李婷 作品数:8 被引量:17 H指数:3 供职机构: 集美大学 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 文化科学 更多>>
大肠埃希菌与酿酒酵母偶联合成S-腺苷甲硫氨酸 被引量:1 2015年 目的为大规模工业化生产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)提供一套经济合理的生产工艺。方法将经DNA序列测定正确的SAM合成酶基因(SAMS)片段,经Eco RⅠ和NotⅠ双酶切,亚克隆至大肠埃希菌表达载体p ET-28a上,构建SAMS基因重组表达质粒p ET-28a-SAMS。将重组表达质粒转入大肠埃希菌表达宿主BL21(DE3),构建大肠埃希菌表达菌株BL21(p ET-28a-SAMS)。采用混合悬浮培养法,利用含有SAMS基因的重组大肠埃希菌BL21(p ET-28a-SAMS)中的SAM合成酶系和酿酒酵母JM-310中的ATP生物合成酶系,构建一个以葡萄糖为能源的中间偶合ATP再生系统,并对两种细胞的偶联合成比例、偶联时间、通透剂的种类及浓度、偶联缓冲液主要成分的浓度进行优化。结果经双酶切及菌落PCR鉴定证明,重组表达质粒p ET-28a-SAMS及大肠埃希菌表达菌株BL21(p ET-28a-SAMS)构建正确。大肠埃希菌BL21(p ET-28a-SAMS)与酿酒酵母的最佳偶联合成比例为4∶1,最佳偶联时间为5 h,添加5%甲苯通透效果最好,200 mmol/L磷酸缓冲液、200 mmol/L葡萄糖、10 mmol/L腺苷、30 mmol/L Mg Cl2·6H2O、30 mmol/L L-甲硫氨酸为最适偶联缓冲体系。最佳偶联条件下,偶联系统中SAM的浓度最高达1.7 g/L,对照组中SAM的浓度为0.17 g/L。结论本研究建立的方法操作方便,工艺简单,为SAM的廉价生产提供了一条新的途径。 魏晓楠 燕龙龙 李婷 李欢 杜翠红关键词:大肠埃希菌 酿酒酵母 偶联 S-腺苷甲硫氨酸 黑曲霉胞外酶对绿茶挥发性成分及风味的影响研究 绿茶为未发酵茶,所含挥发性物质的种类和含量相对较低,可利用外源酶改善其品质。黑曲霉是国际上公认的安全菌株,研究黑曲霉分泌产生的胞外酶对绿茶风味的影响及挥发性风味成分之间的相互作用对改善绿茶风味具有重要意义。本文以绿茶为研... 李婷关键词:绿茶 挥发性物质 分子对接 鲫鱼MBSP重组表达系统的优化及其稳定性机制研究 酶工程技术在食品、医药及化工等领域起着越来越重要的作用,但工业用酶在实际应用过程中常会因其处在极端环境下而失活,从而极大地限制了其推广和应用。因此,对酶分子的稳定性改造是当前研究的热点和难点。而鱼类肌原纤维结合型丝氨酸蛋... 李婷关键词:毕赤酵母 定点突变 多克隆抗体 鲫鱼 丝氨酸蛋白酶 一种增加红茶粉香气的方法 本发明人公开了一种增加红茶粉香气的方法,包括以下步骤:步骤一、制备红茶粉:向红茶叶中加入水,料液比为1:18 g/mL,于95℃水浴逆流浸提30分钟,冷却至室温,进行碟分,并于40℃下超滤至浊度≤3.0NTU,将所得溶液... 倪辉 李婷 陈艳红 伍菱 姜泽东 杨远帆 杜希萍 朱艳冰 肖安风 李利君 黄高凌 李清彪文献传递 白姑鱼胰蛋白酶的分离纯化及其性质分析 被引量:1 2016年 本研究从白姑鱼幽门垂组织中提取胰蛋白酶粗酶,然后经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析及Sephacryl S-200凝胶过滤层析等分离纯化技术,得到一种阴离子型胰蛋白酶(命名为:Trypsin A),并对该阴离子型胰蛋白酶进行鉴定及性质分析。结果表明:Trypsin A的分子质量约为28 k D,其最适反应温度为50℃,能在低于65℃条件下保持稳定;最适p H值为9.5,酸碱耐受范围为p H 9.5~11.0;Western blotting分析表明,白姑鱼阴离子型胰蛋白酶可以与抗鲫鱼胰蛋白酶抗体反应,符合胰蛋白酶活性区域的高度保守性;丝氨酸类蛋白酶抑制剂对白姑鱼胰蛋白酶具有抑制作用。 李欢 李婷 詹云超 杜翠红关键词:胰蛋白酶 分离纯化 酶学性质 β-葡萄糖苷酶有效提升速溶乌龙茶粉水溶液的花香、果香及青草香 被引量:8 2018年 本实验采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对β-葡萄糖苷酶处理前后的速溶乌龙茶粉水溶液挥发性成分进行定性定量分析,结合其香气强度值(OAVs)及感官评价,分析其主要香气轮廓,确定β-葡萄糖苷酶对速溶乌龙茶粉挥发性成分的影响。经GC-MS分析,从β-葡萄糖苷酶处理前后的速溶乌龙茶粉水溶液中共鉴定出37种挥发性成分,其中醇类9种,酯类4种,烯烃类11种,呋喃类4种,醛类5种和其它类4种。酶处理后,顺式-3-己烯醇(15416.97μg/L)、己醇(476.14μg/L)、香叶醇(6542.43μg/L)、苯甲醛(707.32μg/L)、水杨酸甲酯(268.81μg/L)、3-甲基丁醇(95.24μg/L)、2-庚醇(61.26μg/L)、2-乙基己醇(47.61μg/L)、辛醇(30.29μg/L)、壬醇(103.26μg/L)、己酸己酯(87.75μg/L)的含量显著增加,且花香、果香和青草香大幅度增加,主要香气贡献成分为癸醛、顺式-3-己烯醇、香叶醇、2-甲基丁醛和2-乙基呋喃。研究表明β-葡萄糖苷酶可显著改变速溶乌龙茶粉水溶液的挥发性成分和香气轮廓,为速溶茶粉后续加工食品的风味改良提供了技术参考。 方可 李婷 朱艳冰 倪辉 倪辉关键词:Β-葡萄糖苷酶 感官评价 以人为本视角下中学生生命教育的缺失及对策研究--以初中《道德与法治》课为例 开展中学生的生命教育,不仅是贯彻“以生为本”教育理念的根本需要,更是促进中学生身心健康成长的必然要求。近年来,随着经济生活的快速发展,呈现出物质生活与精神生活的不平衡不协调趋势。社会价值取向的多元化和趋利化,教育价值指向... 李婷关键词:中学教育 生命教育 课堂教学 身心健康 脱咖啡因工艺对绿茶挥发性成分的影响 被引量:1 2019年 为了解脱咖啡因工艺对绿茶挥发性成分的影响,运用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)技术分析绿茶对照样品、绿茶咖啡因水提取液、绿茶水提取液及脱咖啡因绿茶水提取液的挥发性物质。结果共鉴定出42种挥发性物质,包括醛类17种,醇类9种,酮类5种,萜烯类5种,酯类2种和其它类4种。其中,在绿茶对照样品和3种提取液中分别检测出挥发性物质36,36,30种和16种。脱咖啡因绿茶水提取液与绿茶对照样品相比,损失的挥发性物质主要是醛类、醇类和萜烯类。绿茶对照样品和3种提取液的总香气强度值(OAV)分别为4836.6,4472.5,1779.5和1698.9,并且绿茶对照样品和绿茶咖啡因提取液的OAV值构成以花香、果香和草香为主,绿茶水提取液的OAV值构成以花香和甜香为主,脱咖啡因绿茶提取液的OAV值构成以花香为主。以上结果说明脱咖啡因工艺及水提取工艺都对茶叶挥发性成分具有显著影响,导致脱咖啡因绿茶提取液的风味轮廓与绿茶对照样品存在显著差异,对绿茶提取物加工具有良好的参考作用。 李婷 吕春秀 杨远帆 黄高凌 黄高凌 倪辉 杜希萍关键词:绿茶 挥发性物质