肖琳
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程环境科学与工程医药卫生更多>>
- 睾丸酮丛毛单胞菌ATCC 11996类固醇脱氢酶3α-HSD的高效表达与纯化被引量：2
- 2013年
- 利用分子克隆的方法扩增与克隆睾丸酮丛毛单胞菌ATCC 11996的3α-HSD基因,构建以pET-15b为载体的表达工程菌,IPTG诱导蛋白表达,通过优化表达菌的最佳表达条件得到最大表达量的目的蛋白。诱导后将工程菌裂解,通过硫酸铵沉淀,Ni-NTA亲和层析,分子筛分离进行纯化,并测定纯化后蛋白的酶活性。结果表明:1)克隆获得了睾丸酮丛毛单胞菌3α-HSD基因并实现了异源表达;2)工程菌的最佳表达条件为:37℃培养,0.6mmol/L IPTG诱导4h,培养基中Zn2+终浓度为0.1mmol/L;3)表达工程菌裂解后用60%硫酸铵沉淀,亲和层析和分子筛分离后得到了纯度高达99%的目的蛋白,纯化后的蛋白保持酶活性。本试验成功克隆表达了睾丸酮丛毛单胞菌3α-HSD基因,建立了3α-HSD的高效表达与纯化方法,为相应抗体的制备与水资源中的类固醇激素检测方法的建立提供基础。
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- 关键词：睾丸酮丛毛单胞菌纯化
- 氯霉素ELISA检测试剂盒评价技术被引量：8
- 2013年
- 酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒作为多种实验要素的集合,已经广泛应用于日常检测和实验研究中。为了解国产氯霉素试剂盒的有效性和可靠性,选择一种市售试剂盒,从灵敏度、特异性、准确度、重复性、检出限、耐变性、批间变异等多个角度对其进行了技术评价。该试剂盒在测试范围内线性回归良好,相关系数R2可达0.9945,与结构相似的棕榈氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的交叉反应率均小于0.1%,批间变异系数小于20%,鸡肉、虾肉的平均回收率为100.9%、100.7%,相应的检测限是0.077、0.128ng/mL,可以满足"2012年度动物及动物产品兽药残留监控计划"的限量标准(0.3ng/mL)要求。
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- 关键词：氯霉素ELISA
- 环境激素及其检测方法的研究进展被引量：4
- 2013年
- 简要介绍了环境激素的危害及检测方法的发展情况,对环境激素检测的前处理方法和检测手段进行了概述,对传统前处理方法和固相萃取、固相微萃取技术进行了比较。对主要的检测方法的研究进展进行了分析,并对检测技术发展前景作了展望。
- 冯叙桥肖琳李乐孙炳新薛强邹明强
- 关键词：环境激素前处理方法
