杨孟华
- 作品数：15 被引量：45H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人端粒维持与肿瘤
- 2003年
- 杨孟华
- 关键词：端粒端粒酶肿瘤
- NHE1基因调控细胞内酸碱平衡对胃癌细胞生物学行为的影响
- 2005年
- 目的:通过基因转染技术,研究NHE1反义基因对SGC-7901 胃癌细胞生物学行为的影响,探讨通过酸化细胞内环境诱导肿瘤细胞凋亡从而治疗胃癌的新方法. 方法:利用亚克隆技术构建人NHE1反义结构基因哺乳动物真核表达质粒,通过DOTAP脂质体介导的转染技术将反义真核表达质粒和空载体分别转入SGC-7901胃癌细胞中, 经聚合酶链反应(PCR)对转染基因的整合鉴定后,观察基因转染对细胞形态学、细胞内pH值、体外生长状况、细胞周期以及双层软琼脂克隆形成能力和裸鼠成瘤力的影响. 结果:光镜及透射电镜下细胞形态恶性程度降低.Anti-7901 细胞胞内PH值显著低于Zeo-7901细胞和空白对照组SGC-7901细胞内pH值(6.77±0.05 vs 7.24±0.03,7.26±0.03, p<0.01).Anti-7901细胞生长速度明显减慢,出现接触抑制,呈单层生长,细胞凋亡率显著高于Zeo-7901细胞和空白对照组SGC-7901凋亡率(26.1% vs 5.12%,4.48%,P<0.01). Anti-7901细胞在双层软琼脂中集落形成率显著低于Zeo- 7901和空白对照组SGC-7901细胞(9±3.54‰vs 40±4.53‰, 38.6±4.63‰,P<0.01).接种Zeo-7901细胞和空白对照组SGC-7901细胞裸鼠皮下长出肿瘤,成瘤率为100%,而接种Anti-7901细胞裸鼠皮下未长出肿瘤,成瘤率为0%. 结论:反义技术干预可使NHE1基因表达下调,导致细胞内酸化,诱导细胞凋亡,达到了有效治疗胃癌的目的,为胃癌基因治疗提供了新的思路.
- 滕小春刘海峰房殿春杨仕明陈刚王国安杨孟华
- 关键词：细胞内胃癌细胞SGC-7901基因调控真核表达质粒
- 正反义人Tankyrase基因真核表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的 :构建人Tankyrase正义和反义真核表达载体 .方法 :用EcoRⅠ从TT2 0质粒上切下约 3.4 4kb的TankyrasecDNA片段 ,然后连入pcDNA3.1/Zeo的EcoRⅠ酶切位点上 ,经BamHⅠ酶切鉴定出正义和反义表达载体 .结果 :经BamHⅠ酶切后 ,正义质粒形成 5 .0 +3.4kb两条带 ,而反义重组质粒为 8.2 +0 .2kb两条带 ,与理论计算值完全一致 .结论 :成功构建了人Tankyrase的正。
- 杨孟华房殿春杨仕明罗元辉刘为纹
- 关键词：TANKYRASE端粒酶反义基因真核表达载体
- 人tankyrase 1反义基因转染对SGC-7901胃癌细胞形态学的影响
- 2011年
- 目的探讨反义tankyrase 1基因转染对SGC-7901胃癌细胞形态学的影响。方法构建人tankyrase 1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中,从光镜、电镜水平观察转染与未转染细胞形态学的变化。结果与亲本细胞相比,光镜下反义tankyrase 1基因转染的SGC-7901细胞胞体增大,胞浆丰富,核浆比例降低,核分裂象减少,核型变规则;透射电镜下核异型性减少,核膜较规则,细胞器丰富,部分细胞胞质内有微腺腔形成。结论反义Tankyrase 1基因转染能部分逆转SGC-7901细胞的恶性表型,有促进其分化的作用。
- 杨孟华杨仕明房殿春罗元辉
- 关键词：TANKYRASE真核表达载体反义基因胃癌
- 微波消融治疗肝癌42例治疗前后肝功能变化的临床观察
- 2013年
- 目的了解微波消融前后肝功能变化,观察治疗后对患者肝脏的损害程度及恢复时间,以便指导临床实践,评判患者预后。方法观察微波消融治疗前及治疗后1周、2周、1个月、2个月、3个月患者各项指标的变化。结果微波消融治疗后1周内肝功能变化明显,经保肝、降酶治疗后,大部分(86.7%)于1～2周逐渐恢复正常。1～3个月无明显变化。结论微波消融治疗肝癌是一项较为安全、有效的治疗方法。
- 宋岩王跃辉杨孟华李兵强国佳
- 关键词：微波消融肝功能
- 人肝素酶基因正反义腺病毒表达载体的构建及鉴定被引量：3
- 2004年
- 目的:构建人肝素酶正义和反义腺病毒表达载体.方法:用EcoRI从pcDNA3-hpa质粒上切下约1.7kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连入pDC315质粒的EcoRI酶切位点上,经BamHI酶切鉴定出正义和反义表达载体,并对正义重组质粒进一步采用测序鉴定其方向性.结果:经BamHI酶切后,正义质粒形成4.3+1.4kb两条带,而反义重组质粒为5.1+0.4kb两条带,与理论计算值完全一致;测序结果与GeneBank报告的肝素酶序列完全一致.结论:成功构建了人肝素酶的正、反义腺病毒表达载体,为进一步研究正、反义肝素酶基因转染对肿瘤细胞的影响奠定了基础.
- 蔡永国房殿春杨仕明罗元辉杨孟华王东旭
- 关键词：肝素酶基因腺病毒表达载体肿瘤转移
- 人NHE-1基因反义真核表达载体的构建及初步鉴定被引量：10
- 2004年
- 目的 构建人Na+ H+ 交换蛋白 1(Na+ H+ exchanger 1,NHE 1)基因反义真核表达载体。方法 采用分子克隆技术 ,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶从NHE 1cDNApEAP切下所需目的片段 ,然后将该片段反向插入真核表达载体pcDNA3 1( ) Zeo的多克隆位点 ,最后对产生重组子进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 经琼脂糖凝胶电泳鉴定 ,将目的片段成功的连接到pcDNA3 1( ) Zeo载体上。结论 成功地将NHE 1目的片段反向插入到pcDNA3 1( ) Zeo中 ,构建了人NHE 1反义表达真核载体hNHE 1。
- 滕小春刘海峰陈刚杨孟华杨仕明
- 关键词：胃肿瘤反义技术
- 原发性胃恶性淋巴瘤的X线与内镜诊断被引量：7
- 2002年
- 张红宾杨孟华
- 关键词：X线内镜检
- 腹水脱落细胞中肝素酶的表达对良恶性腹水鉴别诊断的价值被引量：3
- 2005年
- 肝素酶是近年来发现的能够降解基底膜及细胞外基质的关键酶,具有促进肿瘤细胞向周围组织间隙侵袭的作用.我们前期研究表明,肝素酶在胃癌组织中高表达,能够促进胃癌的血管生成、浸润与转移,是胃癌患者预后不良的一个指标[1].在腹水脱落细胞中肝素酶是否表达,能否用于鉴别腹水的性质鲜见报道.我们采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝素酶在腹水脱落细胞中的表达,探讨肝素酶在良恶性腹水鉴别诊断中的意义.
- 蔡永国房殿春杨仕明罗元辉陈陵杨孟华王东旭
- 关键词：腹水脱落细胞肝素酶恶性腹水良性腹水
- Tankyrase维持胃癌细胞端粒长度及其机制的研究
- 端粒是真核生物细胞染色体末端的特殊核酸蛋白结构，能保护染色体末端，防止发生核酸外切酶降解和染色体之间端端融合，以维持染色体结构的稳定。端粒长度维持对于肿瘤细胞保持永生化至为重要。端粒重复序列由端粒酶合成。近年来的研究表明...
- 杨孟华
- 关键词：胃癌端粒酶反义基因基因转染
- 文献传递
