秦承学
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 表达猪圆环病毒2型Rep蛋白的重组杆状病毒的构建与鉴定被引量：7
- 2007年
- 猪圆环病毒2型(PCV2)是近年来新发现的引起断奶仔猪多系统衰弱综合征的主要病原,含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap)。为了探究ORF1基因结构及其与功能的关系,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将PCV2的ORF1基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBacTMDual中,获得重组转移载体pFBD-ORF1,再将其转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,经蓝白菌落筛选获得含有ORF1基因的重组穿梭载体rBacmid-ORF1,经脂质体介导转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rAc-Rep,SDS-PAGE和Western-blotting分析可见大小约为36ku的特异性条带,表明rAc-Rep在sf9中成功表达了PCV2Rep蛋白。
- 秦承学姜平王先炜李玉峰李艳伍李军星
- 关键词：猪圆环病毒2型REP蛋白杆状病毒
- 地高辛标记cDNA探针检测猪繁殖与呼吸综合征病毒被引量：8
- 2007年
- 本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株ORF7基因为模板,通过RT-PCR技术扩增出394 bp的cDNA。用PCR纯化试剂盒纯化PCR产物,并以此为模板制备出地高辛标记的cDNA探针。特异性试验表明,该探针仅与PRRSV核酸反应,与PPV、PRV、FMDV、HCV及PCV2的核酸反应为阴性。敏感性检测表明,采用CSPD化学发光检测时,硝酸纤维素膜上最低检出量为62.5 pg;尼龙膜上最低检出量为0.5 pg。应用该探针,在尼龙膜上对10份PRRSV阳性病料的组织RNA样品进行检测,结果均为阳性,与RT-PCR检测结果一致,证明该方法可用于PRRSV临床样品检测。
- 李广明姜平李玉峰秦承学
- 关键词：地高辛标记探针斑点杂交化学发光
- 猪圆环病毒2型ORF1基因在大肠杆菌和昆虫杆状病毒中的表达与鉴定
- 猪圆环病毒/(porcine circovirus，PCV/)有2种基因型即PCV1和PCV2，其中PCV1广泛存在于猪源肾细胞中，但不引起感染猪发病，而PCV2是近年来新发现的引起断奶仔猪多系统衰竭综合征/(post ...
- 秦承学
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF1基因大肠杆菌杆状病毒
- 文献传递
