孙芳芳
- 作品数:5 被引量:20H指数:2
- 供职机构:中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金:国家重大科学仪器设备开发专项国家科技支撑计划质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 氯霉素ELISA检测试剂盒评价技术被引量:8
- 2013年
- 酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒作为多种实验要素的集合,已经广泛应用于日常检测和实验研究中。为了解国产氯霉素试剂盒的有效性和可靠性,选择一种市售试剂盒,从灵敏度、特异性、准确度、重复性、检出限、耐变性、批间变异等多个角度对其进行了技术评价。该试剂盒在测试范围内线性回归良好,相关系数R2可达0.9945,与结构相似的棕榈氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的交叉反应率均小于0.1%,批间变异系数小于20%,鸡肉、虾肉的平均回收率为100.9%、100.7%,相应的检测限是0.077、0.128ng/mL,可以满足"2012年度动物及动物产品兽药残留监控计划"的限量标准(0.3ng/mL)要求。
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- 关键词:氯霉素ELISA
- 睾丸酮丛毛单胞菌ATCC 11996类固醇脱氢酶3α-HSD的高效表达与纯化被引量:2
- 2013年
- 利用分子克隆的方法扩增与克隆睾丸酮丛毛单胞菌ATCC 11996的3α-HSD基因,构建以pET-15b为载体的表达工程菌,IPTG诱导蛋白表达,通过优化表达菌的最佳表达条件得到最大表达量的目的蛋白。诱导后将工程菌裂解,通过硫酸铵沉淀,Ni-NTA亲和层析,分子筛分离进行纯化,并测定纯化后蛋白的酶活性。结果表明:1)克隆获得了睾丸酮丛毛单胞菌3α-HSD基因并实现了异源表达;2)工程菌的最佳表达条件为:37℃培养,0.6mmol/L IPTG诱导4h,培养基中Zn2+终浓度为0.1mmol/L;3)表达工程菌裂解后用60%硫酸铵沉淀,亲和层析和分子筛分离后得到了纯度高达99%的目的蛋白,纯化后的蛋白保持酶活性。本试验成功克隆表达了睾丸酮丛毛单胞菌3α-HSD基因,建立了3α-HSD的高效表达与纯化方法,为相应抗体的制备与水资源中的类固醇激素检测方法的建立提供基础。
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- 关键词:睾丸酮丛毛单胞菌纯化
- 口蹄疫病毒分型诊断环介导等温扩增试剂盒及其使用方法
- 本发明公开了一种用于口蹄疫病毒诊断的环介导等温扩增试剂盒及其使用方法。所述试剂盒,其特征在于,分别由O型、AsiaI型、A型、C型、SAT1型、SAT2型、SAT3型口蹄疫病毒环介导等温扩增引物混合液、环介导等温扩增反应...
- 邹明强薛强孙芳芳
- 文献传递
- 分型诊断口蹄疫病毒的引物、探针及其试剂盒和使用方法
- 本发明公开了一种用于诊断口蹄疫病毒的引物、探针及其试剂盒和使用方法。其中,O型、AsiaI型、A型、C型口蹄疫病毒共用一条上游引物,SAT1型、SAT2型、SAT3型口蹄疫病毒共用一条上游引物,所有血清型口蹄疫病毒共用一...
- 邹明强薛强孙芳芳
- 文献传递
- 口蹄疫病毒分子生物学检测方法研究进展被引量:10
- 2013年
- 口蹄疫是一种高度传染的病毒性疫病,及早诊断意义重大。分子生物学检测方法在口蹄疫病诊断和病毒分型过程中具有许多优势,已经广泛应用。作者对实时荧光PCR法、多重PCR法、核酸杂交法、基因芯片法、环介导等温扩增法及核酸序列依赖扩增法等进行分析和比较,对各种方法的检测效率、灵敏度、优缺点及国内外的研究情况进行综述,为口蹄疫病毒分子生物学检测方法的应用与深入开发提供参考。
- 孙芳芳董英薛强邹明强
- 关键词:口蹄疫病毒基因检测基因分型