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李欢

作品数:2 被引量:2H指数:1
供职机构:集美大学食品与生物工程学院更多>>
发文基金:福建省自然科学基金更多>>
相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇性质分析
  • 1篇胰蛋白酶
  • 1篇酿酒
  • 1篇酿酒酵母
  • 1篇偶联
  • 1篇偶联合成
  • 1篇酶学性质
  • 1篇酵母
  • 1篇甲硫氨酸
  • 1篇分离纯化
  • 1篇埃希菌
  • 1篇氨酸
  • 1篇S-腺苷甲硫...
  • 1篇纯化
  • 1篇大肠埃希菌

机构

  • 2篇集美大学

作者

  • 2篇杜翠红
  • 2篇李欢
  • 2篇李婷
  • 1篇魏晓楠

传媒

  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇食品科学

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2015
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
大肠埃希菌与酿酒酵母偶联合成S-腺苷甲硫氨酸被引量:1
2015年
目的为大规模工业化生产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)提供一套经济合理的生产工艺。方法将经DNA序列测定正确的SAM合成酶基因(SAMS)片段,经Eco RⅠ和NotⅠ双酶切,亚克隆至大肠埃希菌表达载体p ET-28a上,构建SAMS基因重组表达质粒p ET-28a-SAMS。将重组表达质粒转入大肠埃希菌表达宿主BL21(DE3),构建大肠埃希菌表达菌株BL21(p ET-28a-SAMS)。采用混合悬浮培养法,利用含有SAMS基因的重组大肠埃希菌BL21(p ET-28a-SAMS)中的SAM合成酶系和酿酒酵母JM-310中的ATP生物合成酶系,构建一个以葡萄糖为能源的中间偶合ATP再生系统,并对两种细胞的偶联合成比例、偶联时间、通透剂的种类及浓度、偶联缓冲液主要成分的浓度进行优化。结果经双酶切及菌落PCR鉴定证明,重组表达质粒p ET-28a-SAMS及大肠埃希菌表达菌株BL21(p ET-28a-SAMS)构建正确。大肠埃希菌BL21(p ET-28a-SAMS)与酿酒酵母的最佳偶联合成比例为4∶1,最佳偶联时间为5 h,添加5%甲苯通透效果最好,200 mmol/L磷酸缓冲液、200 mmol/L葡萄糖、10 mmol/L腺苷、30 mmol/L Mg Cl2·6H2O、30 mmol/L L-甲硫氨酸为最适偶联缓冲体系。最佳偶联条件下,偶联系统中SAM的浓度最高达1.7 g/L,对照组中SAM的浓度为0.17 g/L。结论本研究建立的方法操作方便,工艺简单,为SAM的廉价生产提供了一条新的途径。
魏晓楠燕龙龙李婷李欢杜翠红
关键词:大肠埃希菌酿酒酵母偶联S-腺苷甲硫氨酸
白姑鱼胰蛋白酶的分离纯化及其性质分析被引量:1
2016年
本研究从白姑鱼幽门垂组织中提取胰蛋白酶粗酶,然后经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析及Sephacryl S-200凝胶过滤层析等分离纯化技术,得到一种阴离子型胰蛋白酶(命名为:Trypsin A),并对该阴离子型胰蛋白酶进行鉴定及性质分析。结果表明:Trypsin A的分子质量约为28 k D,其最适反应温度为50℃,能在低于65℃条件下保持稳定;最适p H值为9.5,酸碱耐受范围为p H 9.5~11.0;Western blotting分析表明,白姑鱼阴离子型胰蛋白酶可以与抗鲫鱼胰蛋白酶抗体反应,符合胰蛋白酶活性区域的高度保守性;丝氨酸类蛋白酶抑制剂对白姑鱼胰蛋白酶具有抑制作用。
李欢李婷詹云超杜翠红
关键词:胰蛋白酶分离纯化酶学性质
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