油脂的水分及挥发性成分含量和过氧化值显著高于瞬时压榨油脂(p <0.05),而正己烷浸提油脂的酸值极显著高于其他两种方法(p <0.01)。在主要成分组成方面,三种方法得到的牡丹籽油棕榈酸、亚油酸、角鲨烯含量没有显著性差异(p> 0.05),正己烷浸提牡丹籽油中硬脂酸和油酸含量显著高于其他两种方法(p <0.01)。瞬时压榨法亚麻酸占总脂肪酸的30.98%,显著高于液压(23.22%)和正己烷浸提法(15.98%)(p <0.01);β-谷甾醇以瞬时压榨法最高,三种方法之间差异极显著(p <0.01)。抗氧化性能评价结果表明,瞬时压榨牡丹籽油对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除能力略高于液压法,对羟基自由基的清除能力则相反;液压牡丹籽油在270～450 nm范围内吸光度值高于其他两种方法,表明了其良好的防晒效果。生产中可先用瞬时压榨法或液压法对牡丹籽进行提取,再结合正己烷对油饼进行浸提,可获得高活性成分的油脂,并提高提取率。
- 赵优萍张沙沙张婷孙卢狄肖金妮蔡成岗方晟方晟沙如意沙如意
- 关键词：牡丹籽油液压法理化性质
- 红茶菌生产细菌纤维素及其结构表征被引量：11
- 2018年
- 红茶菌是一种中国传统酸性饮料,为了得到其生产细菌纤维素(BC)的能力及发酵过程中发酵液的变化情况,利用红茶菌混合菌种发酵制备细菌纤维素,对发酵过程中的细菌纤维素产量、还原糖消耗量和pH值进行检测。结果表明,发酵过程中pH值从4.77降到3.08,还原糖含量从51.16g/L降到10.55g/L,发酵7d得到4.39g/L的细菌纤维素。扫描电镜观察到细菌纤维素的直径在100～500nm之间;热重分析表明细菌纤维素在296℃处具有最大失重,失重率达46%;红外光谱揭示了细菌纤维素的特征吸收峰。元素分析结果表明,细菌纤维素主要由C、H、O这3种元素构成,基本上符合纤维素中各元素含量;XRD结果表明细菌纤维素的结晶度为80.21%,是一种高结晶度纤维素材料。
- 张沙沙卢蔚波张婷沙如意毛建卫
- 关键词：红茶菌细菌纤维素发酵
- 毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶被引量：5
- 2018年
- 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶TLL是一种热稳定、具有位置专一性等良好属性和应用前景的脂肪酶,已成功在多种宿主中实现重组表达。本研究构建含前导肽的TLL脂肪酶毕赤酵母重组工程菌,在摇瓶水平对该重组工程菌的培养和诱导条件进行优化,通过单因素试验,得到的最佳发酵条件:1.5%(体积分数)甲醇,pH 7.0,质量分数0.5%玉米油和0.1%阿拉伯胶,该条件下摇瓶发酵最高酶活为2 265.3 U/mL。以甲醇为唯一碳源进行高密度发酵,202 h后菌体OD600值达到最高282,对应发酵上清液的最高酶活为22 561.4 U/mL。参考摇瓶优化结果,采用辅助碳源与甲醇共诱导高密度发酵,培养和诱导208 h后,最终菌体OD600值达到362,对应发酵上清液的最高酶活为24 522.6 U/mL,较以甲醇为唯一碳源的对应值分别提高了28.37%和10.87%。另外,最高酶活较摇瓶水平发酵的最高酶活2 265.3 U/mL提高10.83倍,表明高密度发酵和共诱导是大幅提高酵母表达重组TLL蛋白的重要手段。
- 蔡海莺Dumba Trish张婷来佳赵敏洁李杨于林凯张辉冯凤琴
- 关键词：高密度发酵毕赤酵母
- 微生物脂肪酶资源挖掘研究进展被引量：13
- 2018年
- 脂肪酶广泛分布于动物、植物和微生物中,工业化脂肪酶主要来源于微生物。脂肪酶制剂的进一步工业化应用受限于生产成本和脂肪酶的温度和pH值耐受性、活性、专一性和溶剂耐受性等酶学性质,虽然微生物脂肪酶基因和蛋白相关资源信息已经非常丰富,但适合食品、药品和能源等工业应用的脂肪酶制剂品种依然较少,研究者仍然在为新型和理想的脂肪酶制剂资源的挖掘而努力。本文重点综述了微生物脂肪酶资源挖掘的主要研究方法,主要包括通过环境筛选和宏基因组筛选挖掘新的具有优良特性的脂肪酶;脂肪酶微生物生产菌株的改良、脂肪酶基因在重组工程菌株中的重组表达和优化、蛋白质工程方法对脂肪酶蛋白进行改造、脂肪酶固定化和催化工艺的改良等。
- 蔡海莺王珍珍张婷张婷李杨赵敏洁李杨
- 关键词：微生物脂肪酶资源挖掘蛋白质工程
- 树莓酵素与蓝莓酵素有机酸分析及其体外抗氧化性能被引量：37
- 2017年
- 研究树莓酵素和蓝莓酵素中有机酸种类与含量及其体外抗氧化性能。采用高效液相色谱法,准确地测定其有机酸含量及种类,并以还原力、DPPH自由基清除能力、超氧自由基清除能力、羟基自由基清除能力和ABTS^+自由基清除能力为抗氧化性指标,多体系地考察其体外抗氧化性能。结果表明,树莓酵素和蓝莓酵素均以酒石酸、乙酸和柠檬酸为主,同时因发酵代谢积累了少量丙酮酸、莽草酸和富马酸,而在蓝莓酵素中未检测到没食子酸。树莓酵素和蓝莓酵素的DPPH自由基清除能力、还原力、超氧自由基清除能力、羟基自由基清除能力和ABTS^+自由基清除能力均表现出浓度依赖性。在实验剂量内,树莓酵素和蓝莓酵素DPPH自由基清除能力的IC_(50)分别为2.00 mg V_C当量/m L和8.70 mg V_C当量/m L,还原力的IC_(50)分别为4.53 mg V_C当量/m L和7.62 mg V_C当量/m L,超氧自由基清除能力的IC_(50)分别为0.53 mg V_C当量/m L和2.05 mg V_C当量/m L,羟基自由基清除能力的IC_(50)分别为8.92 mg V_C当量/m L和9.14 mg V_C当量/m L,ABTS^+自由基清除能力的IC_(50)分别为3.59 mg V_C当量/m L和6.81 mg V_C当量/m L。树莓酵素有机酸种类多于蓝莓酵素,且树莓酵素的抗氧化性能优于蓝莓酵素。
- 程勇杰陈小伟陈小伟张沙沙张婷张沙沙沙如意张婷
- 关键词：抗氧化能力
