江渊
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:山东大学齐鲁医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- HBV适应性杂交细胞株的建立和初步研究
- 2008年
- 目的建立不同于HepG2细胞及人原代肝细胞的新型杂交细胞株,使该细胞株既能长期携带HBV又能体外传代培养。方法诱导HepG2细胞产生HGPRT基因突变,将筛选出的HGPRT阴性的HepG2细胞与携带HBV的人原代肝细胞进行融合得杂交细胞,用HAT培养基筛选出异核体杂交细胞,再利用有限稀释法进行克隆,通过核型分析方法鉴定所得细胞。对所得杂交细胞及培养上清液进行HBV DNA和HBsAg、HBeAg的检测。实验同时,用未杂交的HepG2和人原代肝细胞作对照。结果经筛选后,有一杂交细胞株(HepCHLine3)克隆成功。HepCHLine3在形态学上与HGPRT-HepG2细胞相似,能体外传代培养,染色体核型分析示HepCHLine3杂交细胞染色体众数为99条,证明为融合细胞株,含所有来自HepG2和人原代肝细胞的基因数。传代培养的Hep-CHLine3和其培养上清液用巢式PCR分别可检测到HBV DNA,培养上清液内检测到HBsAg和HBeAg。对照组的HepG2和人原代肝细胞相应结果为阴性。提示该细胞携带并分泌HBV DNA。结论该杂交细胞兼具HepG2细胞体外传代和人原代肝细胞对HBV易感的特性,是一新型杂交细胞系,为进一步建立新型HBV感染细胞模型奠定了基础。
- 王爱华马立宪江渊邵丽华王刚陈丰哲王旭平
- 关键词:HEPG2细胞细胞融合
- 适应人乙肝病毒自然感染复制并可传代培养的杂交细胞系
- 本发明涉及一种适应人乙肝病毒自然感染复制并可传代培养的杂交细胞系及其制备方法,杂交细胞系HepCHLine是由人原代肝细胞和筛选HGPRT阴性的HepG2作为亲本细胞,经融合杂交而得,是一种全新的物质。HepCHLine...
- 马立宪王刚邵丽华江渊王爱华
- 文献传递
- HBV携带者肝细胞体外培养的研究被引量:1
- 2008年
- 目的:体外培养HBV携带者人原代肝细胞,研究细胞内HBV的复制情况及持续时间,为临床抗病毒试验治疗奠定基础。方法:分离HBV携带者人原代肝细胞进行体外培养。14d后,测绘细胞的生长曲线和细胞核型分析。分别用巢式PCR和ELISA法对细胞匀浆及培养上清液进行HBV-DNA和HBsAg、HBeAg的检测。结果:HBV携带者人原代肝细胞和培养上清液可检测到HBV-rcDNA,培养上清液内检测到HBsAg和HBeAg。细胞培养3周时开始出现大量死亡。结论:该细胞体外培养期间仍能保持对HBV感染和复制的特性,为体外研究HBV感染情况奠定了基础。
- 王爱华江渊邵丽华王刚陈丰哲张秀美马立宪
- 关键词:体外培养HEPG2细胞