李祎
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
- 供职机构：中国人民武装警察部队后勤学院附属医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠Krüppel样因子4 RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定被引量：2
- 2017年
- 【目的】构建小鼠Krüppel样因子4 RNA干扰慢病毒表达载体,并观察KLF4基因在小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7细胞中的表达情况。【方法】根据Gen Bank中基因信息,采用干扰序列设计软件设计靶点,合成、制备KLF4-sh RNA DNA片段,与载体连接构建真核表达慢病毒干扰载体p LVX-KLF4-sh RNA,转化感受态,筛选阳性克隆,并进行测序鉴定。在Lipofectamine~?3000的介导下,p LVX-KLF4-sh RNA1/2与ps PAX2、p MD2.G辅助质粒共转染293T细胞,包装产生病毒Lenti-KLF4 1/2,将重组的慢病毒感染RAW264.7细胞,实时定量PCR法检测KLF4 m RNA的表达。收集病毒上清并浓缩测定病毒滴度。【结果】经测序证实,沉默小鼠KLF4基因的真核表达慢病毒干扰载体构建成功,倒置荧光显微镜下可见包装细胞293T细胞表达绿色荧光,RT-PCR证实RAW264.7细胞中KLF4 m RNA的敲除效率分别在60%、75%左右(P<0.05)。初次浓缩后测定小鼠KLF4基因重组慢病毒的滴度为1.65×108TU/ml。【结论】成功构建出KLF4的RNA干扰慢病毒载体p LVX-KLF4-sh RNA 2可用,并包装出慢病毒,为本实验在后续的体内体外研究中探讨KLF4的作用机制奠定了实验基础。
- 李鑫周茂彬李琦孙亮李祎马永强周欣姬文婕魏路清
- 关键词：RNA干扰慢病毒
- 甘草酸对博莱霉素诱导的实验性肺纤维化的干预作用被引量：12
- 2017年
- 目的:探讨甘草酸(GA)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化的干预作用及其可能机制。方法:将160只雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、BLM+NS组和BLM+GA组。通过口咽气管吸入法吸入博莱霉素(2.5 mg/kg)建立实验性肺纤维化模型,BLM+GA组及BLM+NS组每天给予40 mg/kg甘草酸或等体积的生理盐水灌胃,于术后第3、7、14、21天取材。采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用流式细胞术检测循环单核细胞和肺泡巨噬细胞的亚群比例变化,采用RT-qPCR检测肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达水平,采用碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量。结果:与NS组相比,BLM组和BLM+NS组肺组织的炎症浸润及胶原含量明显增多,实验性肺纤维化模型制备成功。与BLM+NS组相比:BLM+GA组肺组织的炎症细胞浸润及胶原纤维沉积较少;第3、7天的Ly6C^(hi)单核细胞亚群比例和第7、14天肺泡巨噬细胞M2表型比例显著降低(P<0.01);肺组织TGF-β1 mRNA表达量和HYP含量显著降低(P<0.01)。结论:GA可以减轻博莱霉素诱导的小鼠肺组织的炎症反应和胶原纤维沉积,可能与GA对单核巨噬细胞的表型偏移和调控以及肺组织TGF-β1的表达下调有关。
- 李祎李鑫李琦苏程程周欣彭守春魏路清姬文婕
- 关键词：甘草酸肺纤维化单核细胞肺泡巨噬细胞转化生长因子Β1
- 当归贝母苦参优化方对博莱霉素诱导肺纤维化的干预研究
- 目的：探讨当归贝母苦参优化方在博莱霉素诱导的实验性肺纤维化中的干预作用及其可能机制。方法：320只雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水组(NS)、博莱霉素组(BLM)、博莱霉素+生理盐水组(BLM+NS)和博莱霉素+...
- 李祎魏路清
- 关键词：肺纤维化博莱霉素细胞表型
- 肺纤维化模型小鼠肺泡巨噬细胞凋亡的动态变化及意义被引量：8
- 2017年
- 目的探讨博莱霉素诱导的肺纤维化模型小鼠肺泡巨噬细胞(AM)凋亡的动态变化及意义。方法 100只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组,每组各50只。模型组采用口咽吸入法给予博莱霉素A2(2.5 mg/kg)建立肺纤维化模型,对照组给予等体积生理盐水。建模后第1、3、7、14和21天每组随机处死10只动物,5只采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化,计算炎症评分及肺系数;另5只采用碱水解法测定肺组织羟脯氨酸(Hyp)的含量;记录肺泡灌洗液(BALF)中AM数目,流式细胞术检测AM凋亡情况。结果模型组小鼠第3天肺组织出现炎症细胞浸润、肺泡壁水肿增厚,炎症评分明显升高;第7天时炎症程度继续加重,炎症评分进一步升高;第14天和第21天时出现纤维增生和胶原沉积;第21天时炎症评分较第7天和第14天下降。第21天时模型组Hyp含量较第1、3、7天均明显升高,但与第14天相比无明显差异。在整个实验过程中,模型组的肺系数,AM数目及凋亡率呈现先升高后降低的变化,于第7天达到峰值。结论在博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化模型中,AM的数目和凋亡水平在前期的炎症反应阶段明显升高,在肺纤维化阶段出现下降。动态变化的AM可能在肺纤维化进展过程中发挥不同的作用。
- 李鑫李琦李祎苏程程周欣彭守春魏路清姬文婕
- 关键词：肺纤维化羟脯氨酸博莱霉素
- 百草枯致小鼠肺损伤后其单核巨噬细胞亚群的变化及意义
- 目的：研究百草枯致小鼠肺损伤后其单核巨噬细胞亚群的的变化规律与肺炎症损伤和纤维化的关系。方法：将120只C57BL/6小鼠随机分为NS组和PQ组,PQ组腹腔注射百草枯,NS组以相同的方式给予等体积的生理盐水；在造模后第1...
- 刘斌李鑫李琦李祎李国强魏路清
- 关键词：百草枯单核巨噬细胞肺损伤肺纤维化
- 甘草酸对博莱霉素诱导小鼠肺损伤的干预研究
- 目的 探讨甘草酸对博莱霉素诱导小鼠肺损伤的干预作用及其可能机制。 方法 通过口咽气管吸入法分别给予生理盐水和盐酸博莱霉素，治疗组每天给予GA 40mg？kg-1？d-1灌胃治疗，溶剂对照组给予生理盐水(5ml/kg)。病...
- 李祎
- 关键词：甘草酸博莱霉素肺损伤单核巨噬细胞
- 苦参碱通过调节单核吞噬细胞表型偏移改善博莱霉素诱导的肺纤维化被引量：8
- 2017年
- 目的:研究苦参碱(matrine,MA)对博菜霉素(bleomycin,BLM)诱导的循环单核细胞和肺泡巨噬细胞表型偏移的调节作用。方法:160只C57BL/6雄性小鼠随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、苦参碱干预组(BLM+MA组)及溶剂对照组(BLM+NS组)经口咽吸入法给予BLM(2.5 mg/kg)建立实验性肺纤维化模型,对照组给予等体积NS,BLM+MA组和BLM+NS组分别在术后每天灌胃给予MA(15 mg·kg^(-1)·d^(-1))或等量NS。术后第3、7、14和21天处死小鼠,采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用碱水解法测定肺组织羟脯氨酸的含量,用流式细胞术分别检测循环单核细胞亚群和支气管肺泡灌洗液细胞表型的变化。结果:与对照组相比,MA干预可以明显减轻BLM诱导的小鼠肺组织炎症反应及纤维化程度(P<0.05);与NS组相比,BLM组的Ly6C^(hi)单核细胞比例升高,肺泡巨噬细胞表型由M1型向M2型偏移且与炎症反应和纤维化程度呈现一定的相关性;MA干预后可以部分逆转BLM诱导的循环单核细胞和肺泡巨噬细胞的表型偏移。结论:苦参碱可以减轻BLM诱导的急性肺泡炎症和肺纤维化程度,可能是部分通过逆转循环单核细胞和肺泡巨噬细胞表型的偏移而实现的。
- 李鑫李琦李祎苏程程周欣彭守春魏路清姬文婕
- 关键词：苦参碱肺纤维化单核细胞博莱霉素
